不同免疫佐劑對(duì)丙肝核酸疫苗效果的論文

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1、不同免疫佐劑對(duì)丙肝核酸疫苗效果的論文【摘要】目的：觀察不同佐劑對(duì)hcvdna疫苗效果的影響。方法：雌性balb/c小鼠分別用脂質(zhì)體ddab/epc和dcchol/dope、montanideisa720和氫氧化鋁為佐劑的hcvdna疫苗免疫3次，elispot法觀察脾淋巴細(xì)胞受hcv核心、e2、e1/e2、ns3和ns5b蛋白刺激后細(xì)胞因子的產(chǎn)生。結(jié)果：ddab/epc組產(chǎn)生ifnγ較多，在大部分情況下，顯著高于其它組。該組il2的產(chǎn)生也顯著高于其它4組。該組il4的產(chǎn)生，在某些情況下也高于其它組。用ns5b刺激，氫氧化鋁組il4的產(chǎn)生顯著高于其它4組(p<0.05)

2、。裸dna和兩種脂質(zhì)體組ifnγ的產(chǎn)生高于il4，而montanide和氫氧化鋁組il4的產(chǎn)生高于ifnγ。結(jié)論：在4種佐劑中，ddab/epc效果最好，montanide和氫氧化鋁可將dna疫苗th1為主的免疫特性轉(zhuǎn)換為以th2為主?！娟P(guān)鍵詞】核酸疫苗丙型肝炎病毒免疫佐劑　　immunologicaleffectsofdifferentadjuvantsonhcvdnavaccine　　jinbo,richardyanhuiesentofdigestivediseases,navalgeneralhospital,beijing100037,china　?。踑bstract

3、］objective:theimmunologicaleffectsofhcvdnavaccineice.methods:femalebalb/cmiceededdab/epcordcchol/dope,hcvdnamixedontanideisa720oraluminumhydroxide,respectively,andboostedtostcases,splenocytesfrommicevaccinatedeproducedmoreifnγ.thesesplenocytesalsohavesignificanthigheril2productionparedalumgr

4、ouphavesignificanceinil4productionparededil4innakeddna,ddab/epc,anddcchol/dopegroupsountedifnγinalumandmontanidegroups.conclusion:encapsulationeddab/epchasthestrongestadjuvanteffectininducingth1dominatedimmunity.alumandmontanidecanconverttheth1natureofdnavaccinetoth2biasedimmunity.　?。踜eymuno

5、logicadjuvants　　丙型肝炎病毒(hepatitiscvirus,hcv)感染是一個(gè)嚴(yán)重的全球性健康問題。.cOm據(jù)世界衛(wèi)生組織在1999年的調(diào)查結(jié)果表明，全世界有大約一億七千萬人感染丙型肝炎病毒，占全世界人口總數(shù)的3%［1］?！　≡诒透窝撞《靖腥竞螅m然機(jī)體可以產(chǎn)生很強(qiáng)的體液免疫反應(yīng)，但仍有75%～85%的急性丙型肝炎病毒感染者不能清除病毒而成為慢性感染者。抗hcv的中和抗體雖然在一定情況下有助于病毒的清除,但由于丙型肝炎病毒在患者體內(nèi)可以不斷發(fā)生演變，從而產(chǎn)生對(duì)中和性抗體有抗性的突變株?！　∫虼?雖然有hcv的中和抗體存在，但細(xì)胞免疫反應(yīng)在防止和清除hcv感染過程中顯

6、得更為重要。因此，誘導(dǎo)產(chǎn)生針對(duì)hcv的特異性細(xì)胞免疫反應(yīng)就不可避免地成為hcv疫苗研究的重點(diǎn)［2］。　　dna疫苗可誘導(dǎo)以i型輔助性t細(xì)胞(thelpercelltypeⅰ,th1)介導(dǎo)的細(xì)胞免疫。為觀察不同類型免疫佐劑對(duì)hcvdna疫苗免疫效果的影響，我們比較了小鼠接種幾種不同佐劑輔佐的hcvdna疫苗后免疫反應(yīng)的改變?！　?材料與方法　　1.1hcvdna重組質(zhì)粒的構(gòu)建將hcv1a型h株核心、e1、e2蛋白基因(1～746位氨基酸，核酸342～2579)插入pvax1質(zhì)粒(美國invitrogencorp.)bamhⅰ限制酶切點(diǎn)，轉(zhuǎn)化大腸桿菌增殖，用endofreeplasmi

7、dgigakit(美國qiagen)純化。將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染chok1細(xì)胞，裂解細(xì)胞做hⅰ位點(diǎn)，轉(zhuǎn)化大腸桿菌dh5αf’iq，acia)ncoⅰ位點(diǎn)，轉(zhuǎn)化dh5α株大腸桿菌表達(dá)，聚丙烯酰胺凝膠電泳純化(分子量18000)?！　?.2.3hcve1/e2重組蛋白用bactobacbaculovirusexpressionsystems(美國invitrogen)。hcv核心、e1和e2基因(1～746位氨基酸，核酸342～2579