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《結(jié)腸康泰對(duì)結(jié)腸炎大鼠結(jié)腸黏膜 egfr 及 pcna 表達(dá)的影響論文》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線(xiàn)閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫(kù)。
1、結(jié)腸康泰對(duì)結(jié)腸炎大鼠結(jié)腸黏膜EGFR及PCNA表達(dá)的影響論文張永鋒劉映芳張趙潔譚永港楊敏丁民【摘要】目的：觀察結(jié)腸康泰對(duì)結(jié)腸炎大鼠結(jié)腸黏膜EGFR及PA表達(dá)的影響，從結(jié)腸黏膜修復(fù)角度探討結(jié)腸康泰的藥效機(jī)制。方法：雌性SD大鼠60只，隨機(jī)分為4組，分別為正常對(duì)照、模型、柳氮磺胺吡啶（SASP）及結(jié)腸康泰組，以5%2，4，6-三硝基苯磺酸（TNBs）誘導(dǎo)大鼠形成結(jié)腸炎癥，免疫組化法觀察EGFR及PA的表達(dá)。結(jié)果：結(jié)腸康泰組大鼠結(jié)腸黏膜EGFR及PA高表達(dá).freelucosaincolitisratsandexplorethepharmacologicalmechanismsofrecov
2、eryofcolonicmucosaaleSDratslydividedintofourgroups,namelynormalcontrol,pathological,solfasalazine(SASP)andJCKTgroups.Experimentalcolitismodelinratsmunohistochemistry.ResultsTheexpressionofEGFRandPAinJCKTgroupaybeoneofmechanismsofrecoveryofcolonicmucosaalgroalgroalgroin，濾出頭煎，藥渣加蒸餾水適量，再煮沸30min，濾出二
3、煎，合并2次濾液，濃縮成200%置冰箱。柳氮磺胺吡啶（SASP），上海三維制藥有限公司提供，碾磨成粉，配成濃度為40mg/mL的混懸液；5%2，4，6-三硝基苯磺酸（TNBs）購(gòu)自Sigma公司；即用型鼠抗EGFR、PA抗體，福州邁新生物技術(shù)開(kāi)發(fā)有限公司提供；即用型SABC免疫組化染色試劑盒等購(gòu)于武漢博士德生物工程有限公司。1.2實(shí)驗(yàn)過(guò)程1.2.1造模方法2除正常組外，其余各組大鼠造模前禁食不禁水48h，禁食24h后提起鼠尾將其懸空，使掙扎以排出大腸遠(yuǎn)端的大便，共2次，每次相隔6h以上，以氯氨酮（0.2mL/100g）腹腔注射麻醉大鼠，用外徑為2mm的硅膠管插入鼠肛內(nèi)約8cm，經(jīng)管內(nèi)注
4、入5%2，4，6-TNBs0.4mL（100mg/kg）+50%乙醇0.25mL，約10s灌注完畢。1.2.2動(dòng)物給藥正常及模型組：每只每日給生理鹽水2mL；SASP組：SASP劑量為0.8g·kg-1·d-1；結(jié)腸康泰組：結(jié)腸康泰劑量為20g·kg-1·d-1，從造模后第1天開(kāi)始，按以上劑量給大鼠每天灌胃1次，連續(xù)14d。1.2.3標(biāo)本的采集和處理至第15天，各組大鼠禁食8h后，用頸椎脫臼法處死大鼠，剖腹，取肛門(mén)至回盲部的結(jié)腸，沿腸系膜邊緣縱形剖開(kāi)，每只動(dòng)物在遠(yuǎn)端結(jié)腸、橫結(jié)腸和升結(jié)腸處至少各取1塊組織標(biāo)本（2mm×10mm），另于有炎癥或潰瘍處至少取1塊組織標(biāo)本，常規(guī)石蠟包埋、切片。
5、1.3觀察指標(biāo)與方法免疫組化ABC法檢測(cè)EGFR、PA表達(dá)，根據(jù)試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作。以PBS替代一抗體作為空白對(duì)照，已知陽(yáng)性切片作為陽(yáng)性對(duì)照。1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)處理所有數(shù)據(jù)經(jīng)SPSS10.0統(tǒng)計(jì)軟件處理，各組資料用x±s表示，采用非參數(shù)統(tǒng)計(jì)方法matoryboweldisease,IBD）包括潰瘍性結(jié)腸炎和克羅恩氏病，在IBD和實(shí)驗(yàn)性結(jié)腸炎中存在著免疫調(diào)節(jié)的缺陷，包括腸黏膜失去對(duì)腸腔的保護(hù)能力或是對(duì)腸黏膜損傷后的不適當(dāng)修復(fù)，近年來(lái)研究發(fā)現(xiàn)，在結(jié)腸炎患者黏膜中EGF受體免疫活性明顯增加，因而提示EGF在結(jié)腸黏膜的修復(fù)及防御功能中起重要作用4。已證明5，EGF的生物學(xué)效應(yīng)是通過(guò)與細(xì)胞膜上的EG
6、F受體結(jié)合而發(fā)揮作用的，EGF與IBD的發(fā)病與治療密切相關(guān)，EGF通過(guò)激活受體控制腸細(xì)胞的增生，目前認(rèn)為正常成人胃腸道黏膜EGF受體僅存在于黏膜細(xì)胞基底側(cè)面一面，急性黏膜損傷往往是EGF受體的增加，而慢性黏膜損傷會(huì)產(chǎn)生一個(gè)明顯的細(xì)胞譜系產(chǎn)生EGF。增殖細(xì)胞核抗原（PA）是DNA多聚酶δ的輔基，其量的變化與DNA合成一致，在細(xì)胞增殖和DNA合成過(guò)程起重要作用，能直接反映細(xì)胞增殖狀態(tài)，免疫組化標(biāo)記增生期細(xì)胞核染色陽(yáng)性，可作為細(xì)胞增殖活性的可靠標(biāo)記物，其表達(dá)上調(diào)或下調(diào)提示細(xì)胞增殖水平的上升或下降。潰瘍性結(jié)腸炎屬中醫(yī)的“泄瀉”、“久痢”、“便血”等范疇，病機(jī)以脾氣虛弱、濕熱內(nèi)阻、氣滯血瘀為主，
7、后期可見(jiàn)脾腎兩虛，氣滯血瘀貫穿于整個(gè)病程中。結(jié)腸康泰以健脾益氣、清熱祛濕、涼血活血為治法，虛實(shí)兼顧，切中病機(jī)，標(biāo)本兼治。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：結(jié)腸康泰上調(diào)結(jié)腸炎大鼠結(jié)腸黏膜EGFR的表達(dá)，黏膜細(xì)胞增殖增加，是其修復(fù)結(jié)腸黏膜損傷的愈合機(jī)制之一。【
