灰黃霉素超聲波提取工藝研究

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1、灰黃霉素超聲波提取工藝研究(1)【摘要】?目的探討超聲波提取灰黃霉素的優(yōu)化工藝條件。方法用紫外分光光度法(UV)測定灰黃霉素的含量。以灰黃霉素的提取率為評價指標(biāo)，在單一影響因素考察的基礎(chǔ)上，采用正交實(shí)驗(yàn)確定超聲波提取灰黃霉素的優(yōu)化工藝條件。結(jié)果超聲波提取灰黃霉素的優(yōu)化工藝條件為：10倍量的丙酮為提取溶劑，功率300W，單次輻射時間3s，間歇時間5s，提取時間40min，灰黃霉素提取率為85.58%。通過驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)表明，本實(shí)驗(yàn)所得工藝條件為優(yōu)化工藝條件。結(jié)論本實(shí)驗(yàn)所得工藝條件可行，具有一定的實(shí)際應(yīng)用價值?！娟P(guān)鍵詞】?灰黃霉素超聲提取正交實(shí)驗(yàn)???S

2、tudyontheultrasonicextractionprocessofgriseofulvin????ABSTRACT?Objective?Tostudytheoptimalextractionconditionsofgriseofulvinbyultrasonicextractionmethods.?Methods?ThecontentofgriseofulvininextractorisdeterminedbyUVspectrophotometryandthecontentofgriseofulvinusedasqualitycont

3、rolcriteria.Utilizingorthogonaltesttogainanoptimumextractionconditions,basedontheresultofsinglefactoralgorithm.?Result?Thebestextractionconditionsareasfollows:theextractingsolventisacetone(10V/W),thepoweris300W,theextractiontimeis40min,andtheultrasonicradiationtimeis3satatim

4、e.Thevalidateexperimentindicatesthattheconditiongainedbyexperimentisanoptimumone.?Conclusion?Theultrasonicextractionprocessofgriseofulvinisfeasible,andcouldbeusedinroutineoperation.???KEYWORDS?Griseofulvin;?Ultrasonicextraction;?Orthogonalexperiment??灰黃霉素(griseofulvin)是1939年

5、從灰黃青霉(Penicilliumgriseofulvin)培養(yǎng)液中得到的一種含氯代謝產(chǎn)物，1958年開始用于臨床。1960年中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院抗生素研究所從我國土壤中得到灰黃霉素的生產(chǎn)菌，并研究試制成功灰黃霉素［1］。???灰黃霉素是非多烯類抗真菌抗生素，已廣泛用于治療皮膚及角質(zhì)層的真菌感染。對紅色發(fā)癬菌、斷發(fā)癬菌、硫毛發(fā)癬菌、小孢子菌和絮狀表皮菌等有抑制作用［1］。臨床用于頭癬、迭瓦癬、皮膚癬及手(足，甲)癬等體表真菌感染，特別對頭癬的療效顯著，國內(nèi)治愈率在90%以上［2］。???灰黃霉素是存在于菌絲體內(nèi)部的抗生素。目前工業(yè)上采用溶劑連續(xù)浸泡干

6、菌體的提取方法，溶劑大多為丙酮［1，3，4］?？紤]到常規(guī)提取所需時間較長，提取率較低，溶劑用量較大，本研究探討采用超聲波技術(shù)提取灰黃霉素的工藝，利用超聲波的空化［5］作用、熱效應(yīng)、機(jī)械作用破壞菌體細(xì)胞壁，使溶劑易于滲透至細(xì)胞內(nèi)，有效成分更多的轉(zhuǎn)移到溶劑中，達(dá)到縮短提取時間，提高提取率的目的［6～8］。???1?儀器與材料???1.1?儀器???U1810型紫外可見分光光度計(北京普析通用儀器公司)，ALC210.4型電子天平(德國Sartorius公司)，JY922D超聲波細(xì)胞粉碎機(jī)(寧波新芝生物科技股份有限公司)，HF2.5B超聲波循環(huán)

7、提取器(北京宏祥隆生物技術(shù)開發(fā)有限公司)。???1.2?材料???灰黃霉素菌體(赤峰制藥集團(tuán)生產(chǎn)，編號：NI88)，對照品(中華制藥廠產(chǎn)品，純度為99.8%)，丙酮(天津市博迪化工有限公司)，95%乙醇(沈陽化學(xué)試劑廠)，氯仿(天津市博迪化工有限公司)，所用試劑均為分析純。???2?實(shí)驗(yàn)方法???2.1?標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備???精密稱取灰黃霉素對照品25mg，25ml丙酮溶液定容，配制標(biāo)準(zhǔn)溶液(初始濃度1.0mg/ml)。精密量取標(biāo)準(zhǔn)溶液2ml于25ml容量瓶，用95%乙醇定容。取丙酮2ml置于25ml容量瓶中，95%乙醇定容，作為空白溶液。紫外

8、光譜200～400nm全波長掃描，在326nm處有最大吸收峰。???精密量取0.2、0.3、0.4、0.5、1.0和1.2ml的標(biāo)準(zhǔn)溶液分別置于25m