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《豬水通道蛋白aqp1多克隆抗體制備及其在豬體內(nèi)的免疫定位》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在教育資源-天天文庫。
1、豬水通道蛋白AQP1多克隆抗體制備及其在豬體內(nèi)的免疫定位吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)2011,33(2):218～221,226JournalofJilinAgriculturalUniversityhttp://xuebao.jlau.edu.caE—mail:flndxb@rip.sina.coin豬水通道蛋白AQP1多克隆抗體制備及其在豬體內(nèi)的免疫定位李明堂,付玉,王清爽,李洪廣1.長春理工大學(xué)生命科學(xué)技術(shù)學(xué)院,長春130022;2.吉林大學(xué)中日聯(lián)誼醫(yī)院神經(jīng)外科,長春130031摘要:采用分子克隆技術(shù)制備了豬AQP1多克隆抗體,并應(yīng)用
2、所制備的抗體分析了AQP1在豬體內(nèi)的表達定位.結(jié)果表明:獲得了特異性較強,效價較高的豬AQP1多克隆抗體;應(yīng)用該抗體進行的免疫印跡和免疫組織化學(xué)試驗顯示,AQPI在豬小腸中央乳糜管內(nèi)皮細胞,小膽管上皮細胞,腎臟的近曲小管上皮細胞以及大腦脈絡(luò)叢上皮細胞表達.關(guān)鍵詞:水通道蛋白;多克隆抗體;免疫定位中圖分類號:$828;Q785文獻標識碼:A文章編號:1000—5684(2011)02.0218—04DOi:CNKI:22—1100/S.20110307.0923.000網(wǎng)絡(luò)出版地址:http://www.cnki.net/kc
3、ms/detail/22.1100.S.20110307.0923.000.html引文格式:李明堂,付玉,王清爽,等.豬水通道蛋白AQP1多克隆抗體制備及其在豬體內(nèi)的免疫定位[J].吉林農(nóng)業(yè)大學(xué),2011,33(2):218—221,226.PreparationofPorcineAQP1PolyclonalAntibodyandImmunolocaliza-tionofAQP1inthePigLIMing—tang',FUYu,WANGQing—shuang',LIHong—guang'1.Schoolof,JScien
4、ceandTechnology,ChangchunUniversityofScienceandTechnology,Changchun130022,China;2.DepartmentofNeurosurgery,China—JapanUnionHospital,JilinUniversity,Changchun130031,ChinaAbstract:Rabbitanti—pigAQP1polyclonalantibodywaspreparedandimmunolocalizationofAQP1inthepigwasde
5、termined.Theresultsshowed:byimmuningtherabbit,thepolyclonalantibodywassuccessful—lyprepared.TheresultsofELISAandwesternblottingshowedthattheantibodyhadhightiter(1:10000)andspecificity.Byimmunohistoehenmicalandimmunoblottinganalyses,porcineAQP1proteinwasstronglyexpr
6、essedintheendotheliumofcentrallactealsinvilliofsmallintestineandintheepitheli—umofsmallbileducts,andAQP1proteinwasalsoexpressedintheepitheliumofkidneyproximaltubuleandbrainchorioidplexus.Keywords:aquaporins;polyclonalantibody;immunolocalization水通道蛋白是一類準許水分子和小的溶質(zhì)分子透
7、過細胞膜的膜蛋白分子….迄今為止,已克隆的哺乳動物水通道蛋白家族有13個成員[2-7],AQP1是其中之一,也是第一個被發(fā)現(xiàn)的水通道蛋*基金項目:