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1、黃芩苷元對小鼠四氯化碳肝損傷的保護(hù)作用論文劉建新，謝水祥，周俐，汪秀榮，楊慶春，張文平【摘要】目的探討黃芩苷元對小鼠CCl4肝損傷的保護(hù)作用。方法采用CCl4小鼠急性肝損傷模型，測定血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT）、谷草轉(zhuǎn)氨酶（AST）活性、肝組織MDA含量，并觀察肝組織病理變化。結(jié)果黃芩苷元能保護(hù)CCl4所致小鼠肝損傷.freelice.MethodsTheexperimentalmodelofliverinjuryice.Theserumalanineaminotransferase(ALT),aspartateaminot
2、ransferase(AST)andlivermalondialdehyde(MDA)ined.Thepathologicalexaminationoflivered.ResultsBaicaleinsignificantlyreducedserumALT,ASTactivitiesandliverMDAcontent,andtheliverlobuleelioratedobviously.ConclusionBaicaleinhasaprotectiveeffectonacutehepaticinjuryinduced
3、byCCl4.Keyl/kg；BaiⅠ組小鼠腹腔注射Bai50mg/kg；BaiⅡ組小鼠腹腔注射Bai100mg/kg。1次/d，連續(xù)15d。末次給藥后2h，正常組腹腔注射容量花生油，其余各組均腹腔注射0.1%CCl4花生油溶液10ml/kg一次。禁食，自由飲水，16h后各組小鼠斷頭取血。以16000r/min離心5min，取血清，采用400型全自動生化分析儀測定ALT，AST活性；采用分光光度法測定MDA，MDA含量測定采用硫代巴比妥酸法。取適量肝組織用冰冷生理鹽水沖洗，置冰浴中勻化制得10%肝勻漿，以4000r/mi
4、n離心10min，取上清液測定MDA，蛋白定量采用考馬斯亮蘭法,以牛血清白蛋白為標(biāo)準(zhǔn),具體步驟均按各試劑盒說明書操作。另取各鼠相同部位的肝臟用10%福爾馬林溶液固定，采用常規(guī)石蠟切片，HE染色，光鏡下觀察肝細(xì)胞變性壞死程度。統(tǒng)計(jì)方法使用SPSS11.0統(tǒng)計(jì)軟件包，所有數(shù)據(jù)用±s表示，計(jì)量資料采用方差分析的PostHoc檢驗(yàn)，P＜0.05為差異有顯著性。3結(jié)果3.1Bai對CCl4肝損傷小鼠ALT，AST活性的影響如表1所示，Bai高、低劑量組可顯著性抑制CCl4所致的ALT，AST的升高，低劑量組雖沒有顯著性抑制CCl4
5、所致的ALT，AST的升高，但均有抑制CCl4所致肝損傷的趨勢。3.2Bai對CCl4肝損傷小鼠肝臟MDA含量的影響如表2所示，Bai高、低劑量組可明顯降低CCl4肝損傷小鼠肝臟MDA含量，且呈劑量相關(guān)性。見表2。表1Bai對CCl4所致肝損傷小鼠血清ALT，AST活性的影響(略)表2Bai對CCl4肝損傷小鼠肝臟MDA含量的影響(略)3.3Bai對CCl4肝損傷小鼠肝組織病理學(xué)的影響CCl4肝損傷造模組肝組織明顯損傷，肝細(xì)胞濁腫、氣球樣變性，病變以肝小葉中央靜脈周圍為重。肝小葉內(nèi)可見輕度、中度肝細(xì)胞點(diǎn)狀、碎片狀壞死；壞
6、死區(qū)內(nèi)有中、重度淋巴細(xì)胞和漿細(xì)胞浸潤，匯管區(qū)內(nèi)有單核細(xì)胞浸潤。在各給藥組中，Bai低、高劑量組也有不同程度的肝細(xì)胞破壞、炎性細(xì)胞浸潤等肝損傷病變，但與模型組比較損傷程度明顯減輕，尤其是高劑量組表現(xiàn)更為明顯。4討論肝臟是外源性過氧化物在體內(nèi)轉(zhuǎn)化與排泄的主要場所，肝內(nèi)經(jīng)氧化還原后產(chǎn)生多種自由基，后者可引起組織過氧化損傷。近年來，對有毒基團(tuán)在肝損傷中的作用十分重視，據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道，有毒氧基在肝細(xì)胞損傷過程中發(fā)揮著重要作用［6］。CCl4可引起化學(xué)性肝臟損傷，用CCl4誘導(dǎo)小鼠肝損傷，其致毒機(jī)制［7］是CCl4經(jīng)肝微粒體細(xì)胞色素P4
7、50代謝生成自由基（CCl3-），攻擊肝細(xì)胞膜上磷脂分子引起脂質(zhì)過氧化，或與肝微粒體脂質(zhì)和蛋白質(zhì)發(fā)生共價結(jié)合，破壞肝細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)和功能的完整。ALT為可溶性酶主要分布在細(xì)胞漿內(nèi)，而AST有80%分布在線粒體內(nèi)，其余分布在細(xì)胞漿內(nèi)。當(dāng)肝細(xì)胞破壞、細(xì)胞通透性增高及線粒體損傷時，ALT，AST活性增高，并且ALT、AST活性的高低變化與肝細(xì)胞受損的程度相一致。有研究表明在輕型中毒性急性肝損傷時，血清酶活性ALT升高最為明顯，在重型肝損傷時，肝細(xì)胞受到嚴(yán)重?fù)p傷，血清中AST升高的程度可超過ALT。因此，血清中的ALT，AST是用于
8、診斷肝實(shí)質(zhì)損害的主要酶類。本實(shí)驗(yàn)經(jīng)CCl4處理后小鼠血清ALT、AST均顯著升高，表明此時小鼠肝細(xì)胞已經(jīng)損傷，模型復(fù)制成功。本研究證明用Bai治療的小鼠血清ALT、AST較模型組顯著性降低，且呈劑量相關(guān)性，同時能明顯改善肝臟組織結(jié)構(gòu)的病理損害，提示Bai對化學(xué)性肝損害具有一定的保護(hù)作用。肝臟脂質(zhì)過氧化的程度可通過測定
