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《茉莉花萜類合成酶基因JsTPS的克隆及其表達(dá)分析》由會員上傳分享,免費(fèi)在線閱讀,更多相關(guān)內(nèi)容在行業(yè)資料-天天文庫。
1、園藝學(xué)報,2016,43(2):356–364.ActaHorticulturaeSinica356doi:10.16420/j.issn.0513-353x.2015-0803;http://www.ahs.ac.cn茉莉花萜類合成酶基因JsTPS的克隆及其表達(dá)分析1,*1,*211,**1,**俞瀅,陳丹,孫君,呂恃衡,陳桂信,葉乃興12(福建農(nóng)林大學(xué)園藝學(xué)院/茶學(xué)福建省高等學(xué)校重點實驗室,福州350002;福建省農(nóng)業(yè)科學(xué)院茶葉研究所,福建福安355015)摘要:以雙瓣茉莉花[Jasminumsambac(L.)Ait]花瓣為材料,采用RT-PCR和RA
2、CE技術(shù)相結(jié)合的方法,克隆了萜類合成酶基因(JsTPS)的全長cDNA,該cDNA全長為1884bp,其中ORF為1491bp,編碼496個氨基酸的蛋白,分子量56989.7D,與原核表達(dá)結(jié)果一致。序列分析結(jié)果表明,該基因編碼的氨基酸序列與油橄欖(Oleaeuropaea)的TPS2具有75%的同源性,同屬于α-Farnesenesynthase分支。采用熒光定量PCR技術(shù)檢測JsTPS在茉莉花開放過程中的表達(dá)量變化,結(jié)果表明,表達(dá)量在未開放時(18:00)最低,在半開放時(22:00)達(dá)到最高。關(guān)鍵詞:茉莉花;萜類合成酶;實時熒光定量PCR;原核表達(dá)中圖分
3、類號:S685.16文獻(xiàn)標(biāo)志碼:A文章編號:0513-353X(2016)02-0356-09CloningandExpressionAnalysisofTerpeneSynthaseGenefromJasminumsambac1,*1,*211,**1,**YUYing,CHENDan,SUNJun,LüShi-heng,CHENGui-xin,andYENai-xing1(CollegeofHorticulture,F(xiàn)ujianAgricultureandForestryUniversity,KeyLaboratoryofTeaScienceatUniv
4、ersitiesin2Fujian,F(xiàn)uzhou350002,China;TeaResearchInstitute,F(xiàn)ujianAcademyofAgriculturalSciences,F(xiàn)u’an,F(xiàn)ujian355015,China)Abstract:ThefulllengthcDNAofterpenesynthasegene(JsTPS)wasclonedbycombinationofRT-PCRandRACEfrompetalsofJasminumsambac.TheresultsshowedthatfulllengthcDNAcontained14
5、91bpincludingan1884bpORF,encodinga56989.7Dproteinwith496aminoacidswhosemolecularweightwasconsistenttothatofproductofthegenebyprokaryoticexpression;Theresultofalignmentofaminoacidshowedthatthegenehadahomologyof75%tothatofolive(Oleaeuropaea),belongingtoα-Farnesenesynthases;Quantities
6、ofthegeneweredetectedbyreal-timePCRinprocessofopeningofflower,theresultsshowedthattheexpressinglevelofthegenewasminimumat18:00whentheflowerswerenotopen,thenhadbeenincreasinguntilat22:00whentheexpressinglevelreachedtomaximumandtheflowerswasopening.收稿日期:2015–12–25;修回日期:2016–02–18基金項目
7、:福建省自然科學(xué)基金項目(2016J01110);福州市科技局市校合作項目(2013-G-103);福州市農(nóng)業(yè)局2014年福州茉莉花茶產(chǎn)業(yè)提升項目(2014-3)*同等貢獻(xiàn)者**通信作者Authorforcorrespondence(E-mail:ynxtea@126.com,guixinchen@126.com;Tel:0591-83735681)俞瀅,陳丹,孫君,呂恃衡,陳桂信,葉乃興.茉莉花萜類合成酶基因JsTPS的克隆及其表達(dá)分析.園藝學(xué)報,2016,43(2):356–364.357Keywords:Jasminumsambac;terpenesy
8、nthasegene;quantitativerea