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《二甲雙胍對人食管癌細(xì)胞系kyse450增殖和凋亡的影響及其機(jī)制》由會員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。
1、學(xué)校代碼10459學(xué)號或申請?zhí)?01212443402密級公開鄞州k%碩士學(xué)位論文二甲雙胍對人食管癌細(xì)胞系KYSE450增殖和調(diào)亡的影響及其機(jī)制者姓名：王濤師姓名：樊青霞教授王峰副教授科門類:醫(yī)學(xué)業(yè)名稱:腫瘤學(xué)養(yǎng)院系：鄭州大學(xué)第一?附屬醫(yī)院成時間：2015年5月AthesissubmittedtoZhengzhouUniversityforthedegreeofMasterProliferationandapoptosisofmetforminonesophagealcancerKYSE450cellsandtheposs
2、iblemechanismsByWangTaoSupervisor:Prof.FanQingxiaProf.FengWangOncologyTheFirstAffiliatedHospitalofZhengzhouUniversityMay2015原創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明：所呈交的學(xué)位論文，是本人在導(dǎo)師的指導(dǎo)下，獨(dú)立進(jìn)行研究所取得的成果。除文中己經(jīng)注明引用的內(nèi)容外，本論文不包括任何其他個人或集體已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的科研成果。對本文的研宄作出重要貢獻(xiàn)的個人和集體，均己在文中以明確方式標(biāo)明。本聲明的法律責(zé)任由本人承擔(dān)。學(xué)位論文使用
3、授權(quán)聲明本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下完成的論文及相關(guān)的職務(wù)作品，知識產(chǎn)權(quán)歸屬鄭州大學(xué)。根據(jù)鄭州大學(xué)有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定，同意學(xué)校保留或向國家有關(guān)部門或機(jī)構(gòu)送交論文的復(fù)印件和電子版，允許論文被查閱和借閱；本人授權(quán)鄭州大學(xué)可以將本學(xué)位論文的全部或部分編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫進(jìn)行檢索，可以采用影印、縮印或者其他復(fù)制手段保存論文和匯編本學(xué)位論文。本人離校后發(fā)表、使用學(xué)位論文或與該學(xué)位論文直接相關(guān)的學(xué)術(shù)論文或成果時，第一署名單位仍然為鄭州大學(xué)。保密論文在解密后應(yīng)遵守此規(guī)定。學(xué)位論文作者：日期：年月乂日摘要二甲雙胍對人食管癌細(xì)胞系KYSE450增殖
4、和凋亡的影響及其機(jī)制研究生：王濤導(dǎo)師：樊青霞王峰鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院腫瘤科河南鄭州450052摘要研究背景：食管癌是世界上常見的惡性腫瘤之一，在我國的發(fā)病率和死亡率高達(dá)世界第1位，發(fā)病世標(biāo)率第6位，死亡世標(biāo)率位于第12位。早期食管癌癥狀輕微，當(dāng)出現(xiàn)臨床表現(xiàn)而就醫(yī)時，大部分已處于中晚期,失去了手術(shù)治療的機(jī)會，而此時化療成為治療食管癌重要手段之一。但目前所用的化療藥物不良反應(yīng)較大，病人耐受性差，且容易產(chǎn)生抗藥性.治療食管癌尋找新的有效的藥物是當(dāng)今研究的熱點(diǎn)。研究顯示，二甲雙胍能抑制結(jié)腸癌、乳腺癌、肝癌以及神經(jīng)膠質(zhì)瘤等多種腫瘤細(xì)
5、胞的生長，Kobayashi等研究顯示，二甲雙胍可以抑制TT、KYSE30及KYSE703種食管癌細(xì)胞系的增殖。本實(shí)驗(yàn)旨在通過觀察不同濃度二甲雙胍作用于食管癌細(xì)胞系KYSE450，在細(xì)胞水平觀察藥物對食管癌細(xì)胞增殖的抑制作用以及凋亡，并在分子基因水平初步探討產(chǎn)生抑制作用可能的機(jī)制。目的：檢測食管癌細(xì)胞系KYSE450，觀察經(jīng)不同濃度二甲雙胍藥物刺激，且在同一濃度不同時間作用下，mTOR通路下游蛋白4EBP1和S6K1含量的變化，探討二甲雙胍在食管癌惡性細(xì)胞中的過程及在其中的可能的作用及作用機(jī)制。I摘要方法：體外常規(guī)培養(yǎng)KY
6、SE450細(xì)胞，分為對照組（不使用藥物刺激），不同濃度實(shí)驗(yàn)組（5μmol/L、10μmol/L、20μmol/L、40μmol/L，采用MTT法檢測不同濃度的二甲雙胍作用不同時間對食管癌細(xì)胞增殖的抑制情況，并使用流式細(xì)胞儀器檢測不同分組凋亡率的差異；同時在分子水平采用RT-PCR以及Westernblot技術(shù)檢測藥物作用后KYSE450細(xì)胞中4EBP1和S6K1的mRNA和蛋白的表達(dá)的變化。結(jié)果：1．不同濃度二甲雙胍對食管癌KYSE450細(xì)胞的抑制作用：MTT法實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，不同濃度二甲雙胍對食管癌KYSE450細(xì)胞的增殖
7、均有抑制作用，并且隨著二甲雙胍濃度的提高以及二甲雙胍處理時間的延長，抑制率逐漸上升，抑制作用逐漸增強(qiáng)。這一結(jié)果表明在一定濃度和時間范圍內(nèi)，二甲雙胍對細(xì)胞產(chǎn)生的抑制作用呈現(xiàn)時間-劑量依賴性，差異均存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。2．不同濃度二甲雙胍對食管癌KYSE450細(xì)胞的凋亡的影響流式細(xì)胞儀檢測結(jié)果顯示，5,10,20mM的二甲雙胍作用于食管癌KYSE450細(xì)胞的48h后，細(xì)胞凋亡率分別為（20.8±1.35）%、（30.1±1.56）%、（39.7±1.44）%，而不加二甲雙胍空白對照組細(xì)胞凋亡率為（5.8±1.92）
8、%，結(jié)果表明，隨著二甲雙胍藥物濃度的提高，食管癌KYSE450凋亡率也在逐漸上升，實(shí)驗(yàn)組與空白對照組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。3．不同濃度二甲雙胍對食管癌KYSE450細(xì)胞4EBP1,S6K1mRNA表達(dá)的影響。RT-PCR結(jié)果顯示，與對照組比較，不同濃度二甲雙胍作用后4EBP1和S6K1
