成晶節(jié)桿菌NT16降解多環(huán)芳烴和含氧多環(huán)芳烴的特性及機(jī)理研究

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1、西安建筑科技大學(xué)碩士學(xué)位論文成晶節(jié)桿菌NT16降解多環(huán)芳烴和含氧多環(huán)芳烴的特性及機(jī)理研究*專業(yè):環(huán)境科學(xué)與工程碩士生:趙龍妹指導(dǎo)教師:聶麥茜教授摘要多環(huán)芳烴是普遍存在于環(huán)境中的一種持久性有機(jī)污染物,在生物降解過(guò)程中可轉(zhuǎn)化為毒性更高、且易積累的含氧多環(huán)芳烴,從而給生態(tài)環(huán)境和人類健康帶來(lái)危害。節(jié)桿菌是土壤環(huán)境中廣泛存在的一類革蘭氏陽(yáng)性菌,其生物降解功能突出,越來(lái)越受到研究學(xué)者的關(guān)注。本文以課題組前期分離篩選出的成晶節(jié)桿菌NT16為受試菌,研究了其降解多環(huán)芳烴和含氧多環(huán)芳烴的特性及機(jī)理。本論文以萘、菲、芘、1-羥基-2-萘甲酸

2、(1H2NA)和1-萘酚為主要研究對(duì)象,以液液萃取為樣品的預(yù)處理方法,以液相色譜、TOC測(cè)定儀、紫外分光光譜、三維熒光光譜、氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀等分析手段,獲得以下成果:(1)NT16菌可代謝多環(huán)芳烴、含氧多環(huán)芳烴、糖類及表面活性劑等多種碳源,能在高達(dá)2000mg/L的萘、菲、芘高毒溶液中頑強(qiáng)生長(zhǎng)。在多環(huán)芳烴碳源上通過(guò)二次或三次生長(zhǎng),最大生長(zhǎng)量OD600nm可達(dá)到1.22-1.42,并能隨培養(yǎng)時(shí)間的延長(zhǎng),不斷降解和礦化萘、菲、芘。從降解液紫外、熒光光譜變化趨勢(shì)也證實(shí)了多環(huán)芳烴在不斷被降解,且轉(zhuǎn)化產(chǎn)物不斷積累。(2)NT1

3、6菌能以50mg/L的1H2NA為唯一碳源和能源生長(zhǎng),最大生長(zhǎng)量OD600nm達(dá)0.77,細(xì)胞生長(zhǎng)與1H2NA降解同步進(jìn)行。該菌通過(guò)鄰位開(kāi)環(huán)裂解將1H2NA轉(zhuǎn)化成4-(2'-羧基苯基)-2-氧-3-丁烯酸產(chǎn)物。降解條件優(yōu)化結(jié)果為:接菌量10%,初始pH為9,硝酸銨為氮源,需要足夠的氧化性硫源,1H2NA適合生長(zhǎng)濃度為50mg/L。(3)共存丁二酸、丙二酸碳源,可顯著提高NT16菌降解和礦化1H2NA的能力,120h時(shí),使體系中細(xì)胞生長(zhǎng)量分別提高53%和62%,還可使1H2NA的降解*基金項(xiàng)目:國(guó)家自然科學(xué)基金(No.51

4、278405)西安建筑科技大學(xué)碩士學(xué)位論文效率分別提高9%和7%,并同時(shí)加速1H2NA碳源的礦化。(4)盡管1-萘酚對(duì)NT16菌細(xì)胞生長(zhǎng)有明顯的毒性,但50mg/L的1-萘酚條件下,該菌仍能頑強(qiáng)生長(zhǎng)。NT16菌胞內(nèi)含1H2NA羥化酶、鄰位開(kāi)環(huán)裂解酶、脫羧酶,水楊酸羥化酶,鄰苯二酚開(kāi)環(huán)裂解酶等5種分解1H2NA的氧化酶。啟動(dòng)NT16菌降解1H2NA的是羥化酶。僅以1H2NA為碳源時(shí),細(xì)胞中除1H2NA脫羧酶活未檢出外,其余4種酶活均較高;共存丙二酸、丁二酸可提高細(xì)胞氧化酶的表達(dá)量,尤其是細(xì)胞中蛋白大小為14.3KDa、25

5、KDa、45KDa、60KDa或97.2KDa的表達(dá)得到提高。本論文的研究結(jié)果為認(rèn)識(shí)節(jié)桿菌降解多環(huán)芳烴的規(guī)律,并將為該類菌應(yīng)用于污染環(huán)境的修復(fù)奠定基礎(chǔ)。關(guān)鍵詞:成晶節(jié)桿菌;降解;多環(huán)芳烴;含氧多環(huán)芳烴;代謝途徑;酶活力西安建筑科技大學(xué)碩士學(xué)位論文StudyontheCharacteristicsofPolycyclicAromaticHydrocarbonsandOxygen-containingPolycyclicAromaticHydrocarbonsDegradationbyArthrobactercrystall

6、opoietesNT16Specialty:EnvironmentalScienceandEngineeringName:LongmeiZhaoSupervisor:MaiqianNieAbstractPolycyclicaromatichydrocarbons(PAHs)arepersistentorganicpollutantsthatareubiquitousintheenvironment.Theycanbeconvertedintooxygen-containingpolycyclicaromatichydro

7、carbons(OPAHs)withhighertoxicityandeasyaccumulationinthebiodegradationprocess,whichisharmfultotheecologicalenvironmentandhumanhealth.Arthrobacterisatypeofgram-positivebacteriumwidelyexistinginthesoilenvironmentanditsbiodegradationfunctionisprominent,whichhasbeenp

8、aidmoreandmoreattentionbyresearchers.Inthispaper,theexperimentalstrainsofArthrobactercrystallopoietesNT16whichwasisolatedandselectedbyourresearchgroupwereusedt

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