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1、病原性真菌淺部感染真菌淺部感染真菌包括表面感染真菌、皮膚癬真菌和皮下組織感染真菌。一、表面感染真菌主要寄居于人體皮膚和毛干的最表層,在我國(guó)主要是糠秕馬拉色菌,為條件致病菌,是一種嗜脂性酵母樣菌。它侵犯皮膚角質(zhì)層引起一種慢性、無(wú)癥狀的淺部真菌病,即汗斑,無(wú)明顯炎癥反應(yīng)。主要是色素異常性改變,由淡變深,而老斑疹色素由深轉(zhuǎn)淺,成為白斑。還可引起毛囊炎、脂溢性皮炎等。微生物檢驗(yàn)1.直接顯微鏡檢查可采用透明膠帶粘貼取材法,將透明膠帶直接貼于皮膚表面,數(shù)分鐘后揭下,直接貼于載玻片上鏡檢或經(jīng)棉藍(lán)染色或革蘭染色后鏡檢。可見(jiàn)孢子和菌絲。孢子為圓形或卵形,厚壁,芽頸較寬,常成簇分布;菌絲粗短,呈臘
2、腸樣。2.分離培養(yǎng)與鑒定將鱗屑接種于含菜籽油的培養(yǎng)基,37℃孵育3d后,在培養(yǎng)基上開(kāi)始生長(zhǎng),20d左右菌落約lOmm乳酪色酵母型菌落,表面光滑。取菌落作涂片染色鏡檢,觀察真菌形態(tài)。二、皮膚癬真菌寄生于皮膚角蛋白組織的淺部真菌稱為皮膚癬菌,又稱皮膚絲狀菌。約有45種,一部分僅感染動(dòng)物,對(duì)人致病的約有20余種。無(wú)性階段屬于半知菌門(mén),而有性型則屬于子囊菌門(mén)。分為毛癬菌屬、表皮癬菌屬和小孢子癬菌屬等三個(gè)菌屬。(一)臨床意義皮膚癬菌易侵犯人體皮膚、指甲、毛發(fā)的角蛋白組織并生長(zhǎng)繁殖致病,是因?yàn)槠淠墚a(chǎn)生角質(zhì)溶解酶。皮膚癬菌是接觸傳染,只要反復(fù)接觸患者均有可能被感染。在同一病人有不同的臨床表現(xiàn)
3、,如毛癬菌屬可引起發(fā)癬、體癬、甲癬;而相同部位的病可由不同皮膚癬菌引起,如甲癬(俗稱灰指甲)可由毛癬菌屬和表皮癬菌屬引起。1.毛癬菌屬有20種,其中有13種對(duì)人致病。常見(jiàn)的有紅色毛癬菌、紫色毛癬菌、須毛癬菌、斷發(fā)毛癬菌和許蘭毛癬菌等。毛癬菌感染的皮屑、甲屑或病發(fā)10%KOH溶液消化后鏡檢,可見(jiàn)有菌絲,病發(fā)內(nèi)、外可見(jiàn)菌絲或孢子。在沙氏培養(yǎng)基上可白、紅、橙或棕色,表面呈絨毛狀、粉末狀或蠟狀菌落。鏡下可見(jiàn)梳狀、球拍、螺旋或鹿角菌絲;葡萄狀或梨狀小分生孢子,細(xì)長(zhǎng)薄壁大分生孢子。2.表皮癬菌屬對(duì)人致病的只有絮狀表皮癬菌,感染的皮屑和甲屑經(jīng)10%KOH液消化后鏡檢,可見(jiàn)分枝斷裂的有隔菌絲,
4、少見(jiàn)孢子。在沙氏培養(yǎng)基上培養(yǎng)后,菌落初為白色鵝毛狀,以后轉(zhuǎn)變?yōu)辄S色粉末狀。鏡下可見(jiàn)球拍狀菌絲、卵圓形或巨大棒狀薄壁大分生孢子,無(wú)小分生孢子,在陳舊培養(yǎng)物中可見(jiàn)厚膜孢子。3.小孢子癬菌屬有15種,對(duì)人致病的有8種,常見(jiàn)的有鐵銹色小孢子菌、石膏樣小孢子菌和狗小孢子菌等。