棉酚生物合成關鍵酶杜松烯合成酶基因的克隆及表達研究

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1、分類號Ｓ３３０ｉｍ學號誦１６５山巧ｉｆ大聲全日制碩±學位論文棉國分生物合成關鍵酶杜松婦合成酶基因的克?。崳娂氨磉_研究姓名；高艷菊指導教師：黃晉跨教授學科專業(yè)：作物遺傳育種培養(yǎng)單位：農學院中國？山西？太谷二〇＿五年六月ＳｈａｎｘｉＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙＦｕ－ｌｌｔｉｍｅＭａｓｔｅｒＤｅｒｅｅｇＤｉｓｓｅｒｔａｔｉｏｎＣｌｏｎｉｎｇａｎｄＥｘｐｒｅｓｓｉｏｎＡｎａｌｙｓｉｓｏｆＣｏｔｔｏｎＡＢＨｃａｄＧｅｎｅａＫｅｙＥｎｚｙｍｅｉｎｔｈｅＢｉｏｓｙｎｔｈｅｓｉｓｏｆＧｏｓ

2、ｓｏｌｙｐＮａｍｅ；ＹａｎｕＧａｏｊＳｕｐｅｒｖｉｓｏｒ：Ｐｒｏｆ．ＪｉｎｌｉｎｇＨｕａｎｇＭａｏｒ：ＣｒｏＧｅｎｅｔｉｃｓａｎｄＢｒｅｅｄｉｎｇｊｐＴｒａｉｎｉｎｇＵｎｉｔ：ＣｏｌｌｅｇｅｏｆＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒｅＴａｉｕＳｈａｎｘｉＣｈｉｎａｇＪｕｎｅ２０１５，學位論義原創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明：所提交的學位論文，是在導師指導下，獨立進行研究工作所取得的成果。換文中已注明引用的內容外，本論文不包含任何其他個人或集體已經發(fā)表或撰寫過的作品成果。對本文研究做出過重要貢獻的個人和集體，均已在文中ｋ乂明確方式標明。本人

3、完全意識到本聲明的法律后果由本人承擔。＞之作者簽遂（親筆）：馬樓萄／夕年月／日學位論義版權使用授權書本學位論文作者完全了解學枚有關保留、使用學位論文的規(guī)定。即學位論文的知識產權屬山西農業(yè)大學；同意學校保留并向國家有關、復印件和電子版部口或機構送交論文的原件；允許論文被查巧和借巧；本人授權山西農業(yè)大學可ｋ義將學位論文的全部或部分內容編入有關數據庫進行檢索，可從采用影印、縮印或擔描等復制手段保存、；ｎ編學位論文。／么作者簽為（親筆南絶瑪卻巧年＾月日導師簽違（親筆年Ｙ月／＞目目錄Ｍ＾１一第部分文獻綜述３１１．植物的次生代謝及儲藏器

4、官３Ｕ．１植物的次生代謝３１丄２棉敵及其生物學作用３Ｕ．３棉４瞭的儲藏器官１．２棉酪代謝途徑及其關鍵酶基因的克?。墸担崳姡保玻泵蘅岽x途徑５，１．２．２棉獻合成關鍵酶基因杜松帰合酶的研究６１．２．３基因克隆的策略７１．３低筋棉育種研究進展８１．３．１低酪棉育種新目標８１３２．．棉花色素腺體延緩形成性狀９１．４本研究的目的和意義９１．５技術路線１０第二部分色素腺體表型及棉獻含量的測定１１２．１供試材料及試劑１１２丄１供試材料１１２丄２試驗試劑１１２丄３試驗儀器１１２．２試驗方法１１

5、２．２．１色素腺體密度測定１１２．２．２棉酶含量測定１２２３１．結果與分析３２．３．１Ｈ種近等基因系色素腺體分布１３２．３．２ＧＩ１、ＧＩ３品系云個不同時期各組織棉獻含量的測定１６２．３．３ＧＩ１、ＧＩ３品系各組織在不同時期棉齡含量的變化１７２．４職１８２．４．１色素腺體分布的多樣性１８２．４．２色素腺體與棉酌相關性１８２．４．３色素腺體延緩形成１９２．５結論１９第Ｈ部分棉花杜松稀合酶基因的克隆與序列分析２０３．１供試材料及試劑２０３丄１供試材料２０３丄２試驗試劑２０２０３丄３引物及測序

6、３丄４試驗儀器２０２３．２試驗方法１３．２．１ＤＮＡ的提?。墸玻保崳姡常玻部偅遥危恋奶崛。墸玻玻崳姡常玻常墸恚遥危粒玻玻崳姡牭姆蛛x３．２．４ｍＲＮＡ反轉錄２３３．２．５引物搜計２５３．２．６杜松帰合酶基因ｃＤＮＡ中間部分的克?。墸玻叮崳姡В常茫模危粒担墸玻罚崳姡玻坊删喓厦富蚨说目寺。В常墸玻付潘蓩D合酶基因的３ＲＡＣＥ２７＇３．２９３ｃＤＮＡ３１．末端的擴增３３２．２．１０杜松帰合酶基因的基因組序列克?。常墸玻保睌U増產物的檢測及回收３３３．２．１２ＬＢ培養(yǎng)基的配方３４３．２．１３載體的連接及轉化

7、３４３．３結果與分析％３．３．１總ＲＮＡ質量的檢測３６３ＮＡ的３６．３．２基因組Ｄ質量檢測３．３．３杜松巧合酶基因中間片段的合成３７＇３．３．４杜松帰合酶基因５端片段的合成３８＇３．３．５化松帰合酶基因３端片段的合成３８３．３．６完整杜松稀合酶基因的拼接４０３．３．７地成化／基因ｃＤＮＡ的生物信息學分析４１３．３．８粗松帰合酶基因的基因組序列克隆及分析４４３４４