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《微波輻照對(duì)大鼠海馬coxi、iv基因表達(dá)影響的論文》由會(huì)員上傳分享,免費(fèi)在線閱讀,更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。
1、微波輻照對(duì)大鼠海馬COXI、IV基因表達(dá)影響的論文【關(guān)鍵詞】微波;海馬;細(xì)胞色素c氧化酶;能量代謝 摘要:目的研究微波輻照后大鼠海馬組織細(xì)胞色素c氧化酶(cox)亞基i、ivmrna表達(dá)變化和對(duì)酶活性的影響,探討微波輻照對(duì)大鼠海馬能量代謝影響的機(jī)制。方法采用rt-pcr法檢測微波輻照后海馬組織coxi、ivmrna水平,采用還原細(xì)胞色素c法和高效液相色譜法(hpic)分別檢測微波輻照后海馬組織細(xì)胞色素c氧化酶活性和三磷酸腺苷(atp)、二磷酸腺苷(adp)、一磷酸腺苷(amp)含量。結(jié)果微波輻照后,大鼠海馬組織細(xì)胞色素c
2、氧化酶活性和atp含量明顯降低,并與coxi、ivmrna表達(dá)變化呈一致性。結(jié)論微波輻照可影響大鼠海馬coxi、ivmrna表達(dá)而降低酶的活性,進(jìn)而引起能量代謝障礙?! £P(guān)鍵詞:微波;海馬;細(xì)胞色素c氧化酶;能量代謝 effectofmicrornaexpressioninhippocampusofrats yujianhua,zhongmin,xieyan,etal. departmentofoccupationalhygiene,thethirdmilitarymedicaluniversity(chongqin
3、g400038,china) abstract:objectivetostudymrnaexpressionofcytochromecoxidase(cox)subunitⅰ,ⅳandactivityofcytochromecoxidaseinhippocampusofratsaftermicroolecularmechanismofmicroetabolismdeficitinhippocampusofrats.methodstheexpressionofcytochromecoxidasesubunitⅰandⅳmr
4、naaftermicroonophosphate(amp)andactivityofcytochromecoxidaseinhippocampusanceliquidchromatography(hplc)andreducedcytochromecmethodsrespectively.resultsdecreasedactivityofcytochromecoxidaseandcontentofatpinhippocampusecoxidasesubunitⅰandⅳmrnaicrornaandavtivityofcox
5、,andfurthertoinduceenergymetabolismdeficitinhippocampusofrats. keyicropus;cytochromecoxidase;energymetabolism 現(xiàn)代生活與微波技術(shù)的應(yīng)用密切相關(guān),由此導(dǎo)致的環(huán)境污染問題已引起了廣泛關(guān)注。.本研究選擇在細(xì)胞色素c氧化酶(cox)活性中起主要作用的催化亞基ⅰ和調(diào)節(jié)亞基ⅳ為觀察指標(biāo),觀察微波對(duì)cox活性和基因表達(dá)的影響,以期探討微波輻照致大鼠海馬能量代謝改變的分子機(jī)制?! ?材料與方法 11材料(1)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物:健康雄
6、性j公司);凝膠成像系統(tǒng)(美國bio-rad公司);du640紫外分光光度計(jì)(德國beckman公司);高效液相色譜儀(日本島津公司)。(4)試劑:coxi引物(上游:5′gctgctaatactggcagtgaga3′,下游:5′gcttcggaaactgacttgtacc3′,擴(kuò)增片段約381bp);coxiv引物(上游:5′ggcagcagtggcagaatgttgg3′,下游:5′acaagcgcagtgaagccgatga3′,擴(kuò)增片段約364bp);內(nèi)參βactin(上游:5′taaagacctctatgcca
7、acacagt3′,下游:5′cacgatggaggggccggactcatc3′,擴(kuò)增片段約241bp),所有引物由上海sangon公司合成。atpna2、adpna2、cytc(美國sigma公司)?! ?2方法 121動(dòng)物輻照動(dòng)物置于可透謝微波的專用輻照盒內(nèi),在反射近似零的輻照暗室接受全身一次性輻照20min,輻照環(huán)境溫度和濕度用設(shè)備保持恒定,溫度(18±2)℃,濕度50%~70%,對(duì)照組除不接受輻照原的作用外其他處理?xiàng)l件與輻照組一樣。 1.2.2海馬組織腺嘌呤核苷酸測定[1]將大鼠斷頭處死,冰浴條件下分離海馬,
8、準(zhǔn)確稱重,按20μl/mg組織加入預(yù)冷的02mol/l高氰酸勻漿,4℃,18000g離心15min,上清液用1mol/l碳酸鉀中和并調(diào)ph至65~70,重復(fù)離心1次,取上清液作高效液相色譜分析,采用公式ec(energycharge,ec)=(atp+05adp)/(atp+adp+amp)計(jì)算能荷?!?/p>