紅車軸草最佳采收期的研究.doc

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1、紅車軸草最佳采收期的研究作者：陳封政，李書華，王雄清【摘要】目的為確定紅車軸草最佳采收期提供依據(jù)。方法采用紫外分光光度法測(cè)定紅車軸草不同采收期異黃酮的含量，同時(shí)計(jì)算各個(gè)生長(zhǎng)期的產(chǎn)量。結(jié)果紅車軸草在現(xiàn)蕾期和初花期的異黃酮含量較高，分別為1.80%和1.79%。結(jié)論建議紅車軸草在初花期時(shí)采收?！娟P(guān)鍵詞】紅車軸草；采收期；異黃酮　　Abstract：ObjectiveToidentifytheoptimalharvesttimeformaximalcontentsofisoflavonesinTrifoliumPratense.MethodsUltraviol

2、etspectrophotometrywasusedtodeterminethecontentsofisoflavonesinTrifoliumpratense.ResultsThecontentsofisoflavonesinTrifoliumpratensewerethehighestintheinitialfloweringstageandthebuddingstage.ConclusionTrifoliumPratenseshouldbeharvestintheinitialfloweringstage.　　Keywords：Trifoliump

3、ratense;Collectingtime;Isoflavone紅車軸草TrifoliumPratenseL.為豆科多年生草本植物，又名紅三葉、紅菽草、三葉草等，現(xiàn)在我國(guó)已進(jìn)行大面積栽培。文獻(xiàn)報(bào)道其提取物具有抗腫瘤，治療胃潰瘍、胃癌、乳腺癌和骨質(zhì)疏松癥等作用［1］，其主要活性成分為異黃酮類化合物，如大豆素、染料木素和鷹嘴豆芽素等［1，2］，這些異黃酮化合物具有植物雌激素樣作用，能夠雙向調(diào)節(jié)人體內(nèi)的激素水平，當(dāng)人體雌激素水平不足時(shí)，它與人體雌激素受體結(jié)合，產(chǎn)生弱雌激素作用，以彌補(bǔ)人體自身雌激素的不足；當(dāng)人體雌激素水平過(guò)高時(shí)，它與人體雌激素受體結(jié)合，從而阻

4、止人體自身所分泌的雌激素與受體結(jié)合，達(dá)到降低人體雌激素水平的目的，因而對(duì)婦女有關(guān)體內(nèi)激素方面的疾病具有預(yù)防、保健和醫(yī)療作用［3］，其提取物廣泛用作保健食品或功能食品的原料，因而倍受人們關(guān)注。但目前尚未見(jiàn)到紅車軸草最佳采收期的研究。為此，我們以有效成分異黃酮為目標(biāo)，結(jié)合不同生長(zhǎng)期植株的產(chǎn)量，研究了紅車軸草不同采收期的含量和植株產(chǎn)量，為其確定合理采收期提供科學(xué)依據(jù)。　　1材料紅車軸草TrifoliumPratenseL.采自樂(lè)山師范學(xué)院生物基地不同生長(zhǎng)時(shí)期（分蘗期、現(xiàn)蕾期、初花期、花后期）的植物地上部分；鷹嘴豆芽素對(duì)照品（含量≥98%），購(gòu)自Sigma公司；

5、UV762紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)（上海精密科學(xué)儀器有限公司）；電子天平（FC204，上海精科實(shí)業(yè)有限公司）；恒溫水浴鍋（H·H·S2136C，上海醫(yī)療器械五廠）；植物粉碎機(jī)（FZ102，天津市泰斯特儀器有限公司）；試劑均為分析純?！　?方法與結(jié)果　　2.1紅車軸草的前處理采收不同生長(zhǎng)期的紅車軸草植物地上部分，除去泥沙和雜草，60℃鼓風(fēng)干燥5h，粉碎。　　2.2測(cè)定波長(zhǎng)的選擇將鷹嘴豆素對(duì)照品、紅車軸草異黃酮提取液配成適當(dāng)濃度，在200～400nm波長(zhǎng)范圍內(nèi)進(jìn)行光譜掃描，二者吸收曲線類似，均在258.5nm處有最大吸收，故選擇285.5nm為測(cè)定波長(zhǎng)。　　2

6、.3對(duì)照品溶液的制備精密稱取干燥至恒重的鷹嘴豆芽素對(duì)照品4.0mg，置于50ml容量瓶中，加入95%的乙醇溶解，并定容至刻度，搖勻，即可。　　2.4標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備精密吸取0.3，0.6，0.9，1.2，1.8，2.4ml標(biāo)準(zhǔn)液，分別置于10ml容量瓶中，各自加入95%的乙醇1ml，加蒸餾水定容，搖勻，在波長(zhǎng)258.5nm處測(cè)定吸收值。得回歸方程為：C=0.00956A+0.00004，r=0.9993，結(jié)果表明，鷹嘴豆芽素對(duì)照品在2.4～19.2μg/ml范圍內(nèi)，濃度與吸光度線性關(guān)系良好?！　?.5供試品溶液的制備準(zhǔn)確稱取不同采收期的紅車軸草干粉5.00

7、g，置于索氏提取器中，加入95%的乙醇50ml，置于60℃水浴鍋中回流提取1.5h，回流提取2次，合并濾液，即為樣品提取液。精密吸取不同采收期的樣品提取液0.8ml，置于100ml容量瓶中，加入9.2ml95%的乙醇，然后用蒸餾水定容，搖勻，即為供試品溶液?！　?.6樣品含量測(cè)定取不同采收期的供試品溶液，在波長(zhǎng)285.5nm處測(cè)定吸收值。通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線，計(jì)算不同采收期總異黃酮的含量。結(jié)果見(jiàn)表1。表1不同采收期紅車軸草總異黃酮的含量（略）　　2.7穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)初花期供試品溶液于室溫分別放置0，30，60，90，120min后依樣品含量測(cè)定步驟進(jìn)行測(cè)定，RSD=

8、2.22%，表明樣品溶液放置120min穩(wěn)定性好?！　?.8重復(fù)性實(shí)驗(yàn)取初花期供