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1、虎杖濃縮片對(duì)小鼠實(shí)驗(yàn)性肝損傷的保護(hù)作用論文劉丹，湯海峰，張三奇，丁愉，孟瑾，王婧雯【摘要】目的研究虎杖濃縮片對(duì)四氯化碳(CCl4)致小鼠肝損傷的影響。方法虎杖濃縮片連續(xù)給予小鼠7d(2.50，1.25，0.25mg/kg).freelcuspidatumonliverinjuryofmiceinducedbyCCl4.MethodsAfteradministratingconcentratedtabletofPolygonumcuspidatum(2.5mg/kg,1.25mg/kg,0.25mg/kg)for7
2、daysconsecutively,themiceALTandAST,asinedinallgroups.ResultsTheconcentratedtabletofPolygonumcuspidatuminhibitedtheriseofhepaticALT(P＜0.01)andAST(P＜0.01).DegenerationandnecrosisoflivertissuescuspidatummethodhasprotectiveeffectonliverinjuryofmiceinducedbyCCl4.K
3、eycuspidatum;Tablet;Liverinjury;Carbontetrachloride中藥虎杖為蓼科植物虎杖PolygonumcuspidatumSieb.etZucc.的干燥根莖及根，收載于《中國(guó)藥典》2005年版Ⅰ部，具有祛風(fēng)利濕、散瘀定痛、止咳化痰等功效?；⒄戎饕揭蚁╊?lèi)和蒽醌類(lèi)化合物［1］，其中前者主要為白藜蘆醇和白藜蘆醇苷(虎杖苷)，具有降血脂、保肝等多種藥理作用［2］；后者以大黃素、大黃素甲醚為代表，具有抗菌、保肝等功能［3］。臨床上以虎杖為主藥的制劑種類(lèi)繁多，對(duì)虎杖制劑的提取工藝
4、也有較多報(bào)道［4，5］，但多為粗提取液，成分復(fù)雜，制劑體積較大。為減少服用劑量、便于服用和攜帶，作者前期已對(duì)其有效成分進(jìn)行了富集和分離，制備了總有效部位，并且經(jīng)處方優(yōu)化和制備工藝研究制備了總有效部位片劑(虎杖濃縮片，concentratedtabletofPolygonumcuspidatum，CTPC)，現(xiàn)報(bào)道該片劑對(duì)四氯化碳所致小鼠急性肝損傷的保護(hù)作用，為開(kāi)發(fā)廉價(jià)有效的治療化學(xué)性肝損傷制劑提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。1器材1.1藥物虎杖購(gòu)于西安市藥材公司(產(chǎn)地陜西)，經(jīng)第四軍醫(yī)大學(xué)西京醫(yī)院副主任藥師湯海峰鑒定；大黃素和大黃
5、素甲醚對(duì)照品(中國(guó)藥品生物制品檢定所，批號(hào)分別為0756-200110和758-9904)；白藜蘆醇對(duì)照品(Sigma公司，Prod.No.R5010,CASNo.501-36-0)；白藜蘆醇苷對(duì)照品(第四軍醫(yī)大學(xué)化學(xué)教研室自制，經(jīng)面積歸一化測(cè)定純度在99%以上，批號(hào)0503047)；D101大孔樹(shù)脂(西安藍(lán)深交換吸附材料有限公司)；解毒降脂片(四川巴中普瑞制藥有限公司，批準(zhǔn)文號(hào)：國(guó)藥準(zhǔn)字Z51021201，批號(hào)050605，每片重0.58g，相當(dāng)于原生藥2g)。1.2動(dòng)物昆明種小鼠，體重(18±2)g，♀♂各半
6、，由第四軍醫(yī)大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物合格證號(hào)：SCXK(軍)2002-005。1.3試劑ALT試劑盒(批號(hào)060401)、AST試劑盒(批號(hào)060181)，均為中生北控生物科技股份有限公司產(chǎn)品、四氯化碳(天津市化學(xué)試劑二廠，批號(hào)001018)。1.4儀器LC-10ATvp高效液相色譜儀(日本島津)；UV-265紫外分光光度計(jì)(日本島津)；電子分析天平(德國(guó)賽多利斯)；電熱鼓風(fēng)干燥箱(上海華連醫(yī)療器械有限公司)；超聲波清洗器DL-360A(上海之信儀器有限公司)；TGL-16C離心機(jī)(上海安亭科學(xué)儀器廠)，光
7、學(xué)顯微鏡(OLYMPUS,HE20)；生化自動(dòng)分析儀(日本日立7170A型)。2方法2.1虎杖濃縮片的制備虎杖粗粉用5倍量70%乙醇在90℃下加熱回流3次，2h/次，合并提取液，減壓回收乙醇后加水至適宜濃度，即為虎杖粗提液，體積約為原藥材的5～10倍量；粗提液1BV，加入處理好的D101樹(shù)脂柱，吸附流速2.4BV/h，上樣后靜置30min，先用2BV水洗滌，再用20%，50%，70%，95%乙醇各2,5,2,5BV進(jìn)行梯度洗脫，流速2BV/h，合并50%和95%乙醇洗脫液，濃縮，蒸干，即為總有效部位，作為主藥備用
8、；主藥195g，乳糖80g，微晶纖維素100g，羧甲基纖維素鈉20g，分別過(guò)80目篩，混合均勻，加95%乙醇制軟材，16目網(wǎng)制粒，在60℃溫度下干燥，整粒后加入硬脂酸鎂2g，混勻，壓成1000片，即為虎杖濃縮片，每片重0.4g，相當(dāng)于原生藥2g。2.2給藥方法小鼠60只，隨機(jī)分為6組，正常對(duì)照組、造模組、陽(yáng)性對(duì)照組［解毒降脂片給藥折合成生藥2.50g/(kg·d)］、CT