小孢子菌感染的皮屑和毛發(fā)經(jīng)10%KOH處理后鏡檢,皮屑中有分枝斷裂菌絲,在毛發(fā)中呈現(xiàn)小孢子鑲嵌的鞘包裹著發(fā)干。在沙氏培養(yǎng)基中可見(jiàn)白色、棕黃色或黃褐色、粉末或絨毛狀菌落。鏡下可見(jiàn)梳狀、球拍狀或結(jié)節(jié)狀菌絲,卵圓形小分生孢子、厚壁梭形(紡錘形)大分生孢子。(三)微生物檢驗(yàn)1.標(biāo)本采集采集新發(fā)生的皮膚損害邊緣皮屑;指甲近尖端
5、下面甲屑;拔取無(wú)光澤病發(fā),黃癬采集黃癬痂。將標(biāo)本盛于清潔紙袋,鱗屑要用黑紙包好。2.直接顯微鏡檢查皮屑標(biāo)本用10%KOH液制成濕片,指甲用25%KOH或25%NaOH含5%甘油處理。鏡檢可見(jiàn)透明、有隔,常有分支的菌絲及成鏈的關(guān)節(jié)孢子,三個(gè)癬菌屬難以鑒別。毛癬菌屬感染病發(fā)有發(fā)外型和發(fā)內(nèi)型孢子,而小孢子菌屬只有發(fā)外型孢子。3.分離培養(yǎng)與鑒定皮屑、甲屑和病發(fā)標(biāo)本,先用70%乙醇或在青、鏈霉素混合液內(nèi)處理5min,再用生理鹽水洗3次,然后接種沙氏瓊脂斜面,25℃培養(yǎng),每周觀察菌落形態(tài)及顏色,直至第四周。挑取菌落鏡檢菌絲和孢子,也可作棉蘭染色后鏡檢或作小培養(yǎng)后鏡檢。必要時(shí)作其他鑒定如毛發(fā)
6、穿孔試驗(yàn)、脲酶試驗(yàn)和特殊營(yíng)養(yǎng)需要試驗(yàn)等來(lái)鑒定皮膚癬菌。毛發(fā)穿孔試驗(yàn)是將頭發(fā)發(fā)剪成lcm長(zhǎng),置于已加入25ml蒸餾水和2—3滴10%酵母浸膏液的平皿內(nèi),高壓滅菌。將待檢皮膚真菌接種于平皿內(nèi),置25℃孵育四周,每周檢查一次,每次取數(shù)根毛發(fā)置載玻片上,經(jīng)乳酚棉藍(lán)染色后,置低倍鏡下觀察。若毛發(fā)有裂口或陷凹者為陽(yáng)性,否則為陰性。4.藥物敏感試驗(yàn)皮膚癬菌對(duì)灰黃霉素、伊曲康唑等藥物敏感。三、皮下組織感染真菌主要有著色真菌和孢子絲菌。一般經(jīng)外傷感染后,在局部皮下組織繁殖,并緩慢向周?chē)M織擴(kuò)散,還可經(jīng)淋巴、血液向全身擴(kuò)散。(一)著色真菌是自然界的腐生菌,經(jīng)破損皮膚而感染,引起病損皮膚變黑,引起著
7、色真菌病。主要真菌有卡氏枝孢霉、裴氏著色真菌、緊密著色真菌和疣狀瓶霉。1.臨床意義常在患者外傷后感染,多發(fā)生四肢暴露部位,開(kāi)始為小丘疹,表面干燥或濕潤(rùn),有鱗屑或鱗痂,逐漸形成斑塊結(jié)節(jié),呈疣狀增殖。皮損反復(fù)發(fā)生,且長(zhǎng)期不愈,可致畸致殘。免疫功能低下時(shí)可侵犯中樞神經(jīng)系統(tǒng)或經(jīng)血流擴(kuò)散。病理變化主要為角化過(guò)度及角化不全。2.微生物特性著色真菌菌絲短粗分隔,呈棕色,有三型分生孢子:①樹(shù)枝型:菌絲末端有分生孢子柄,柄端分叉長(zhǎng)出孢子;②劍頂型:圍繞菌絲末端或菌絲橫隔處長(zhǎng)有一圈分生孢子;③花瓶型:在菌絲分隔