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《膠質(zhì)細(xì)胞在創(chuàng)傷性癲癇發(fā)病機(jī)制中作用的研究》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫(kù)。
1、平中科技大毋閱濤百母此SM-M居博士李位裕友膠質(zhì)細(xì)胞在創(chuàng)傷性癲痛發(fā)病機(jī)制中作用的研究博士研究生姚源蓉博士生導(dǎo)師童尊塘孫圣剛教授專晰55?一___摘要一I'lA鐵離子杏仁體注射制備創(chuàng)傷性癲癰大鼠模型，探討海馬組織星形膠質(zhì)細(xì)胞增生、突觸重建和氨基酸神經(jīng)遞質(zhì)的代謝和轉(zhuǎn)運(yùn)在創(chuàng)傷性癲痛發(fā)病機(jī)制中的作用，以及在創(chuàng)傷性癲痛發(fā)生發(fā)展過程中，星形膠質(zhì)細(xì)胞增生與突觸可塑性及神經(jīng)遞質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)之間的相互關(guān)系和影響。從而闡明膠質(zhì)細(xì)胞增生在創(chuàng)傷性癲癰發(fā)病機(jī)理中的重要作用，為更好地預(yù)防和治療腦創(chuàng)傷后繼發(fā)性癲癰提供可靠的分子及形態(tài)
2、學(xué)病理基礎(chǔ)。︸/‘、I方法I動(dòng)物隨機(jī)分為對(duì)照組、鐵離子組和鐵離子+70一輕基膽固醇(70-hydroxycholesterol,70OHCH)組。應(yīng)用氯化鐵(FeC13)杏仁體注射制作創(chuàng)傷性癲癰模型，鐵離子+713OHCH組在注入FeCI,后，靜脈注射含有對(duì)星形膠質(zhì)細(xì)胞增生有明顯抑制作用的70-OHCH的脂質(zhì)包被微泡，連續(xù)用藥2d。觀察大鼠行為學(xué)表現(xiàn)，并作腦電圖動(dòng)態(tài)記錄。應(yīng)用免疫組織化學(xué)染色和Westernblot檢測(cè)膠質(zhì)纖維酸性蛋白(Glialfibrillaryacidicprotein,G
3、FAP)和突觸囊泡蛋白一一突觸素(Synaptophysin,p38)在海馬各區(qū)的動(dòng)態(tài)表達(dá)。透視電鏡觀察海馬組織的超微結(jié)構(gòu)改變，激光掃描共聚焦顯微鏡和免疫雙標(biāo)方法對(duì)谷氨酸和y一氨基丁酸在海馬各亞區(qū)的分布及谷氨酸能和丫一氨基丁酸能突觸在總突觸中的比例的變化進(jìn)行研究。采用RT-PCR方法檢測(cè)谷氨酸轉(zhuǎn)運(yùn)體GLAST,GLT1和EAAC1mRNA在海馬的動(dòng)態(tài)表達(dá)。[結(jié)果I鐵離子組癲癰模型成功率約為90，潛伏期為6-7d,卑中科技大毋月濟(jì)醫(yī)李覽rocs湯博士母位倫義鐵離子+713-OHCH組83%大鼠發(fā)展
4、成慢性自發(fā)性抽搐，潛伏期為9-10d。兩組均記錄到與抽搐發(fā)作一致的棘波、棘慢波綜合和尖波，從杏仁體擴(kuò)散到雙側(cè)海馬和皮質(zhì)。鐵離子組和鐵離子十70-OHCH組注射側(cè)海馬錐體細(xì)胞大量壞死和凋亡，鐵離子組雙側(cè)海馬星形膠質(zhì)細(xì)胞大量增生，星形膠質(zhì)細(xì)胞面密度較對(duì)照組明顯增加，70-OHCH使增生的星形膠質(zhì)細(xì)胞減少了50%-70%。鐵離子組雙側(cè)海馬齒狀回分子層內(nèi)帶p38反應(yīng)產(chǎn)物比對(duì)照組顯著增加，鐵離子十7p-OHCH組雙側(cè)海馬齒狀回分子層內(nèi)帶p38反應(yīng)產(chǎn)物比鐵離子組增加更明顯。鐵離子組和鐵離子十70-OHCH組
