枯草芽孢桿菌培養(yǎng)條件的優(yōu)化研究

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1、畢業(yè)設(shè)計(jì)(論文)課題名稱枯草芽孢桿菌培養(yǎng)條件的優(yōu)化研究2014年5月15日目錄摘要2Abstract31前言42材料與方法72.1實(shí)驗(yàn)試劑與材料72.2主要儀器與設(shè)備72.3試驗(yàn)方法83結(jié)果與分析83.1枯草芽孢桿菌的標(biāo)準(zhǔn)曲93.2單因素試驗(yàn)結(jié)果103.3正交試驗(yàn)結(jié)果分析134結(jié)論和討論155參考文獻(xiàn)166致謝1718枯草芽孢桿菌培養(yǎng)條件的優(yōu)化研究摘要本文通過(guò)單因素實(shí)驗(yàn)和正交試驗(yàn)研究枯草芽孢桿菌(Bacillussubtilis)的發(fā)酵條件（PH、溫度、時(shí)間、接種量）對(duì)枯草芽孢桿菌生長(zhǎng)量的影響。本實(shí)驗(yàn)的枯草芽孢桿菌在BPG液體培養(yǎng)基上培養(yǎng)，通過(guò)單因?qū)嶒?yàn)及正交試驗(yàn)得到最佳的發(fā)酵培養(yǎng)條件為：

2、初始pH7.0；溫度35℃；時(shí)間20h；接種量為5%。在此培養(yǎng)條件下的活菌液量為3.785×107CFU/ml，相比在LB培養(yǎng)基下培養(yǎng)時(shí)的活菌液量3.2×106CFU/ml提高了10倍左右。關(guān)鍵字：枯草芽孢桿菌；正交試驗(yàn)；生長(zhǎng)量18OptimizationstudyofbacillussubtiliscultureconditionsAbstractInthispaper,westudyBacillussubtilis(Bacillussubtilis)fermentationconditions(PH,temperature,time,quantityof)theimpactonthe

3、growthofBacillussubtilis.Theexperimentofbacillussubtilisincombinedcultivatedinliquidmedium,isobtainedbysingleforexperimentandtheorthogonalexperimentthebestfermentationcultureconditionsasfollows:theinitialPH7.0.Temperature35℃;Time20h;Inoculationquantitywas5%.Undertheconditionofthecultivationoftheb

4、estamountofbacteriumfluidis3.785x107cfu/ml,comparedtowhenculturedinLBmediumunderthemicrobialquantity:3.231x107cfu/mlbyabout10times.Keywords:Bacillussubtilis;Cultureconditions;increment181前言枯草芽孢桿菌(Bacillussubtilis)是一種好氧性產(chǎn)芽孢桿狀細(xì)菌(G+)[1]，其基本特征：桿菌：一般0.7-0.8×2.0-3.0μm，電子顯微鏡測(cè)量為0.5-0.6×1.1-3.5μm，著色均勻，無(wú)莢膜

5、，周生鞭毛，能運(yùn)動(dòng)。革蘭氏陽(yáng)性菌，芽孢0.6～0.9×1.0～1.5微米，橢圓到柱狀，位于菌體中央或稍偏，芽孢形成后菌體不膨大。菌落表面粗糙不透明，污白色或微黃色，在液體培養(yǎng)基中生長(zhǎng)時(shí)，常形成皺醭。由于枯草芽孢桿菌是需氧菌在水質(zhì)凈化[2]、工業(yè)發(fā)酵中發(fā)揮著重要的作用，人們開(kāi)始致力于研究枯草芽孢桿菌應(yīng)用于這些方面的研究。關(guān)于枯草芽孢桿菌的研究與應(yīng)用已有100多年的歷史，早期大部分工作集中在形態(tài)觀察、分類(lèi)鑒定、生理機(jī)制、功能發(fā)掘及防治等方面。近年來(lái)，對(duì)枯草芽孢桿菌的研究漸進(jìn)到遺傳學(xué)與分子生物學(xué)領(lǐng)域，研究?jī)?nèi)容體現(xiàn)在特定功能基因的尋找并克隆到需要的物種中或者通過(guò)誘變、基因工程等手段對(duì)枯草芽孢桿菌

6、生產(chǎn)菌進(jìn)行遺傳改造等。但目前對(duì)該菌種的研究仍然處于實(shí)驗(yàn)室的初始階段的水平。但是枯草研報(bào)桿菌有一系列的優(yōu)良性狀吸引這一些的科學(xué)家的目光，他們相信隨著經(jīng)濟(jì)的發(fā)展，枯草芽抱桿菌資源對(duì)在工、農(nóng)、醫(yī)等方面有重大應(yīng)用價(jià)值，開(kāi)發(fā)利用更具有重要意義?？莶菅挎邨U菌是一類(lèi)廣泛分布于各種不同生活環(huán)境中的革蘭氏陽(yáng)性桿狀好養(yǎng)型細(xì)菌，可以產(chǎn)生內(nèi)生芽孢，耐熱抗逆性強(qiáng)[3]，在土壤和植物的表面普遍存在，同時(shí)還是植物體內(nèi)常見(jiàn)的一種內(nèi)生菌，對(duì)人畜無(wú)毒無(wú)害，不污染環(huán)境。由于枯草芽孢桿菌生長(zhǎng)速度快，營(yíng)養(yǎng)需求簡(jiǎn)單，易于存活，定殖與繁殖，無(wú)致病性，并可以分泌多種酶和抗生素[4,5]，而且還具有良好的發(fā)酵基礎(chǔ)，用途十分廣泛，國(guó)內(nèi)外有

7、眾多研究單位和學(xué)者對(duì)此菌進(jìn)行了大量研究，也積累了豐富的研究資料。通過(guò)對(duì)枯草芽孢桿菌系列的研究，一方積累枯草芽孢桿菌規(guī)律信息為以后開(kāi)發(fā)提供依據(jù)；另一方面也可了解芽孢桿菌與生態(tài)環(huán)境間的相互關(guān)系，為芽孢桿菌資源的利用奠定基礎(chǔ)[6]?，F(xiàn)在對(duì)于枯草芽孢桿菌的主要運(yùn)用方面：（1）在水產(chǎn)養(yǎng)殖中的應(yīng)用18隨著水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)的迅猛發(fā)展和集約化經(jīng)營(yíng)程度的不斷提高，養(yǎng)殖水體污染日趨嚴(yán)重，許多養(yǎng)殖池中有害藻類(lèi)及病菌大量繁殖，水質(zhì)條件不斷惡化，其后果影響到了水產(chǎn)