紫蘇提取物抗氧化活性及酚性成分的研究論文

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1、紫蘇提取物抗氧化活性及酚性成分的研究論文馮蓉潔，呂佩惠，盛振華，吳巧鳳【摘要】目的研究紫蘇體外抗氧化活性。方法在測定紫蘇各酚性成分含量基礎(chǔ)上，采用體外抗氧化實驗，研究其DPPH清除能力、總還原力和抗脂質(zhì)體氧化能力。結(jié)果75%乙醇和50%丙酮提取物具有良好的抗氧化活性；紫蘇提取物中總黃酮、原花色素含量與其抗氧化能力之間呈正相關(guān)。結(jié)論紫蘇有顯著的抗氧化活性，呈一定的量-效關(guān)系。其抗氧化活性可能與黃酮類化合物有關(guān)。紫蘇提取物可作為一種良好的天然抗氧化劑應(yīng)用于臨床。【關(guān)鍵詞】紫蘇總黃酮原花色素抗氧化活性紫蘇為唇形科紫蘇屬Perillafrutescen

2、s(L.)Britt.一年生草本植物，是傳統(tǒng)的藥食兩用中藥.freela公司。其他試劑均為分析純。2方法與結(jié)果2.1供試品溶液的制備取5g紫蘇藥材粉末，分別按表1加入20倍量提取溶劑，70℃水浴提取2次，1h/次，合并濾液，濃縮至干，臨用前配成所需濃度，作為供試品溶液。2.2紫蘇酚性物質(zhì)的含量測定［4～6］采用FeCl3-K3Fe()6比色法，以沒食子酸為標樣制作標準曲線，測定紫蘇中總酚酸含量；采用香草醛/硫酸比色法，以兒茶素為標樣制作標準曲線，測定其原花色素含量；采用堿式鋁鹽比色法，以蘆丁為標樣制作標準曲線，測定其總黃酮含量。2.3抗氧化活性

3、實驗［7～9］2.3.1清除自由基活力取提取物適量，加入25μg/ml的DPPH甲醇溶液3.5ml，快速混勻，30min后測定在516nm處的吸光度。計算DPPH清除率：清除率(%)=（1-［DPPH］t/［DPPH］t=0）×100%。其中［DPPH］t表示30min時體系的吸光度；［DPPH］t=0表示0時刻體系的吸光度。2.3.2還原力測定取提取物適量，加入磷酸緩沖液（0.2mol/L，pH6.6）2.5ml及1%鐵氰化鉀溶液1.5ml，50℃保溫20min后，加入10%三氯乙酸1.5ml，混勻后取2.5ml，加入蒸餾水2.5ml及0.1

4、%三氯化鐵0.3ml。在700nm處測定反應(yīng)液吸光度值。吸光度值越大，表示還原力越強。2.3.3脂質(zhì)體氧化法將大豆卵磷脂分散于去離子水中，20kHz超聲波處理30min，周圍以冰水冷卻，制得大豆磷脂濃度為0.8%的人工脂質(zhì)體。取20ml脂質(zhì)體，加入提取物，以10mmol乙酸銅20μl催化氧化反應(yīng)，混勻后放置于回轉(zhuǎn)式恒溫水浴振蕩器上，于暗處37℃、100r/min進行開口氧化實驗，每隔一定時間測定共軛二烯氫過氧化物及丙二醛生成量。共軛二烯氫過氧化物(CD)的測定：取1ml氧化液，溶于3ml甲醇，于234nm處測定其吸光度，以摩爾消光系數(shù)ε=260

5、00L·mol-1·cm-1計算脂質(zhì)體體系中共軛二烯氫過氧化物的生成量（mmol/kg卵磷脂）。丙二醛（MDA）的測定：取1.5ml氧化液，加入1mlMDA溶液，測定在532nm處的吸光度，以摩爾消光系數(shù)ε=1.56×105L·mol-1·cm-1計算丙二醛的生成量（mmol/kg卵磷脂）?？寡趸Ч靡种坡时硎荆阂种坡?%)=（1-處理氧化產(chǎn)物生成量/空白氧化產(chǎn)物生成量）×100%結(jié)果見表1及圖1～4。表1紫蘇酚性物質(zhì)組成及抗氧化作用結(jié)果（略）圖1紫蘇提取物的還原力圖2紫蘇提取物對DPPH的清除作用（略）圖3丙二醛的生成（略）由表1和圖1～4

6、可知，紫蘇各提取物均具有較強的抗氧化活性，可提高自由基的清除率，促進Fe3+的還原和抑制卵磷脂氧化產(chǎn)物的生成。其中，75%乙醇提取物自由基的清除率最強，50%丙酮提取物的還原力最強，兩者均可顯著抑制自由基的產(chǎn)生，延長CD生成的峰值時間，減少同期各時段MDA的生成量。圖4共軛二烯氫過氧化物的生成（略）2.4酚性物質(zhì)組成與抗氧化活性相關(guān)性分析以原花色素(X1)、總黃酮(X2)和總酚酸(X3)含量為橫坐標，還原力(Y)為縱坐標，采用SPSS11.5軟件對表1結(jié)果進行線性關(guān)系考察，得方差分析結(jié)果(見表2)和回歸標準殘差正態(tài)P-P圖（圖5）。表2方差分析

7、表（略）由表2和圖5可知，P0.01，自變量(Xn)與因變量(Y)服從正態(tài)分布，證明紫蘇各酚性物質(zhì)含量與還原力之間存在顯著的線性關(guān)系。進而作多元線性回歸分析，得回歸系數(shù)分析。結(jié)果見表3。圖5回歸標準殘差正態(tài)P-P圖（略）表3回歸系數(shù)分析（略）由表3可知，紫蘇酚性物質(zhì)含量對還原力的總體回歸方程為：Y=0.160-0.534X1+0.02492X2+0.01829X3。為消除度量單位的影響，進一步采用標準化計算，得標準化回歸方程：Y=-0.491X1+0.468X2+0.056X3。在95%可信區(qū)間內(nèi)，線性相關(guān)系數(shù)r=0.9828。證明回歸方程真實

8、、可靠，具有統(tǒng)計學(xué)意義。可用于替代實驗點對實驗結(jié)果進行分析，并對回歸方程各項作顯著性檢驗。其中，總酚酸含量對還原力的影響P0.05，無顯著性差異。而原