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《丹皮酚對結(jié)腸癌細(xì)胞系LoVo細(xì)胞增殖、凋亡的影響及其機(jī)制-論文.pdf》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在應(yīng)用文檔-天天文庫。
1、中國醫(yī)藥導(dǎo)報(bào)2014年3月第1l卷第7期論著·丹皮酚對結(jié)腸癌細(xì)胞系LoVo細(xì)胞增殖、凋亡的影響及其機(jī)制李明譚詩云武漢大學(xué)人民醫(yī)院消化內(nèi)科．湖北武漢430060【摘要】目的觀察丹皮酚對人結(jié)腸癌細(xì)胞系LoVo細(xì)胞增殖、凋亡的影響及探討可能的作用機(jī)制。方法用不同濃度丹皮酚處理體外培養(yǎng)的IJoV0細(xì)胞24、48、72、96h，CCK一8比色法測定其對結(jié)腸癌LoVo細(xì)胞的活力的影響：倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞的形態(tài)學(xué)變化；根據(jù)CCK一8結(jié)果分為丹皮酚組(濃度31．25、62．50、125mg／L)和對照組，處理48h后，流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞凋亡；激光共聚焦顯微鏡檢
2、測細(xì)胞內(nèi)Ca濃度的變化；RT—PCR和Westernblot法檢測RUNX3基因表達(dá)情況。結(jié)果丹皮酚能顯著降低LoVo細(xì)胞存活率，呈劑量、時(shí)問依賴性；倒置顯微鏡下可觀察到典型的細(xì)胞凋亡形態(tài)；丹皮酚組(濃度31．25、62．50、125mg／L)處理細(xì)胞48h后．凋亡率分別為(12-3±1．3)％、(22．4+1．5)％、(36．2+2．1)％，與對照組[凋亡率(2．3±0．9)％]比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0．05)；丹皮酚組處理48h后，細(xì)胞鈣離子熒光強(qiáng)度分別為(41．36_+4．62)，(57．51+3．83)和(69．43~3．76)，
3、與對照組【熒光強(qiáng)度(24：45+3．74)1比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0．05)；丹皮酚能上調(diào)RUNX3基因的表達(dá)，呈劑量依賴性。結(jié)論丹皮酚能抑制LoVo細(xì)胞的增殖并誘導(dǎo)其凋亡，其作用機(jī)制可能與增加細(xì)胞內(nèi)Ca含量和上調(diào)RUNX3基[太j的表達(dá)有關(guān)。[關(guān)鍵詞】丹皮酚；LoVo細(xì)胞；Ca；RUNX一3[中圖分類號(hào)】R735．3【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】A[文章編號(hào)】1673—7210(2014)03(a)一0023—05EffectsofPaeonoloncellproliferationandapoptosisinhumancolorectalcancer
4、LoVocellsanditsmechanismsLIMingHV／znDepartmentofGastroenterology，RenminHospitalofWuhanUniversity，HubeiProvince，Wuhan430060，China【Abstract】ObjectiveToinvestigatetheeffectofPaeonolontheproliferationofcolorectalcancerlineLoVoanddis—CUSSitspossiblemechanisms．MethodsLoVocellswerec
5、ulturedinvitro．AftertreatmentbyPaeonolatdifferentcon—centrationsrespectivelyatdifferenttime，thecellsurvivalwasdeterminedbytheCKK一8method．Thechangesofcellmorphologywereobservedbyinvertedmicroscope．Apoptosiswasdetectedbyflowcytometry．Theconcentrationofin—tracellularcalciumwasin
6、vestigatedbylaserconfocalsanningmicroscopewithcalcium—flourecentprobes—Fluo一3／AM．Reversetranscription-polymerasechainreaction(RT—PCR)wasusedformRNAanalysis．Thechangeofproteinexpres—sionofRUNX一3wasdetectedbywesternblot．ResultsFromthedataofCCK-8，thecellproliferationofhumancol—o
7、rectalcancerLoVocellswasinhibitedbyPaeonolinadose—dependentandtime—dependentmanner．Typicalapopto—sismorphologyofLoVocellswasobservedbyinvertedmicroscope．FlowcytometryassaysshowedthatPaeonolsignifi—cantlyinducedapoptosisinLoVocells．AftertreatedwithPaeonolfor48h．theapoptosisrat
8、eofLovocellswasf12．3±1．3)％，(22．4+1．5)％，and(36．2-+2．1)％respectively，w
