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1、病原性真菌（第二十五章P418-438)溫州醫(yī)學(xué)院檢驗醫(yī)學(xué)與公共衛(wèi)生學(xué)院溫州醫(yī)學(xué)院附屬第一醫(yī)院周鐵麗目的掌握深部真菌的生物學(xué)特性及鑒定了解淺部真菌的生物學(xué)特性及鑒定真菌的基本特性真核細胞型微生物，屬于真菌界。有典型的細胞核，不含葉綠素，以腐生或寄生方式攝取營養(yǎng)，單細胞或多細胞，行有性生殖或無性繁殖。真菌的基本結(jié)構(gòu)與形態(tài)菌絲：成熟的孢子在基質(zhì)上產(chǎn)生的管狀結(jié)構(gòu)。菌絲體：許多菌絲交織成團。孢子：是真菌的繁殖器官。真菌的分類（I）按菌落形態(tài)分霉菌:多細胞，產(chǎn)生菌絲和孢子，“絲狀菌落”酵母：單細胞，“乳酪樣菌落”雙相真菌：菌落形態(tài)受環(huán)境因素影響真菌的分類（II）按致病性分
2、致病性真菌：如申克孢子絲菌、莢膜組織孢漿菌、粗球孢子菌等。條件致病性真菌：如念珠菌、曲霉菌、毛霉菌等。真菌的分類（III）按感染部位分淺部真菌：主要侵犯皮膚、指（趾）甲、毛發(fā)。深部真菌：主要侵犯深部組織、內(nèi)臟及全身。真菌的檢驗方法直接鏡檢染色/不染色，10-20%KOH處理分離培養(yǎng)選擇培養(yǎng)基（高糖，低pH），培養(yǎng)條件（溫度、濕度）生化試驗同化發(fā)酵試驗，牛乳分解試驗，脲酶試驗等動物實驗確定真菌的致病性核酸檢測主要用于疑難、變異菌株的早期診斷毒素檢測檢測食品、食物中毒的鑒別診斷淺部感染真菌表面感染真菌皮膚癬真菌皮下組織感染真菌（一）表面感染真菌代表菌：糠秕馬拉色菌嗜
3、脂性酵母樣菌所致疾病：侵犯皮膚角質(zhì)層，導(dǎo)致汗斑（花斑癬）微生物檢驗：（一）直接顯微鏡檢查透明膠帶粘貼取材：厚壁孢子，粗短菌絲（二）分離培養(yǎng)與鑒定37℃3天生長，20天菌落約10mm，乳酪色酵母樣菌（二）皮膚癬真菌主要菌屬：毛癬菌屬，表皮癬菌屬，小孢子癬菌屬20余個種對人類致病微生物檢驗：（一）直接顯微鏡檢查處理：皮屑（10%KOH制成濕片）指甲（25%KOH處理）鏡檢：分支的菌絲，成鏈的孢子（二）分離培養(yǎng)沙氏瓊脂，25℃培養(yǎng)4周（三）皮下組織真菌感染主要菌屬著色真菌：裴氏著色真菌、卡氏枝孢霉等引起病損皮膚變黑、化膿、結(jié)痂孢子絲菌（二相真菌）：申克孢子絲菌孢子絲菌
4、病微生物檢驗（一）直接顯微鏡檢著色真菌：短粗分隔的菌絲，分生孢子孢子絲菌：霉菌型，組織型（卵圓形或梭形孢子）（二）分離培養(yǎng)沙氏瓊脂10-14天深部感染真菌假絲酵母菌（念珠菌）：81個種，其中11個種對人有致病性：隱球菌：17個種7個變種，僅新型隱球菌及其變種對人有致病性曲菌：900余種，其中10個種對人有致病性毛霉目真菌：根霉屬，梨頭霉屬，毛霉屬，根毛霉屬等組織孢漿菌：組織孢漿菌，組織孢漿菌杜波變種卡氏肺孢菌（卡氏肺曩蟲）（一）假絲酵母菌主要種：白色假絲酵母菌，近平滑假絲酵母菌，熱帶假絲酵母菌，克柔假絲酵母菌等所致疾病：腸炎、肺炎、尿道炎、陰道炎、敗血癥等微生物
5、檢驗：（一）直接鏡檢（二）分離培養(yǎng)與鑒定芽管形成試驗，厚膜孢子形成試驗，糖同化/發(fā)酵試驗（三）血清學(xué)診斷主要鑒定試驗（I）芽管形成試驗：假絲酵母菌接種到0.5ml人或動物血清中，37℃培養(yǎng)1-4小時，鏡檢芽管形成情況。厚膜孢子形成試驗：假絲酵母菌接種到玉米粉瓊脂中，27℃培養(yǎng)1-2天，鏡檢厚膜孢子形成試驗。主要鑒定試驗（II）糖同化發(fā)酵試驗：P426酵母菌能發(fā)酵某種糖，一定能同化該糖TZC還原試驗含0.05%g/L氯化三苯四氮唑的培養(yǎng)基上菌落顏色白色假絲酵母菌無色；熱帶假絲酵母菌紅色主要鑒定試驗（III）酵母菌顯色培養(yǎng)法利用培養(yǎng)基上特殊的顯色物質(zhì)鑒定念珠菌商品：
6、CHROMagarCandida培養(yǎng)基（柯瑪嘉）培養(yǎng)24-48小時觀察菌落白色假絲酵母菌------綠色、翠綠色（直徑約2mm）熱帶假絲酵母菌------藍灰色，鐵藍色（直徑約1.5mm）克柔假絲酵母菌------粉紅色（模糊，有微毛，直徑約4-5mm）光滑假絲酵母菌------紫色（直徑約2mm）其它假絲酵母菌------白色等能準(zhǔn)確鑒定95%以上的白色假絲酵母菌，熱帶假絲酵母菌，克柔假絲酵母菌；85%以上的光滑假絲酵母菌。（二）隱球菌致病菌種：新型隱球菌及其變種侵入途徑：呼吸道好發(fā)部位：肺、腦、腦膜；皮膚、骨、關(guān)節(jié)好發(fā)人群：細胞免疫功能低下者（惡性腫瘤、器官
7、移植、AIDS等）微生物檢驗新型隱球菌：四個血清型分離培養(yǎng)：病原性隱球菌37℃和25℃均生長；非病原性隱球菌37℃不生長墨汁負染色鏡檢：陽性（可見菌體外寬厚莢膜）靛氧化酶試驗：陽性尿素酶試驗：陽性糖同化發(fā)酵試驗：同化纖維二糖、肌醇；不發(fā)酵糖（三）曲霉廣泛存在于自然界，為條件致病性真菌利：釀酒造醬生產(chǎn)有機酸、酶制劑、抗生素弊：食物、藥物霉變曲霉直接感染或變態(tài)反應(yīng)毒素致食物中毒致癌微生物檢驗（一）直接顯微鏡檢查分枝菌絲，粗分生孢子，頂端小分生孢子（二）血清中曲霉抗原、抗體檢測（三）分離培養(yǎng)接種沙氏瓊脂，形成毛狀菌落（四）毛霉目真菌所致感染：鼻黏膜，肺，胃腸道，皮膚引
8、起全身播散，發(fā)病急，進展
