雞致病性大腸桿菌的分離鑒定及耐藥性試驗

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1、試驗報告HusbandryAnimalModern業(yè)殖養(yǎng)禽畜代當(dāng)組稿Email:nmgxmy2008@sina.com雞致病性大腸桿菌的分離鑒定及耐藥性試驗郝永正李廣香山西省太谷縣畜牧獸醫(yī)中心030800摘要：對太谷縣周邊雞場疑似大腸桿菌病死亡量鑒定管由杭州天和微生物試劑有限公司生產(chǎn)。雞的病料進行病原菌分離，并進一步進行血清型鑒（3）大腸桿菌O抗原定型血清診斷液購于中國定、生化試驗、動物試驗和耐藥性試驗。結(jié)果顯示，獸醫(yī)藥品監(jiān)察所。實驗動物為體重20～25g小白鼠引起雞場發(fā)病的病原菌為大腸桿菌，主要血清型為20只，購自山西醫(yī)科大學(xué)動物實驗

2、中心。O157。該菌株有較強的致病性，耐藥性試驗結(jié)果顯（4）藥敏試驗。選擇硫酸阿米卡星、鹽酸左旋氧示對硫酸阿米卡星、氟苯尼考等高度敏感，對鹽酸氟沙星、氟苯尼考、新霉素、卡那霉素、頭孢噻呋鈉、左旋氧氟沙星、頭孢曲松鈉等中敏，對恩諾沙星和慶大霉素、氨芐西林、阿莫西林、恩諾沙星、環(huán)丙沙環(huán)丙沙星等耐藥。星、鏈霉素和先鋒Ⅴ號等藥物進行。關(guān)鍵詞：大腸桿菌；分離鑒定；耐藥性實驗1.2試驗方法雞大腸桿菌病是由大腸埃希氏桿菌引起的一（1）細菌分離培養(yǎng)。將采集病料樣品接種于普類疾病的總稱。該病的感染途徑主要是消化道和呼通培養(yǎng)基上，37℃恒溫培養(yǎng)18h，觀察細

3、菌生長情況吸道，也可通過種蛋垂直傳播，可原發(fā)、繼發(fā)或并和菌落特征。挑取單個菌落接種于麥康凱瓊脂平發(fā)，不同年齡的雞都能感染。該病一年四季均有發(fā)板，37℃恒溫培養(yǎng)24h后挑取可疑、紅色、中等大小生，但以冬季和春季多發(fā)，癥狀一般呈典型經(jīng)過：雞和光滑的菌落進行革蘭染色、鏡檢。將革蘭染色情只精神萎頓、羽毛蓬亂、呼吸困難、食欲廢絕，黃、況、形態(tài)和大小等均符合大腸桿菌特征的菌株初步白、綠稀便交替出現(xiàn)。急性型常于發(fā)病一周內(nèi)死亡，確定為大腸桿菌，對疑似大腸桿菌進行菌種保存。亞急性或慢性型多發(fā)生于成年蛋雞，患病的雞精神（2）生化試驗。將分離純化的細菌在無菌條

4、件不振、食欲減少、飲水量增加，逐漸消瘦和下痢，但下進行糖發(fā)酵試驗、甲基紅試驗、V-P試驗、吲哚試死亡率不高。驗、硫化氫試驗、尿素酶試驗和枸櫞酸鹽利用試驗該病的防治主要使用抗菌藥和抗生素，藥物的檢測。大量和頻繁使用造成大腸桿菌耐藥菌株不斷產(chǎn)生，（3）致病性試驗。將20只小白鼠分成2組，每致使治療效果下降，給養(yǎng)雞業(yè)造成嚴重經(jīng)濟損失；組10只。Ⅰ組為試驗組，用雞大腸桿菌肉湯培養(yǎng)物同時，抗菌藥物在畜禽體內(nèi)的殘留給養(yǎng)禽業(yè)的持續(xù)接種，腹腔注射0.3mL/只；Ⅱ組為對照組，腹腔注射發(fā)展和人類的身體健康帶來潛在危害。本試驗，分滅菌生理鹽水0.3mL/只。

5、注射后每天觀察2次，連離鑒定和了解雞大腸桿菌血清型及耐藥性現(xiàn)狀，以續(xù)觀察7d。剖檢病死鼠，取死鼠的肝臟涂片染色鏡期為臨床防治該病提供科學(xué)依據(jù)。檢，再將其接種于麥康凱瓊脂，挑取可疑菌落分離1材料與方法培養(yǎng)，進行觀察。1.1材料（4）血清型鑒定。按大腸桿菌O抗原定型血清（1）病料來源。樣品來自太谷縣周邊幾個雞養(yǎng)診斷液使用說明書操作。首先將分離的細菌進行玻殖場，共采樣25份，經(jīng)臨床診斷為雞大腸桿菌病。板凝集反應(yīng)，初步篩選疑似O血清型菌株，然后通（2）培養(yǎng)基。營養(yǎng)瓊脂、麥康凱瓊脂、普通肉湯、過試管凝集反應(yīng)進一步確定其血清型。伊紅美藍瓊脂和細菌微量

6、生化反應(yīng)管均購于杭州（5）耐藥性實驗。采用紙片法，測量抑菌圈直天和微生物試劑公司；M．R．試劑、V-P試劑、靛基質(zhì)徑。抑菌圈直徑大于20mm為高度敏感、10～20mm試驗用培養(yǎng)基等均按照常規(guī)方法配制。細菌生化微為中度敏感、小于10mm為耐藥。122014.11當(dāng)代畜禽養(yǎng)殖業(yè)ModernAnimalHusbandry試驗報告組稿Email:nmgxmy2008@sina.com2結(jié)果與分析d≧20mm，高度敏感；10mm≦d﹤20mm，中度敏感；d﹤2.1細菌的分離培養(yǎng)10mm,耐藥。從25份病料中分離出大腸桿菌11株，分離率18株大腸桿

7、菌對14種抗生素有不同程度的耐為44％。分離菌在營養(yǎng)瓊脂上生長24h后，形成圓藥。具體結(jié)果見表1。形、邊緣整齊、隆起、光滑、濕潤和灰白色的菌落，直3結(jié)論與討論徑為2～3mm；在麥康凱瓊脂上形成紅色、圓形隆3.1分離株鑒定及發(fā)生感染的原因起、光滑濕潤和邊緣整齊的小菌落；在伊紅美藍瓊經(jīng)過細菌分離培養(yǎng)和生物學(xué)特性鑒定，得知引脂上形成紫黑色、具有金屬光澤的小菌落；在普通發(fā)該地區(qū)肉雞發(fā)病死亡的致病菌為致病性大腸桿肉湯中呈均勻渾濁，管底有灰白色沉淀，振蕩呈云菌，血清型為O157。大腸桿菌為條件致病菌，而現(xiàn)霧狀散開。革蘭染色鏡檢可見革蘭陰性、無芽孢、短

8、代規(guī)?；曫B(yǎng)場的肉雞飼養(yǎng)主要采用網(wǎng)上平養(yǎng)方小和兩端鈍圓的短桿菌。式，飼養(yǎng)密度大、雞舍空氣污濁、通風(fēng)不良、光照不2.2生化試驗足、肉雞生長速度快、耗氧量大以及環(huán)境衛(wèi)生和飼11株分離菌對葡萄糖、麥