5、海馬各亞區(qū)Glu每像素的熒光強(qiáng)度比對(duì)照組明顯增強(qiáng)，CAI和CA3區(qū)Glu能突觸在總突觸中的比例增多。鐵離子組注射側(cè)CAI,CA3區(qū)和齒狀回GABA每像素的熒光強(qiáng)度比對(duì)照組明顯減弱，而對(duì)側(cè)齒狀回明顯增強(qiáng)，鐵離子+70-OHCH組注射側(cè)海馬CAI和CA3區(qū)GABA每像素的熒光強(qiáng)度比對(duì)照組明顯減弱，雙側(cè)齒狀回GABA每像素的熒光強(qiáng)度比鐵離子組明顯增強(qiáng)。鐵離子組注射側(cè)齒狀回GABA能突觸比例比對(duì)照組減少，鐵離子+70-OHCH組注射側(cè)齒狀回GABA能突觸比例沒有明顯改變。鐵離子組和鐵離子+70-OHCH
6、組雙側(cè)海馬GLTI、GLAST和EAAC1mRNA的表達(dá)在損傷后3d都顯著降低。7d時(shí)，鐵離子組GLAST,GLT1mRNA表達(dá)上調(diào)達(dá)頂峰，隨后又降低，GLASTmRNA降至基線水平以下。EAAC1mRNA表達(dá)7d后持續(xù)增高，維持在較高水平。鐵離子+70-OHCH組7d后雙側(cè)海馬三種轉(zhuǎn)運(yùn)體表達(dá)均比鐵離子組增高。【結(jié)論】FeC13杏仁體注射可成功誘發(fā)創(chuàng)傷性癲癰模型，模型成功率高。FeC13繼發(fā)引起的海馬組織的神經(jīng)元脫失、反應(yīng)性膠質(zhì)細(xì)胞增生及異常的神經(jīng)元放電環(huán)路，是形成慢性自發(fā)性癲痛的病理學(xué)基礎(chǔ)，興
7、奮性神經(jīng)遞質(zhì)與抑制性神經(jīng)遞質(zhì)之間作用失衡、Glu轉(zhuǎn)運(yùn)體GLTI平中科談大毋門濟(jì)成母隴PMS石博士毋‘恰文和GLAST的下調(diào)是促使癲癰發(fā)生發(fā)展的重要分子學(xué)機(jī)制。星形膠質(zhì)細(xì)胞增生在創(chuàng)傷性癲痛發(fā)病機(jī)制中起重要作用，抑制膠質(zhì)細(xì)胞增生，可影響海馬突觸可塑性，有利于調(diào)整海馬內(nèi)興奮性和抑制性功能系統(tǒng)之間作用的失衡，可延長(zhǎng)損傷與發(fā)生慢性自發(fā)性抽搐之間的間歇期，在一定程度上降低創(chuàng)傷性癲癰的發(fā)病率。但創(chuàng)傷性癲痛發(fā)病機(jī)制很復(fù)雜，是多種因素綜合作用造成的，單一控制某一因素并不能完全控制癲癰的發(fā)生和發(fā)展。介一、嚴(yán)-【關(guān)鍵
8、詞】創(chuàng)傷性癲癰;膠質(zhì)細(xì)胞增生;突觸;谷氨酸;丫一氨基丁酸;谷氨酸轉(zhuǎn)運(yùn)體;趕圣燮繆;竺呈平中科玻大甘閱濟(jì)醫(yī)母優(yōu)欲”，幾博士考俄恰久Studyoftheroleofglialcellsinpost-traumaticepileptogenesisPh.Dcandidate:YuanrongYaoSupervisorsEtangTongProfShenggangSunAbstractIObjective]Topreparepost-traumaticepilepsyratmodelbyanamygda
