灰黃霉素超聲波提取工藝研究論文

《灰黃霉素超聲波提取工藝研究論文》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關內容在學術論文-天天文庫。

1、灰黃霉素超聲波提取工藝研究論文【摘要】目的探討超聲波提取灰黃霉素的優(yōu)化工藝條件。方法用紫外分光光度法(UV)測定灰黃霉素的含量。以灰黃霉素的提取率為評價指標，在單一影響因素考察的基礎上，采用正交實驗確定超聲波提取灰黃霉素的優(yōu)化工藝條件。結果超聲波提取灰黃霉素的優(yōu)化工藝條件為：10倍量的丙酮為提取溶劑，功率300ethodsThecontentofgriseofulvininextractorisdeterminedbyUVspectrophotometryandthecontentofgriseofulvinusedasqualitycontrolcrite

2、ria.Utilizingorthogonaltesttogainanoptimumextractionconditions,basedontheresultofsinglefactoralgorithm.ResultThebestextractionconditionsareasfolloeis40min,andtheultrasonicradiationtimeis3satatime.Thevalidateexperimentindicatesthattheconditiongainedbyexperimentisanoptimumone.Conclus

3、ionTheultrasonicextractionprocessofgriseofulvinisfeasible,andcouldbeusedinroutineoperation.KEYent灰黃霉素(griseofulvin)是1939年從灰黃青霉(Penicilliumgriseofulvin)培養(yǎng)液中得到的一種含氯代謝產物，1958年開始用于臨床。1960年中國醫(yī)學科學院抗生素研究所從我國土壤中得到灰黃霉素的生產菌，并研究試制成功灰黃霉素［1］?；尹S霉素是非多烯類抗真菌抗生素，已廣泛用于治療皮膚及角質層的真菌感染。對紅色發(fā)癬菌、斷發(fā)癬菌、硫毛發(fā)癬菌、

4、小孢子菌和絮狀表皮菌等有抑制作用［1］。臨床用于頭癬、迭瓦癬、皮膚癬及手(足，甲)癬等體表真菌感染，特別對頭癬的療效顯著，國內治愈率在90%以上［2］。灰黃霉素是存在于菌絲體內部的抗生素。目前工業(yè)上采用溶劑連續(xù)浸泡干菌體的提取方法，溶劑大多為丙酮［1，3，4］?？紤]到常規(guī)提取所需時間較長，提取率較低，溶劑用量較大，本研究探討采用超聲波技術提取灰黃霉素的工藝，利用超聲波的空化［5］作用、熱效應、機械作用破壞菌體細胞壁，使溶劑易于滲透至細胞內，有效成分更多的轉移到溶劑中，達到縮短提取時間，提高提取率的目的［6～8］。1儀器與材料1.1儀器U1810型紫外可見分

5、光光度計(北京普析通用儀器公司)，ALC210.4型電子天平(德國Sartorius公司)，JY922D超聲波細胞粉碎機(寧波新芝生物科技股份有限公司)，HF2.5B超聲波循環(huán)提取器(北京宏祥隆生物技術開發(fā)有限公司)。1.2材料灰黃霉素菌體(赤峰制藥集團生產，編號：NI88)，對照品(中華制藥廠產品，純度為99.8%)，丙酮(天津市博迪化工有限公司)，95%乙醇(沈陽化學試劑廠)，氯仿(天津市博迪化工有限公司)，所用試劑均為分析純。2實驗方法2.1標準曲線的制備精密稱取灰黃霉素對照品25mg，25ml丙酮溶液定容，配制標準溶液(初始濃度1.0mg/ml

6、)。精密量取標準溶液2ml于25ml容量瓶，用95%乙醇定容。取丙酮2ml置于25ml容量瓶中，95%乙醇定容，作為空白溶液。紫外光譜200～400nm全波長掃描，在326nm處有最大吸收峰。精密量取0.2、0.3、0.4、0.5、1.0和1.2ml的標準溶液分別置于25ml容量瓶中，用95%乙醇定容。取丙酮0.2、0.3、0.5、0.4、1.0和1.2ml分別置于25ml容量瓶中，用95%乙醇溶液定容，作為空白對照。在326nm處測其吸光度A值，測定結果計算得回歸方程：A=14.782C+0.0017r=0.99982.2灰黃霉素含量測定稱取灰黃霉素菌體(

7、含水5%)1.0g置于250ml燒瓶中，加入丙酮50ml，磁力攪拌回流提取三次，每次1h。測得菌體中灰黃霉素含量為30.67%。2.3灰黃霉素超聲波提取影響因素考查(1)超聲提取溶劑文獻報道［3，9］灰黃霉素易溶于二甲基甲酰胺、二氯乙烷(以上溶解度約為10%～12%l溶解，超聲條件設定為：功率400in，室溫下進行提取，分別測定灰黃霉素溶液的吸光度，提取率分別為83.71%、78.69%和28.95%。由于丙酮對灰黃霉素的提取率較高，因此本實驗選取丙酮作為超聲提取溶劑。(2)溶劑用量稱取灰黃霉素菌體5g，共6份，分別用4、8、10、12、16、20倍量丙酮溶

8、解，超聲波條件不變。分別測定灰黃霉素溶液的吸光度，計