藤茶總黃酮對(duì)人胃癌SGC7901細(xì)胞增殖抑制作用的實(shí)驗(yàn)研究

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1、藤茶總黃酮對(duì)人胃癌SGC-7901細(xì)胞增殖抑制作用的實(shí)驗(yàn)研究作者:鄭作文,郭成賢,毛健,譚為【摘要】  目的探討藤茶總黃酮的體外抗腫瘤作用。方法采用MTT法、生長(zhǎng)曲線法、細(xì)胞集落形成法觀察藤茶總黃酮對(duì)人胃癌SGC-7901細(xì)胞抑制作用。結(jié)果藤茶總黃酮能明顯抑制體外培養(yǎng)的SGC-7901細(xì)胞的生長(zhǎng),MTT法IC50為20.71μg·ml-1;細(xì)胞生長(zhǎng)曲線法提示其對(duì)SGC-7901細(xì)胞的生長(zhǎng)也有明顯的抑制作用;集落形成法,當(dāng)藥物濃度在9.90μg·ml-1以上時(shí)抑制率為100%,當(dāng)藥物濃度為6.60μg·ml-1時(shí)抑制率為69.80%,當(dāng)藥物濃度為4.40μg·ml-1時(shí)抑制率為30

2、.23%。結(jié)論藤茶總黃酮對(duì)體外SGC-7901細(xì)胞的生長(zhǎng)有明顯的抑制作用。【關(guān)鍵詞】藤茶總黃酮抗腫瘤作用SGC-7901細(xì)胞株  Abstract:ObjectiveToinvestigatetheanti-tumoreffectofVineteaextractinvitro.MethodsThegrowthinhibitionwasanalyzedbyMTT,cellcolonyandcellgrowthcurvemeasurementinthestomachcancercellSGC-7901.ResultsVineteaextractcouldobviouslyinhibi

3、tthegrowthofculturedSGC-7901cells,theIC50inMTTassaywas20.71μg·ml-1;Vinetea9extractcouldobviouslyaffectthetumorcellgrowth.Theinhibitoryratioincellcolonyassaywas100%whenmedicinedensitywasover9.90μg·ml-1,therepressiveratioincellcolonyassaywas69.80%whenmedicinedensitywas6.60μg·ml-1;therepressiver

4、atioincellcolonyassaywas30.23%whenmedicinedensitywas4.40μg·ml-1.ConclusionVineteaextractcaninhibitthegrowthofSGC-7901invitro.  Keywords:Vineteaextract;Anti-tumoreffect;SGC-7901;Cellline  藤茶Ampelopsisgrossedentata(Hand-Mazz)W.T.Wang系葡萄科蛇葡萄屬植物顯齒蛇葡萄的嫩莖葉[1]。藤茶中含有大量黃酮類(lèi)有效成分,用分光光度法對(duì)藤茶所含黃酮成分進(jìn)行含量測(cè)定,以蛇

5、葡萄素為指標(biāo),藤茶中總黃酮的含量高達(dá)45.52%[2]。多項(xiàng)藥理學(xué)研究表明,藤茶具有調(diào)節(jié)血糖和血脂、抗炎、抗氧化、抗病毒、抗腫瘤等作用[3~7],其中抗腫瘤作用是近年來(lái)研究的熱點(diǎn)。本研究對(duì)從藤茶提取分離得到的粉狀淡黃色結(jié)晶進(jìn)行抗人胃癌SGC-7901細(xì)胞研究,以進(jìn)一步揭示藤茶總黃酮的抗腫瘤作用?! ?材料與儀器9  1.1藥物藤茶總黃酮由廣西中醫(yī)學(xué)院中藥化學(xué)教研室通過(guò)柱層折提取分離,為一粉狀淡黃色結(jié)晶,為黃酮類(lèi)化合物,經(jīng)含測(cè),純度為91.1%?! ?.2細(xì)胞人胃癌細(xì)胞SGC-7901,由廣西中醫(yī)學(xué)院分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中心惠贈(zèng)。  1.3試劑RPMI-1640干粉(美國(guó)Gibco公司產(chǎn)

6、品);新生牛血清(杭州四季青公司產(chǎn)品,批號(hào)031101);四甲基二氮唑藍(lán)(北京拜爾迪生物公司分裝,Amresco0793);二甲基亞砜(博大泰克公司產(chǎn)品);0.25%胰蛋白酶(美國(guó)HycloneLab公司產(chǎn)品);注射用生理鹽水(徐州萊恩藥業(yè)公司產(chǎn)品,批號(hào)051122)?! ?.4儀器SUNRISE自動(dòng)酶標(biāo)儀(奧地利TECAN公司產(chǎn)品);311二氧化碳培養(yǎng)箱(美國(guó)ThermoForma公司產(chǎn)品);DLF560型超凈工作臺(tái)(荷蘭clearAirTechniekbv公司產(chǎn)品);細(xì)胞培養(yǎng)瓶(加拿大BIOFIL公司產(chǎn)品);96孔板(上海Sunub科技發(fā)展公司產(chǎn)品);倒置顯微鏡(廣西梧州光學(xué)

7、儀器廠產(chǎn)品);微量移液器(法國(guó)Pipetman公司產(chǎn)品);十萬(wàn)分之一電子天平(德國(guó)賽多利斯產(chǎn)品)。  1.5培養(yǎng)液及試劑的配制9RPMI-1640不完全培養(yǎng)液,不加血清的RPMI-1640培養(yǎng)液;RPMI-1640完全培養(yǎng)液,10%新生牛血清+RPMI-1640不完全培養(yǎng)液?! ?方法與結(jié)果  2.1SGC-7901細(xì)胞培養(yǎng)在長(zhǎng)滿SGC-7901細(xì)胞的培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)加0.25%胰酶,37℃消化3~4min,加培養(yǎng)液吹打,1∶3傳代,3~5d長(zhǎng)滿。消化后計(jì)數(shù),配制成10×104/ml細(xì)胞

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