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《民族藥響鈴草的體外抑菌活性研究 》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關內容在工程資料-天天文庫。
1、民族藥響鈴草的體外抑菌活性研究周英王慧娟段震李燕黃赤夫【摘要】 目的探討響鈴草的體外抑菌作用。方法采用打孔瓊脂擴散法和稀釋法對響鈴草不同溶劑提取物進行抑菌實驗研究。結果響鈴草的不同溶劑提取物對供試細菌和真菌（金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、藤黃微球菌、綠膿桿菌以及黃霉菌）均有一定程度的抑制作用。結論響鈴草提取物有明顯的體外抑菌作用?！娟P鍵詞】響鈴草；抑菌；最小抑菌濃度；抑菌圈 Abstract：ObjectiveTostudytheantibacterialactivitiesofdifferentsolventextractsofCrotalariaferruginea
2、Grah.MethodsBytheagardiffusionanddilutionmethod,minimalinhibitoryconcentration(MIC)andinhibitorycircleoftheextractined.ResultsTheantibacterialactivityoftheextractsicrobes.ConclusionCrotalariaferrugineaGrahhasgoodantibacterialactivityinvitro. Keyonasaeruginosa；藤黃微球菌Micrococcusluteus?！ ?.
3、1.4培養(yǎng)基MRS固體培養(yǎng)基：酪蛋白胨10g，牛肉提取物10g，酵母提取物5g，葡萄糖5g，乙酸鈉5g，檸檬酸二銨2.0g，Tl，pH值調至6.8；營養(yǎng)肉湯固體培養(yǎng)基：蛋白胨10g，牛肉膏3g，氯化鈉5g，瓊脂15g，定容至1000ml，pH值調至7.0；查氏固體培養(yǎng)基：硝酸鈉3g，磷酸氫二鉀1.0g，MgSO4·7H2O0.05g，蔗糖30g，瓊脂15g，液體培養(yǎng)基組成除了不加瓊脂外，與相應的固體培養(yǎng)基相同。 1.1.5儀器高低溫恒溫培養(yǎng)箱（上海一恒科技有限公司），旋轉蒸發(fā)儀（BUCHIR-200），SHZ-D(Ⅲ)循環(huán)水式真空泵（鞏義市予華儀器有限公司），電子天平
4、（OHAUS）凈化工作臺（上海市純昱科學儀器有限公司），真空冷凍干燥機（LABCONCO），超低溫冰箱（FormaScientific），雙光束紫外可見分光光度計（北京普析通用儀器有限公司TU-1901）?！ ?.2方法 1.2.1響鈴草不同溶劑提取物的制備方法將干燥的響鈴草粉碎過40目篩，稱取等量的響鈴草3份，每份150g，分別置于1000ml的水、酒精、醋酸乙酯中。每種溶劑浸泡3次，每次置于恒溫（37℃）搖床上（200r/min）振蕩12h，抽濾得到提取液。水的提取液于-80℃冷凍過夜后用真空冷凍干燥機干燥；酒精提取液40℃減壓旋轉濃縮除去酒精，于-80℃冷凍過夜
5、后用真空冷凍干燥機干燥；醋酸乙酯提取液先減壓濃縮除去醋酸乙酯，得浸膏?！ ?.2.2對響鈴草不同溶劑提取物的抑菌活性檢測 菌種培養(yǎng)：金黃色葡萄球菌staphylococcusaureus，大腸桿菌Escherichiacoli，綠膿桿菌Pseudomonasaeruginosa，藤黃微球菌Micrococcusluteus采用營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基（組成成分見上）活化培養(yǎng)，糞鏈球菌Enterococcusfaecalis采用MRS培養(yǎng)基（組成成分見上）活化培養(yǎng)，黃霉菌Aspergillusflavus采用查氏培養(yǎng)基（組成成分見上）活化培養(yǎng)，分別將各菌種濃度調至OD600約為1
6、，待用?！ 〔捎迷嚬芟♂尫▽ψ畹鸵志鷿舛龋∕IC）的測定：取上述得到的水和酒精溶劑的粗提物0.1g，溶于1ml無菌水中，醋酸乙酯溶劑的提取物0.1g溶于1mlDMF，使其充分溶解，用細菌過濾器過濾，取0.3ml樣品溶液以相應的液體培養(yǎng)基倍比稀釋成樣品濃度分別為50,25,12.5,6.25,3.13,1.57,0.79mg/ml，每管300μl。分別在試管中加入30μl菌液（OD600約為1），置于37℃恒溫培養(yǎng)16h。分別取100μl菌懸液均勻涂板。然后放37℃溫箱靜止培養(yǎng)24h后取出，每梯度涂布3個平板。此過程重復兩次，測定最小抑菌濃度（MIC）〔5〕，篩選出抑菌活
7、性最強的組分?！ ∫志Φ臏y定：取各溶劑的浸提物30mg，分別用相應的溶劑（無菌水、乙醇、醋酸乙酯）1ml，制成30mg/ml的樣品溶液，用細菌過濾器過濾。在相應的固體培養(yǎng)基平板上加0.1ml菌液，均勻涂布。稍干后用8mm打孔器打孔，每孔加0.1ml樣品，37℃培養(yǎng)24h，測量抑菌圈大小。 2結果 2.1響鈴草不同溶劑提取物MIC比較見表1。采用試管稀釋法對響鈴草3種溶劑提取物的最低抑菌濃度的進行測定，結果表明響鈴草的3種溶劑提取物對供試的細菌及真菌具有不同的抑制作用： 水溶劑浸提物的總體抑菌活性較強，對藤黃微球菌、黃霉菌均有較好的
