遼寧絨山羊pomp基因在毛囊發(fā)育中的表達(dá)研究

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4、，其他同志的研究成果對本人的。肩示和所提供的幫助，均已在論文中做了明確的聲明并表示謝意學(xué)位論文作者簽名：名辛學(xué)位論文版權(quán)的使用授權(quán)書本學(xué)位論文作者完全了解遷寧師范大學(xué)有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定，及學(xué)校有權(quán)保留并向國家有關(guān)部口或機(jī)構(gòu)送交復(fù)印件或磁盤，允許論文被查閱和借閱。本文授權(quán)＾斗將學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫并進(jìn)行撿索江寧師范大學(xué)，可，可Ｗ采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存、匯編學(xué)位論文，并且本人電子文檔的內(nèi)容和紙質(zhì)論文的內(nèi)容相－－致。保密的學(xué)位論文在解密后使用本授權(quán)書。＇學(xué)位論文作者簽名：杏１指導(dǎo)教師

5、簽名＝可／？簽名日期：衣戶年＾月／日分類號：學(xué)校代碼：10165密級：學(xué)號：201211001100碩士學(xué)位論文遼寧絨山羊POMP基因在毛囊發(fā)育中的表達(dá)研究作者姓名：黃楠學(xué)科、專業(yè)：細(xì)胞生物學(xué)研究方向：糖生物學(xué)導(dǎo)師姓名：樸君教授2015年3月遼寧師范大學(xué)碩士學(xué)位論文摘要在本實(shí)驗室前期構(gòu)建的遼寧絨山羊毛囊興盛期cDNA質(zhì)粒文庫中，經(jīng)拼接測通后得到了遼寧絨山羊proteasomematurationprotein（POMP)基因序列,旨在研究遼寧絨山羊PMOP基因在毛囊發(fā)育與絨毛生長中的作用。首先對POMP基因進(jìn)行生物信息學(xué)分析，然后利用原位雜交技術(shù)對

6、其進(jìn)行定位分析；RT-PCR檢測POMP基因在心、肝、腎、肺、脾、皮膚中表達(dá)信號；RealTimePCR檢測該基因在毛囊發(fā)育的三個階段的表達(dá)以及加入外源褪黑激素和FGF5以及IGF-1三種因子對遼寧絨山羊成纖維細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)后細(xì)胞中POMP基因的表達(dá)量變化。實(shí)驗結(jié)果如下：生物信息學(xué)分析表明，遼寧絨山羊POMP基因全長1278bp，編碼141個氨基酸，該蛋白基因與牛屬同源性最高；原位雜交結(jié)果顯示，在初、次級毛囊中，POMP在內(nèi)根鞘中表達(dá)強(qiáng)烈，在皮質(zhì)層、角質(zhì)層以及髓質(zhì)中也存在表達(dá)，外根鞘中未出現(xiàn)表達(dá)信號；RT-PCR顯示，POMP基因在心、肝、腎、肺、脾、皮膚中均有

7、表達(dá)；RealTimePCR檢測結(jié)果顯示，在遼寧絨山羊絨毛生長興盛期和退行期，POMP基因次級毛囊中的表達(dá)量均高于初級毛囊中的表達(dá)量；外源褪黑激素、FGF5以及IGF-5細(xì)胞因子分別處理成纖維細(xì)胞結(jié)果顯示，分別加入外源褪黑激素和IGF-1后POMP基因表達(dá)量低于對照組，加入10^(-5)g/L外源FGF5在處理羊成纖維細(xì)胞24小時后，POMP基因的表達(dá)量高于對照組。此外，褪黑激素和FGF5協(xié)同處理細(xì)胞后POMP的表達(dá)量低于對照組，褪黑激素與IGF-1協(xié)同作用于成纖維細(xì)胞后POMP基因表達(dá)量高于對照組。結(jié)論：POMP基因普遍存在于遼寧絨山羊各組織器官中，且參與調(diào)

8、控初、次級毛囊發(fā)育的過程；外源褪黑激素