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《月季丁香酚合成酶基因的克隆及其表達(dá)分析》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在行業(yè)資料-天天文庫。
1、園藝學(xué)報(bào)2012，39（7）：1387–1394http://www.ahs.ac.cnActaHorticulturaeSinicaE-mail:yuanyixuebao@126.com月季（Rosachinensis）丁香酚合成酶基因RcEGS1的克隆及其表達(dá)分析1,2222222王海萍，晏慧君，張顥，蹇洪英，王其剛，邱顯欽，李淑斌，21,2,*周寧寧，唐開學(xué)12（華中農(nóng)業(yè)大學(xué)園藝林學(xué)學(xué)院，武漢430070；云南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院花卉研究所，云南省花卉育種重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，昆明650205）摘要：根據(jù)GenBank發(fā)表的丁香酚合成酶（EGS）基因的蛋白保守序列設(shè)計(jì)引物，利用RT-PCR結(jié)合R
2、ACE-PCR技術(shù)，從古老月季（Rosachinensis）品種‘月月粉’盛開期的花瓣中獲得了1個(gè)新的丁香酚合成酶基因RcEGS1，GenBank登錄號(hào)為JQ522949。該基因全長為1171bp，開放閱讀框（ORF）951bp，編碼317個(gè)氨基酸；蛋白質(zhì)理論分子量為35.64kD，等電點(diǎn)為7.36。氨基酸同源性分析表明，RcEGS1與矮牽牛PhIGS1的氨基酸同源性達(dá)到70%，與羅勒ObEGS1的同源性為59%，與月季RhEGS1的同源性僅為48.2%。運(yùn)用實(shí)時(shí)熒光定量PCR法分析RcEGS1在不同組織部位和不同開放時(shí)期花瓣中的表達(dá)，發(fā)現(xiàn)其在葉片和莖段中沒有表達(dá)，在花瓣和萼片中有表
3、達(dá)，在盛開期的花瓣中表達(dá)量最高。關(guān)鍵詞：月季；花香；丁香酚合成酶基因；實(shí)時(shí)定量PCR中圖分類號(hào)：S685.12文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A文章編號(hào)：0513-353X（2012）07-1387-08CloningandExpressionAnalysisofEugenolSynthaseGeneRcEGS1inRosachinensis‘Pallida’1,222222WANGHai-ping，YANHui-jun，ZHANGHao，JIANHong-ying，WANGQi-gang，QIUXian-qin，221,2,*LIShu-bin，ZHOUNing-ning，andTANGKai-xue
4、12（CollegeofHorticultureandForestrySciences，HuazhongAgriculturalUniversity，Wuhan430070，China；YunnanFlowerBreedingKeyLab，F(xiàn)lowerResearchInstitute，YunnanAcademyofAgriculturalSciences，Kunming650205，China）Abstract：UsingPCRdegenerateprimersdesignedbasedonGenBankpublishedtheconservedproteinsequencesof
5、eugenolsynthasegenestoamplifycDNAfragmentsbyRT-PCRandRACE-PCR，aneweugenolsynthasegenenamedRcEGS1wasclonedfromtheflowerpetalofRosachinensis‘Pallida’，anditsGenBankaccessionnumberisJQ522949.ThefullcDNAwas1171bpinlengthwithanopenreadingframe（ORF）of951bpencodingaproteinof317aminoacids.Molecularweigh
6、tandisoelectricpointoftheproteinwas35.64kDand7.36，respectively.AminoacidshomologyanalysisindicatedthattheRcEGS1andRhEGS1proteinsare47.7%identicaltoeachother，andhad70%and59%homologieswithCbEGS2inClarkiabreweriandPhEGS1inPetuniahybirida，respectively.TheexpressionprofileofRcEGS1indifferenttissuesa
7、nddifferentdevelopmentalstagesofroseflowerwasanalyzedbyquantitative收稿日期：2012–02–07；修回日期：2012–05–11基金項(xiàng)目：國家自然科學(xué)基金項(xiàng)目（31060268）；云南省青年基金項(xiàng)目（2010CD097）；云南省科技創(chuàng)新強(qiáng)省計(jì)劃項(xiàng)目（2007C0004Z）*通信作者Authorforcorrespondence（E-mail：kxtang@hotmail.com）1388園
