大孔吸附樹脂分離純化白頭翁皂苷

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1、實驗八?大孔吸附樹脂分離純化白頭翁皂苷??一、實驗目的???·掌握大孔吸附樹脂的性質和使用原理；???·學習用大孔吸附樹脂分離天然親水性成分的工藝過程以及工藝參數(shù)優(yōu)化方法。??二、實驗原理?????白頭翁（PulsatiLla?chinenesis）為常用傳統(tǒng)中藥，其味苦、性寒，有清熱解毒、涼血止痢等功效，現(xiàn)代藥理學研究表明其具有抗阿米巴原蟲、抗菌、抗滴蟲、抗腫瘤作用。白頭翁中主要含有皂苷類成分。?????大孔吸附樹脂是一種不含交換基團的具有大孔結構的高分子吸附劑，是一種親脂性物質，具有各種不同的表面性質，依靠分子中的親脂鍵、偶極離

2、子及氫鍵的作用，可以有效地吸附具有不同化學性質的各種類型化合物，同時也容易解吸附。大孔吸附樹脂按極性強弱分為極性、中極性和非極性三種。大孔吸附樹脂具有吸附速度快，選擇性好，吸附容量大，再生處理簡單，機械強度高等優(yōu)點。根據(jù)反相色譜和分子篩原理，對大分子親水性成分吸附力弱，對非極性物質吸附力強，適用于親水性和中等極性物質的分離，可除去混合物中的糖和低極性小分子有機物，被分離組分間極性差別越大，分離效果越好。一般用水、含水甲醇或乙醇、丙酮洗脫，最后用濃醇或丙酮洗脫，再生時用甲醇或乙醇浸泡洗滌即可。?????本實驗采用D101型大孔吸附樹脂

3、提取分離白頭翁中的皂苷。??三、試劑與儀器?????試劑：D101型大孔吸附樹脂，乙醇，白頭翁粗粉，正丁醇，醋酸，乙醚，蒸餾水，丙酮，活性炭，棉花、硫酸。?????儀器：燒杯，漏斗，濾紙，三角燒瓶，球形冷凝管，索氏提取器，電子天平，恒溫水浴，硅膠薄層板，毛細管，色譜柱，色譜層析缸。??????四、實驗步驟?????(1)大孔吸附樹脂的預處理??取D101型大孔吸附樹脂100g于500mL索氏提取器中，用150mL乙醇回流3h，待回流液1份加3份水無混濁時，取出樹脂瀝干乙醇，放入蒸餾水中，浸泡待用。?????(2)皂苷的提取??取粉碎

4、后得到的白頭翁藥材粗粉50g，加入200mL工業(yè)酒精回流2h，過濾，再重復提取一次，合并濾液，回收乙醇至10mL，加50mL乙醚沉淀，倒出上清液，??過濾，沉淀用水溶解，活性炭脫色、過濾、濾液上柱。?????(3)色譜分離??取一玻璃柱，下端塞上棉花，濕法裝入已處理好的60g大孔吸附樹脂，上端再加少許棉花，取總皂苷液上柱，用水200mL洗脫，再用20%、50%、95%乙醇各200mL洗脫，至洗脫液中不含皂苷，收集各洗脫液。洗脫液20%乙醇、50%乙醇部分各取10mL于水浴加熱蒸發(fā)濃縮至2mL點樣；95%部分于水浴回收至小體積(約30

5、mL)點樣用(4)產品的薄層色譜鑒定?????色譜材料：硅膠薄層板。?點樣：20%乙醇濃縮液、50%乙醇濃縮液、95%乙醇濃縮液。?????展開劑：正丁醇-醋酸-水(4：1：1)。?????展開方式：預飽和后，上行展開。?????顯色：10%硫酸液105℃顯色。???五、實驗結果與討論?????記錄實驗條件、現(xiàn)象、圖譜、斑點顏色、各試劑用量及產品的重量。??六、注意事項?????·配制展開劑時要充分搖勻。?·用乙醚沉淀時要一邊攪拌一邊倒入乙醚，使沉淀完全。?????·乙醚沸點低，要注意安全。??七、思考題?1．大孔吸附樹脂法提取分離

6、皂苷的原理是什么？有何特點？?2．為什么要進行樹脂的預處理？