沈陽地區(qū)兒科產(chǎn)超廣譜β內(nèi)酰胺酶革蘭陰性菌的耐藥性與基因型研究

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1、沈陽地區(qū)兒科產(chǎn)超廣譜β內(nèi)酰胺酶革蘭陰性菌的耐藥性與基因型研究【摘要】目的研究沈陽地區(qū)兒科產(chǎn)超廣譜β內(nèi)酰胺酶(extendedspectrumβlactamases，ESBLs)革蘭陰性菌的耐藥性及ESBLs基因型分布，初步探討其多重耐藥性傳播的分子機制。方法KB法藥敏試驗，按照CLSI/NCCLS2005年標(biāo)準(zhǔn)篩選確認(rèn)ESBLs表型，PCR法進行ESBLs基因型別分析，擴增I類整合子全可變區(qū)，分析產(chǎn)ESBLs菌株中整合子的存在情況。結(jié)果在分離出的180株革蘭陰性菌中，有62株經(jīng)表型確證試驗證實為產(chǎn)ESBLs菌株，檢出率

2、34.4%。產(chǎn)ESBLs菌株對各種抗菌藥物的耐藥率明顯高于非產(chǎn)ESBLs菌株?；蚍中徒Y(jié)果表明，blaTEM基因陽性48株(77.4%)，blaSHV陽性32株(51.6%)，blaCTXM9組陽性31株(50%)，blaCTXM3組陽性12株(19.4%)。62株ESBLs菌株中26株整合子全可變區(qū)PCR擴增陽性，陽性率41.9%。結(jié)論沈陽地區(qū)兒科革蘭陰性菌中ESBLs菌株檢出率較高，多數(shù)菌株同時攜帶兩種或兩種以上不同型別的β內(nèi)酰胺酶，且為多重耐藥菌株，整合子機制參與其多重耐藥性的形成與傳播?！娟P(guān)鍵詞】革蘭陰性菌；超廣

3、譜β內(nèi)酰胺酶；耐藥；基因型；整合子；沈陽地區(qū)；兒科　　Investigationofantimicrobialresistanceandgenotypesofextendedspectrum　βlactamasesproducingGramnegativebacteriaisolated　frompediatricsinShenyang　　ABSTRACTObjectiveTostudytheantimicrobialresistanceandgenotypesofextendedspectrumβlactama

4、ses(ESBLs)producingGramnegativebacteriaisolatedfrompediatricsinShenyangandpreliminarilyinvestigatethemolecularmechanismsofthEirmultipleantibioticresistancedisseminationprocess.MethodsAntibioticssusceptibilityethod.ESBLsproducingisolatesatorytestaccordingtoCLSI/NC

5、CLSM100S15(2005).ThegenotypesofESBLsplifiedinordertoanalyzethepresenceandcharacterizationofclass1integroninESBLs.ResultsAmongatotalof180Gramnegativeisolates,62isolatesatorytestandtheincidenceoreresistanttomostantimicrobialsthannonESBLsproducers.Theresultsofβlac

6、tamasesgenotypingshoong26isolatesandthepositiverateostisolatesultipleresistantandproducedmorethanonetypeofβlactamase.ThemechanismsofintegrontookpartintheemergenceanddisseminationofthEIrmultipleresistance.　　KEY、SHV、CTXM、OXA、PER和VEB型β內(nèi)酰胺酶基因的特定引物進行PCR擴增，分析ESBLs基因型別，

7、擴增I類整合子全可變區(qū)，探討其多重耐藥性的傳播機制。　　1材料與方法　　1.1菌株來源　　2005年1月～2005年12月沈陽市兒科患者中臨床分離的革蘭陰性桿菌180株，其中包括大腸埃希菌59株，克雷伯菌屬27株，銅綠假單胞菌29株，不動桿菌屬22株，陰溝腸桿菌11株，聚團腸桿菌5株，產(chǎn)氣腸桿菌2株，弗氏檸檬酸桿菌5株，黏質(zhì)沙雷菌7株，液化沙雷菌3株，嗜麥芽寡養(yǎng)單胞菌6株，熒光假單胞菌2株，奇異變形菌1株，摩根摩氏菌1株。所有菌株均采用法國BioMerieux公司全自動微生物鑒定系統(tǒng)的革蘭陰性菌鑒定卡確認(rèn)?！　?.2抗生素紙

8、片　　氨芐西林(ABPC)、哌拉西林(PIPC)、阿米卡星(AMK)、頭孢呋辛(CXM)、頭孢唑林(CEZ)、頭孢他啶(CAZ)、頭孢噻肟(CTX)、頭孢曲松(CRO)、頭孢克洛(CCL)、頭孢吡肟(CPE)、頭孢西丁(CFX)、哌拉西林/三唑巴坦(PIPC/TB)、環(huán)丙沙星