芒萁皂苷的提取分離純化及其生物活性概述

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1、芒萁皂苷的提取分離純化及其生物活性概述第一章緒論1.1蕨類植物的研究現(xiàn)狀蕨類植物有廣泛的應(yīng)用價(jià)值,近年來國內(nèi)外學(xué)者對(duì)蕨類植物主要進(jìn)行了以下幾個(gè)方面的分析研究一是蕨類植物含有多種生物活性物質(zhì),如黃酮類、留類、生物堿、m類、三蔽類化合物等,作為名貴的中草藥自古以來就受到醫(yī)學(xué)界的重視。許多蕨類植物已經(jīng)被證實(shí)對(duì)多種疾病具備顯著療效,具有極大的開發(fā)潛力。蕨類植物中,有許多種類自古以來就被廣泛用于醫(yī)藥上,為人們治療各種疾病,如杉蔓石松能祛風(fēng)濕、舒筋活血;節(jié)節(jié)草能治化膿性骨髓炎,烏蕨可治菌痢、急性腸炎;長柄石韋可治急、慢性腎炎、腎盂腎炎等;綿馬鱗毛蕨和其許多近親種可

2、治牛羊的肝輕病等,生長在林下草地和林間灌叢的草問荊全草可人藥,對(duì)治療小便不利、熱淋、咳嗽氣喘等病有特效;喜生于石質(zhì)山坡的旱生蕨類中華卷柏,全草具有涼血、止血功能,常用于治療略血、尿血等病癥;生長在北方疏林下石松科的地刷子,全草和孢子都可藥用,有祛風(fēng)、活絡(luò)之效。由此可見,蕨類植物的藥用具有非常高的開發(fā)價(jià)值;二是在食用價(jià)值方面,我國的鮮蕨菜、藻菜都是珍貴的食材,常年大量出口美國、日本,不僅豐富了我們的餐桌,還給我們帶來一定的經(jīng)濟(jì)利益。.1.2芒萁的研究現(xiàn)狀芒萁(Dicranopterisdichotoma),水龍骨目里白科芒萁屬蕨類植物,又名鐵狼其,廣泛分

3、布于中國長江以南各省區(qū)、朝鮮南部及日本。芒萁是多年生草本,高30-60cm,喜陽、耐酸、耐旱、耐貧瘠,在濕潤、肥沃的土壤條件下生長茂盛,常自成群落,形成平整稠密的地被。芒萁屬植物生于強(qiáng)酸性的紅壤丘陵或馬尾松林下,是一種酸性土壤指示劑。芒萁性涼,味微苦淫,具有化瘀止血,清熱解毒利尿,潤肺止咳等功效。近年來關(guān)于芒萁的化感作用研究的很多芒萁提取物的生物活性也不斷被人類發(fā)現(xiàn),其活性成分主要有三蔽類阜苷、黃酮類、生物堿類、留體及酷類等。物競天擇,適者生存。芒萁具有很強(qiáng)的物種競爭能力,可以形成純植叢,導(dǎo)致其它雜草不能入侵;而且芒其還作為先鋒植物群落取代了雜草,在丘

4、陵棄耕地的演替過程中利于不敗之地。在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中常見農(nóng)民用芒萁覆蓋菜圃、旱田,目的就是防雜草和保墑?;谏鲜霈F(xiàn)象,很多學(xué)者開始對(duì)芒其對(duì)雜草及農(nóng)作物的生化他感作用及其機(jī)理產(chǎn)生濃厚的興趣。目前對(duì)芒萁研究的較多的就是其化感作用,一些研究表明芒萁水提液對(duì)稗草等農(nóng)作物雜草和白菜、蘿卜的種子的萌發(fā)有顯著的抑制作用,對(duì)其幼苗的根的生長和多數(shù)供試幼苗的苗高均有顯著抑制作用袁宜如等研究了不同濃度梯度的芒萁水提取物對(duì)玉米種子萌發(fā)和幼苗生長的影響,結(jié)果表明,一定濃度芒萁水提液可降低萌發(fā)玉米種子淀粉酶活性及可溶性糖含量,且水提液溶度越高,抑制作用越明顯;對(duì)于玉米幼苗生長則表現(xiàn)出

5、高濃度抑制,低濃度促進(jìn)的效應(yīng)。周禮勝等研究發(fā)現(xiàn),芒其化感物質(zhì)通過抑制SOD、POD和CAT的酶活性,影響受體植物活性氧代謝,導(dǎo)致植物膜的完整性受損,從而使受體植物幼苗生長受抑。近年來關(guān)于芒萁對(duì)富集金屬元素、稀土元素、放射性核素等無機(jī)污染物的研究也比較多,研究發(fā)現(xiàn),不同的元素在根、蓮、葉等營養(yǎng)器官中的分布規(guī)律不同,以輕、中稀土元素為主[21]。第二章芒萁皇苦的提取工藝研究2.1材料與儀器材料:芒萁(由廣東藥學(xué)院鑒定)釆自廣州大學(xué)城,洗凈,烘干,粉碎,粉末過40目數(shù)的篩,備用;高氯酸、香草醛、無水乙醇、冰醋酸均為國產(chǎn)分析純。人參阜苦標(biāo)準(zhǔn)品Rgl(HPLC&

6、gt;98%):廣州市奇云生物科技有限公司。2.1.2實(shí)驗(yàn)儀器HZ-HS-100S電子天平(福州衡之展電子有限公司),CLF-10C500克密封型搖擺式粉碎機(jī)(浙江省溫嶺市創(chuàng)力藥材器械廠),HHSZ1-6-S電熱恒溫水浴鍋(上海博泰實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司),JY92-IIN超聲波細(xì)胞粉碎機(jī)(寧波新芝生物科技股份有限公司),XT-9900型微波消解儀(北京金恒祥儀器有限公司),旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀(上海亞榮生物儀器有限公司),SHZ2D(III)型循環(huán)水式真空栗(鞏義市英峪予華儀器廠),DHG-9053A電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱(南京天利制藥設(shè)備有限公司),722型可見分光光

7、度計(jì)(上海光譜儀器有限公司)。..2.2實(shí)驗(yàn)方法人參阜苷Rgl標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作:香草酸一冰醋酸顯色法。將人參阜苷Rgl標(biāo)準(zhǔn)品干燥至恒重后,精密稱取5mg于5mL量瓶中,加甲醇定容至刻度。精密量取0,40,80,120,160,200,240,280,320nL置于lOmL的具塞試管中,放在水浴中揮干溶劑,各加入新配制的5%的香草醛冰醋酸溶液0.2mL,高氯酸0.8mL于6(rC水浴恒溫15min后?置于冰水中冷卻5min,加人冰醋酸5mL搖勾,放置lOmin,以試劑空白作參比于545nm處測定吸光度,以吸光度(A)為橫坐標(biāo),以對(duì)照品溶液加人的體積數(shù)(L)

8、為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,得回歸方程。每個(gè)濃度平行測定3次,以吸光值3次平均值和人參阜苷Rgl含量

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