微波輔助提取-高效液相色譜法測(cè)定蔬果中的vc含量

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1、微波輔助提取-高效液相色譜法測(cè)定蔬果中的Vc含量微波輔助提取-高效液相色譜法測(cè)定蔬果中的維生素C含量化學(xué)與化學(xué)工程學(xué)院中心實(shí)驗(yàn)室中山大學(xué)分析科學(xué)研究所，廣東510275*通訊作者，Email:Bgalang@163.com摘要本實(shí)驗(yàn)用微波輔助提取三種不同水果中的維生素C，采用高效液相色譜法通過標(biāo)準(zhǔn)曲線定量法，借助紫外可見光分析，在265nm的波長(zhǎng)下測(cè)定維生素C的吸光度，與標(biāo)準(zhǔn)系列比較，以保留時(shí)間來定性、峰面積定量。實(shí)驗(yàn)測(cè)得：在5-100mg/L范圍內(nèi)，維生素C濃度與峰面積具有很好的線性關(guān)系（A=32074c/（mg/L）-34595，R2=0.9999）本實(shí)驗(yàn)測(cè)得每100g橘子、金桔、蘋

2、果中的維生素C含量分別為：29.73mg/100g、33.66mg/100g、2.24mg/100g。該操作方法簡(jiǎn)單方便，靈敏迅速，準(zhǔn)確度比較好。關(guān)鍵詞維生素C微波輔助提取高效液相色譜標(biāo)準(zhǔn)曲線1引言維生素C，又叫L-抗壞血酸，化學(xué)式C6H8O6，是一種水溶性維生素。食物中的維生素C被人體小腸上段吸收，一旦吸收，就分布到體內(nèi)所有的水溶性結(jié)構(gòu)中。正常成人體內(nèi)的維生素C代謝活性池中約有1500mg維生素C，最高儲(chǔ)存峰值為3000mg。正常情況下，維生素C絕大部分在體內(nèi)經(jīng)代謝分解成草酸或與硫酸結(jié)合生成抗壞血酸-2-硫酸由尿排出；另一部分可直接由尿排出體外。（摘自http://baike.baid

3、u.com/view/245497.htm）維生素C的主要作用是提高免疫力，預(yù)防癌癥、心臟病、中風(fēng)，保護(hù)牙齒和牙齦等。另外，堅(jiān)持按時(shí)服用維生素C還可以使皮膚黑色素沉著減少，從而減少黑斑和雀斑，使皮膚白皙。富含維生素C的食物有花菜、青辣椒、橙子、葡萄汁、西紅柿等，可以說，在所有的蔬菜、水果中，維生素C含量都不少。美國(guó)專家認(rèn)為，每人每天維生素C的最佳用量應(yīng)為200～300毫克，最低不少于60毫克，半杯（大約一百毫升）新鮮橙汁便可滿足這個(gè)最低量。而中國(guó)營(yíng)養(yǎng)學(xué)會(huì)建議的膳食參考攝入量（RNI），成年人為100mg/日，可耐受最高攝入量（UL）為1000mg/日。維生素C在體內(nèi)參與多種反應(yīng)，如氧化還

4、原過程，在生物氧化和還原作用以及細(xì)胞呼吸中13微波輔助提取-高效液相色譜法測(cè)定蔬果中的Vc含量起重要作用。人體內(nèi)缺乏維生素C時(shí)容易導(dǎo)致壞血病。同時(shí)，由于維生素C是一種水溶性的抗氧化劑，可參與膠原蛋白的合成，它同時(shí)還具有防癌、預(yù)防動(dòng)脈硬化、治療貧血、抗氧化和提高人體免疫力等功效。維生素C在蔬果中普遍存在，尤其是柑桔類水果中含量較高。櫻桃、番石榴、辣椒、獼猴桃等水果中Vc含量在50-300mg/100g。詳細(xì)含量如下：（摘自http://baike.baidu.com/view/245497.htm）排名食物質(zhì)量(g)數(shù)量維生素C含量(mg)1櫻桃5012粒4502番石榴801個(gè)2163紅椒

5、801/3個(gè)1364黃椒801/3個(gè)1205柿子1501個(gè)1056青花菜61/4株967草莓1006粒808橘子1301個(gè)789芥藍(lán)菜花601/3株7210獼猴桃1001個(gè)68維生素C含量的經(jīng)典測(cè)定方法有碘量法[[]武漢大學(xué).分析化學(xué)實(shí)驗(yàn)室（第三版）北京:高等教育出版社，1997：167-175.]、熒光法[[]邵曉芬，張韻慧.譜學(xué)與光譜分析，1994.14(2)：125-130.]，隨著儀器分析方法的發(fā)展，有文獻(xiàn)采用鄰二氮菲分光光度法間接測(cè)定[[]魏玲，呂曉琴，李學(xué)琴.鄰二氮菲分光光度法間接測(cè)定藥片中維生素C的含量.昌吉學(xué)院學(xué)報(bào)，2008，2：110-112.]，也有通過與高錳酸鉀反應(yīng)

6、的分光光度法測(cè)定的[[]閏家偉，黃運(yùn)瑞.分光光度法測(cè)定藥片中維生素的含量.南陽師范學(xué)院學(xué)報(bào)，2005，4(12)：54-55.]。之前課程也采用過庫侖滴定法對(duì)維生素C藥片進(jìn)行維生素C含量，效果頗佳，快速簡(jiǎn)便。不過對(duì)于庫侖滴定法利用的是氧化還原原理，所測(cè)結(jié)果實(shí)際上是體系中的還原性物質(zhì)的維生素C當(dāng)量，對(duì)于復(fù)雜體系中存在的其他還原劑，并沒有很好的區(qū)分作用，例如在測(cè)定蘋果汁維生素C含量的時(shí)候，蘋果汁中存在的亞鐵離子會(huì)使庫侖滴定法結(jié)果過高。因此，在含有其他還原性物質(zhì)的復(fù)雜體系中，需要采用更精密的方法，本實(shí)驗(yàn)采用的是微博提取高效液相色譜法。樣品的預(yù)處理是樣品分析最為關(guān)鍵的步驟之一，尤其是分析復(fù)雜的樣

7、品時(shí)，樣品的預(yù)處理是必不可少的。所以，發(fā)展快速、高效的樣品前處理方法是分析家們一直追求的目標(biāo)。傳統(tǒng)的樣品前處理的方法如索氏抽提、超聲波萃取等不僅費(fèi)時(shí)，而且溶劑的消耗量大。微波輔助萃取(MicrowaveAssistedExtraction，MAE)具有快速、高效、省溶劑、環(huán)境友好等優(yōu)點(diǎn)。微波技術(shù)開始主要是用于無機(jī)分析的樣品預(yù)處理即微波消化，從1986年起微波能開始應(yīng)用到有機(jī)分析中的樣品預(yù)處理[[]李核，李攻科，張展霞.微波輔助萃取技