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《蕪菁花青素生物合成相關催化酶基因的克隆及uv-a誘導表達》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關內容在學術論文-天天文庫。
1、萬方數據UniversityCode：10225RegisterCode：080062DissertationfortheDegreeofMasterCLONINGANDEXPRESSIONOFTHEGENESRELATEDTOANTHOCYANINBIOSYNTHESISINTURNIPCandidate：Supervisor：AssociateSupervisor：AcademicDegreeAppliedfor：Speciality：DateofOralExamination：University：趴眥NProf．Li
2、YuhuaProfXUZhiruMasterofScienceDevelopmentalBiology2008．06NortheastForestry摘要一萬方數據植物的色素主要有三大類：甜菜堿類、類胡蘿卜素和花青素類?；ㄇ嗨厥谴嬖谟谥参镏械乃苄陨兀蠹s88％的被子植物的花顏色是由花青素決定的?；ㄇ嗨刂饕e累在植物液泡中，具有多種生理功能，例如吸引昆蟲傳粉，抵御低溫和紫外線傷害，以及防治病蟲害、抗氧化衰老等?；ㄇ嗨厣锖铣纱x途徑是類黃酮途徑的一個分支，其調控機制的相關研究己成為生命科學研究的熱點之一。花青素生物合成途經
3、中有很多重要的催化酶參與，如苯丙氨酸解氨酶(phenylalanineammonialyase，PAL)是苯丙烷類代謝第一步反應的催化酶：苯基苯乙烯酮黃烷酮異構酶(chalcone．flavanoneisomerase，Cm)催化苯基苯乙烯酮發(fā)生分子內反應；黃烷酮．3．羥化酶(flavanone3-hydroxylase，F3H)可以催化4，5，7．三羥基黃烷酮生成二氫堪非醇。本研究以花青素生物合成依光型津田蕪菁和非依光型赤丸蕪菁為試材，利用RT-PCR方法分別克隆了花青素合成的主要催化酶基因PAL、CHI和F3H的全長cD
4、NA序列。利用兩個品種間PAL、CHI和F3H基因高度同源序列設計引物合成探針。利用UV．-A處理津田蕪菁和赤丸蕪菁未見光塊根0h、6h、12h、18h、24h和48h，通過Northem雜交技術檢測PAL、CHI和乃日基因的表達量變化情況。主要研究結果如下：(1)津田蕪菁和赤丸蕪菁的PAL全長基因的開放閱讀框(OpenReadingFrame，ORF)均為2169bp，編碼722個氨基酸，在GenBank中的登錄號分別為EU402423．1和EU，402424．1。兩種蕪菁PAL基因的核苷酸序列與甘藍型油菜(Brassic
5、anapus)PAL．J的同源性達99％，PAL氨基酸序列與甘藍型油菜PAL的同源性達99％。從第67到第532的氨基酸序列含有PAL結構域。津田蕪菁和赤丸蕪菁PAL基因的核苷酸序列在9個位置上存在差異，推導的氨基酸序列在3個位置上存在差異。津田蕪菁和赤丸蕪菁的CHI全長基因的ORF均為756bp，編碼251個氨基酸，在G-enBank中的登錄號為EU402416．1和EU402417．1。兩種蕪菁基因的核替酸序列與蘿卜(Raphanussativus)CHI的同源性達95％，CHI氨基酸序列與蘿卜CHI的同源性達91％。從
6、第11到第222的氨基酸序列含有CHI結構域。津田蕪菁和赤丸蕪菁CHI基因的核苷酸序列在3個位置上存在差異，推導的氨基酸序列在3個位置上存在差異。津田蕪菁和赤丸蕪菁的F3H全長基因的核苷酸序列完全相同，ORF為1077bp，編碼358個氨基酸，在GenBank中的登錄號為EU402422．1。核苷酸序列與甘藍型油菜(Brassicanapus)F3H-1的同源性達98％，推導的氨基酸序列與甘藍型油菜F3H-1的同源性達99％，從第35到第342的氨基酸序列含有F3H相關的結構域。(2)Northem雜交結果表明，IⅣ-A可以
7、誘導津田蕪菁和赤丸蕪菁PAL、CHI和F3H基因的表達，PAL、CHI和F3H基因的表達量與I『’譏A處理時間存在相關關系。關鍵詞蕪菁；花青素；Uv-A；基因克?。换虮磉_萬方數據AbstractTherearethreemajorplantcoloringmatters：betaine，carotenoidandanthocyanin,amongwhichaIlmoq詘isawater-solublepigmentwhichpresentsinplantsanddecidestheflowercolorofapproxim
8、ately88％oftheangiosperms．Mainlyaccumulatinginvacuoles，Procyanidinhasavarietyofphysiologicalfunctions，suchaSattractinginsectpollinators，resistingh
