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1、第42卷第2期西北農(nóng)林科技大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版)Vo1．42No．22014年2月JournalofNorthwestA&FUniversity(Nat．Sci．Ed．)Feb．2014網(wǎng)絡(luò)出版時(shí)間：2014一Ol一02i6：06DOI：10．13207／j．cnki．jnwa{u．2014．02．066網(wǎng)絡(luò)出版地址：http：／／www．cnki．net／kcms／doi／10．13207／j．cnki．jnwafu．2014．02．066．htmlBmNPV對(duì)家蠶BmN細(xì)胞周期及周期蛋白基因表達(dá)水平的影響劉麗華，沈衛(wèi)德。，李兵，王文兵(1通化師范學(xué)院生物系，
2、吉林通化134000；2蘇卅I大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與生物科學(xué)學(xué)院，江蘇蘇州2151233現(xiàn)代絲綢國(guó)家工程實(shí)驗(yàn)室，江蘇蘇州215123；4江蘇大學(xué)生命科學(xué)研究院，江蘇鎮(zhèn)江212001)[摘要]【目的】研究家蠶核型多角體病毒(BombyzmoriNuc1e叩olyhedroviruses，BmNPV)對(duì)家蠶卵巢細(xì)胞系(BraN)細(xì)胞周期及細(xì)胞周期蛋白基因轉(zhuǎn)錄水平的影響。【方法】用BmNPV感染家蠶BmN細(xì)胞，分別在病毒感染后的不同時(shí)間(12，24，36，48h)，應(yīng)用實(shí)時(shí)熒光定量PCR方法檢測(cè)細(xì)胞周期蛋白基因CyclinA、CyclinB、CyclinE的表達(dá)情況，用流式細(xì)
3、胞儀檢測(cè)細(xì)胞周期的變化?！窘Y(jié)果1BmNPV感染24h后，BmN細(xì)胞出現(xiàn)明顯感染癥狀，變?yōu)閳A形；48h后細(xì)胞核內(nèi)出現(xiàn)多角體。隨著感染時(shí)間的延長(zhǎng)，CyclinA、CyclinB、CyclinE基因表達(dá)量均下降，分別在感染l2，24，36h后，表達(dá)量降低為0。流式細(xì)胞儀檢測(cè)結(jié)果顯示，在BmNPV感染后24h左右，抑制于G2／M期的BraN細(xì)胞達(dá)到68?！窘Y(jié)論1BmNPV感染家蠶BmN細(xì)胞后，導(dǎo)致CyclinB、CyclinE基因表達(dá)量降低，對(duì)CyclinA基因表達(dá)量的影響較??；同時(shí)BmNPV感染可以將BmN細(xì)胞發(fā)育抑制于G2／M期。[關(guān)鍵詞]BmNPV；Cyclin基
4、因；細(xì)胞周期[中圖分類號(hào)]$884．51[文獻(xiàn)標(biāo)志碼]A[文章編號(hào)]1671-9387(2014)02—0041一O5EffectofBmNPVonBmNcelIcycleandexpressionlevelofCyclininsilkwormLIULi—hua，SHENWei—de。，LIBing，WANGWen—bing(1DepartmentofBiology，TonghuaNormalUniversity，Tonghua，Jilin134000，China；2SchoolofBasicMedicineandBiologicalSciences，Sooch
5、owUniversity，Suzhou，Jiangsu215123，China3NationalEngineeringLaboratoryforModernSilk，Suzhou，Jiangsu215123，China；4InstituteofLifeSciences，JiangsuUniversity，Zhenjiang，Jiangsu212001，China)Abstract：[Objective]ThisstudyaimedtostudytheeffectofBmNPV(BombyxmoriNucleopolyhe—droviruses)onthecell
6、cycleandexpression1evelofCyclininsilkwormBmNcell1ine．[Method]BmNcellwasinfectedwithBmNPV，andthetranscriptionlevelsofCyclinA，CyclinBandCyclinEgenesweredetec—tedbyQRT—PCRatdifferenttimes(12，24，36，and48h)．Flowcytometerwasusedtodetectthechangeofcellcycle．[Result]BmNcellsshowedobviousinfe
7、ctionsymptoms24hafterinfectionandtheshapeofcellschangedtocircle．Polyhedrosisappearedinthenucleus48hafterinfection．AStheincreaseoftimeaf—terviralinfection，theexpressionlevelsofCyclinA，CyclinBandCyclinEdecreased．TheexpressionlevelsofCyclinA，CyclinB，CyclinEreducedtozeroat12，24and36h，res
8、pectively．Fl
