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《赤眼蜂寄生與玉米螟胚胎發(fā)育的關(guān)系》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在應(yīng)用文檔-天天文庫(kù)。
1、赤眼蜂寄生與玉米螟胚胎發(fā)育的關(guān)系*利翠英以蓖麻蠶卵為寄主，對(duì)赤眼蜂的個(gè)體發(fā)育過(guò)程進(jìn)行了研究。結(jié)果指出，如果赤眼蜂在寄主胚胎發(fā)育早期（即胚胎反轉(zhuǎn)期之前）進(jìn)行寄生，則正在發(fā)育的寄主胚胎停止發(fā)育，而赤眼蜂卵得到正常發(fā)育；[1]。筆者曾采用玉米螟赤眼蜂（Trichogrammaostriniae）早期寄生亞洲玉米螟（Ostriniafurnacalis）卵，并測(cè)定其卵內(nèi)保幼激素酯酶（Juvenilehormoneesterase,JHE）活力的變化，證實(shí)玉米螟赤眼蜂對(duì)亞洲玉米螟卵的早期寄生屬“抑性寄生”[2]。本研究為探討赤眼蜂在
2、不同時(shí)間寄生對(duì)亞洲玉米螟卵胚胎發(fā)育的調(diào)控作用，筆者通過(guò)測(cè)定赤眼蜂不同時(shí)間寄生后，亞洲玉米螟卵內(nèi)JHE活力變化，對(duì)比赤眼蜂不同時(shí)間寄生的寄生發(fā)生率以及寄生后赤眼蜂與寄主的發(fā)育情況，來(lái)闡明赤眼蜂的寄生特點(diǎn)。1材料與方法1.1材料玉米螟赤眼蜂（T.ostriniae）引自華南農(nóng)業(yè)大學(xué)。用米蛾(CorcyracephaloniaStainton)卵繁殖。置于15L:9D、(25±1)℃、RH為80%左右的光照培養(yǎng)箱中飼養(yǎng)。試驗(yàn)中所用的赤眼蜂為一日齡雌蜂。亞洲玉米螟引自中國(guó)農(nóng)科院植物保護(hù)研究所，參照周大榮等[3]的方法,在室內(nèi)用人工
3、飼料飼養(yǎng)。試驗(yàn)中所用的卵塊為產(chǎn)后當(dāng)日的卵塊。1.2試驗(yàn)方法1.2.1赤眼蜂不同時(shí)間寄生的寄生發(fā)生率以及寄生后赤眼蜂與寄主的發(fā)育情況：用硫酸紙收集新鮮的（產(chǎn)后12h內(nèi)）、直徑約0.5cm的亞洲玉米螟卵塊，剪去周圍多余的硫酸紙，將2塊帶卵的硫酸紙粘附于3cm×3cm九宮格紙的對(duì)角上制作成一張卵卡。引入羽化24h內(nèi)經(jīng)群體交尾后的玉米螟赤眼蜂雌蜂一頭，并在管內(nèi)放置浸過(guò)10%蜂蜜水的脫脂棉球，管口用外包紗布的脫脂棉球封口。然后將玻璃管放入溫度（25±1）℃、RH50%～80%、15L:9D的光照恒溫培養(yǎng)箱中，24h后除去雌蜂。每24
4、h檢查一次玉米螟或蜂的發(fā)育情況。赤眼蜂開(kāi)始羽化后，每12h觀察一次，并將羽化蜂引出，最后解剖剩余玉米螟卵，統(tǒng)計(jì)寄生率。1.2.2待測(cè)樣品的取樣方法：取當(dāng)日的卵塊按產(chǎn)卵后24，48，60，72，84h大量接蜂。3h后去除赤眼蜂，接種后每隔12h取待測(cè)樣品，直至96h后亞洲玉米螟卵孵化或144h左右赤眼蜂羽化，實(shí)驗(yàn)組分別取樣9、8、7、6次；對(duì)照組（未寄生卵）同時(shí)取樣,因96h后亞洲玉米螟卵已孵化，故從0至96h僅取樣9次。所取樣品卵與對(duì)照卵立即置于液氮罐中保存。1.2.3保幼激素酯酶活力測(cè)定：JHE活力測(cè)定采用放射化學(xué)法(R
5、C)[4]。按每mL緩沖液60mg卵塊的比例，用pH7.0的0.1mol﹒L-1的磷酸緩沖液進(jìn)行卵塊的冰浴勻漿，超聲波破碎5min后靜置過(guò)夜，離心制備待測(cè)液。將待測(cè)液加入稀釋后的3H.-JHI標(biāo)樣溶液中。經(jīng)(29±1)℃溫浴30min后用堿性甲醇溶液中止反應(yīng)；渦旋振蕩后加入異辛烷振蕩萃取10min，4000r﹒min-1離心15min。吸取上清液和下層液各50μL置于閃爍瓶中，加入5mL親水型閃爍液，由BeckmanLS—9800型液體閃爍計(jì)數(shù)器用H數(shù)法校準(zhǔn)測(cè)定放射性活度（Bq）。所用試劑：3H-JHⅠ（10C）由美國(guó)杜邦
6、原子能研究所合成（中國(guó)科學(xué)院動(dòng)物研究所提供），放射性比活度為444.0GBq﹒mmol-1，用異辛烷稀釋后使用。異辛烷為國(guó)產(chǎn)分析純?cè)噭?；磷酸緩沖液，堿性甲醇，親水型閃爍液（PPO5g，POPOP0.5g，二甲苯665mL，TritonX-100335mL）。除TritonX-100為Amresco進(jìn)口分裝外，其余均由國(guó)產(chǎn)分析純?cè)噭┡渲?。測(cè)定重復(fù)3次。1.3數(shù)據(jù)處理用Statistic6.0中的ANOVA進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析，對(duì)于大于70%或小于30%的百分?jǐn)?shù)，先進(jìn)行反正弦轉(zhuǎn)換，然后再進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。寄生發(fā)生率用U測(cè)驗(yàn)進(jìn)行差異顯著
7、性檢驗(yàn)。蜂羽化率（%）=赤眼蜂羽化卵數(shù)÷被寄生卵數(shù)×100%；寄生發(fā)生率（%）=發(fā)生寄生蜂數(shù)÷供試蜂總數(shù)×100%2結(jié)果與分析2.1亞洲玉米螟卵的發(fā)育進(jìn)度觀察對(duì)亞洲玉米螟卵發(fā)育的觀察發(fā)現(xiàn)，亞洲玉米螟卵在產(chǎn)下至12h時(shí)段其外表呈現(xiàn)乳白色；24h時(shí)變成淡黃色；72h時(shí)為深黃色，且部分卵內(nèi)出現(xiàn)棕色點(diǎn)；到84h時(shí)卵內(nèi)有棕-黑色點(diǎn)出現(xiàn)；96h時(shí)幼蟲(chóng)形態(tài)清晰可見(jiàn)，幼蟲(chóng)頭部在卵殼內(nèi)左右移動(dòng)并開(kāi)始孵化；完成發(fā)育的卵在120h內(nèi)基本全部孵化。2.2赤眼蜂的寄生能力Table1.Percentsofwaspssuccessfullyparas
8、itized(%)Hostage（h）Percentofwaspsthatsuccessfullyparasitized（%）TotalwaspsusedintestU-test0-1210030A12-2496.8832A24-3667.8628B48-6072.2236B60-727520B72-8
