芍藥苷對(duì)stz損傷的ins1細(xì)胞的保護(hù)和修復(fù)作用的論文

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1、芍藥苷對(duì)STZ損傷的INS1細(xì)胞的保護(hù)和修復(fù)作用的論文芍藥苷對(duì)stz損傷的ins1細(xì)胞的保護(hù)和修復(fù)作用【關(guān)鍵詞】芍藥苷;ins1細(xì)胞;stz;抗氧化能力【摘要】目的研究中藥單體芍藥苷對(duì)ins1細(xì)胞的影響，及對(duì)鏈脲佐菌素(stz)損傷的胰島細(xì)胞的保護(hù)、修復(fù)作用，并初步探討其保護(hù)機(jī)制。方法ins1細(xì)胞傳代培養(yǎng)后，用四氮唑藍(lán)(mtt)比色法測定細(xì)胞增殖活力，并測定細(xì)胞培養(yǎng)液中胰島素濃度、丙二醛(mda)濃度、總抗氧化能力(taoc)。結(jié)果芍藥苷可促進(jìn)ins1細(xì)胞釋放胰島素。stz損傷后，ins1細(xì)胞活力降低;胰島素分泌量減少;mda含量明顯升高;taoc下

2、降。芍藥苷保護(hù)組能不同程度改善stz引起的上述指標(biāo)的改變。結(jié)論芍藥苷可促進(jìn)ins1細(xì)胞釋放胰島素，對(duì)stz損傷的ins1細(xì)胞有顯著的保護(hù)作用，這種作用可能是通過提高ins1細(xì)胞的抗氧化能力實(shí)現(xiàn)的。【關(guān)鍵詞】芍藥苷;ins1細(xì)胞;stz;抗氧化能力　【abstract】objectivetostudytheeffectofthetraditionalchinesemedicinemonomerpaeoniflorinonins1andtheprotectiveandprostheticeffectsofpaeoniflorinonstzinducedins

3、1celldamage,andtoexploreitsprotectivemechanisms.methodsaftersubculturingins1cells,thecellviabilityinedbytetrazolium(mtt)assay;andinsulinconcentrations,malondialdehyde(mda)concentrationandtotalantioxidantcapacity(taoc)ofcellculturemediumotedthereleaseofinsulin;afterstzinjury,thecellvia

4、bilityandinsulinofins1daconcentrationprovedtheseindicatorsthatinducedbystzonvariousextent.conclusionspaeoniflorincanpromotetheinsulinreleaseofins1cells,andhasasignificantprotectiveeffectonstzinducedins1cellsdamage,thatmaybeachievedthroughincreasingantioxidantcapacityofins1cells.　　【

5、keyda)的含量，提高總抗氧化能力(taoc)水平。而芍藥苷對(duì)胰島細(xì)胞有否作用，目前國內(nèi)外尚未見報(bào)道。因此本實(shí)驗(yàn)觀察了芍藥苷對(duì)胰島細(xì)胞的影響及對(duì)stz損傷后胰島細(xì)胞的保護(hù)、修復(fù)作用，并初步探討其作用機(jī)制?！　?材料與方法　　1.1材料　　大鼠胰島素瘤細(xì)胞(ins1)購自中國典型培養(yǎng)物保藏中心(cctcc)，中藥單體芍藥苷購自陜西旭煌植物科技公司，1640培養(yǎng)基購自gibco公司，小牛血清購自杭州四季青公司，噻唑藍(lán)(mtt)購自sigma公司，胰島素放射免疫試劑盒購自中國原子能研究所，taoc、mda試劑盒購自南京建成生物工程研究所。　　1.2方法　　1.2.1

6、細(xì)胞培養(yǎng)　　ins1用含10%小牛血清的1640培養(yǎng)液，37℃，5%co2飽和濕度細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)，0.25%胰蛋白酶1ml消化2～4min后傳代，分瓶繼續(xù)培養(yǎng)，2～3d傳代一次?！　?.2.2胰島素、mda、taoc測定　　ins1按1×105個(gè)/ml、每孔200μl置于96孔培養(yǎng)板，培養(yǎng)24h后，分別加入不同濃度的葡萄糖(5.6、8.4、11.2、16.8、22.4、33.6mmol/l)、鏈脲佐菌素(stz)及芍藥苷，藥物容量均為10μl。藥物作用一定時(shí)間后，收集細(xì)胞培養(yǎng)液，用放射免疫法測胰島素含量，比色法測定mda含量和taoc?！　?.2.3mtt法

7、測定胰島細(xì)胞增殖活力　　ins11×105個(gè)/ml、每孔100μl置于96孔培養(yǎng)板，培養(yǎng)24h后，分別加入各濃度藥物作用12h后，每孔加入5mg/ml的mtt10μl，放入孵箱中培養(yǎng)4h后，每孔加入二甲基亞砜100μl，過夜，用全自動(dòng)酶標(biāo)儀測定570nm處吸光度(a)值，進(jìn)行組間比較?！　?.3分組　　共分為五組：①正常對(duì)照組：培養(yǎng)的ins1細(xì)胞不做任何干預(yù)處理;②芍藥苷組：培養(yǎng)液中分別加入終濃度為1×10-5mol/l、1×10-6mol/l、1×10-7mol/l的芍藥苷，作用12h;③stz損傷組：培養(yǎng)液中加入stz，使終濃度為3mol/l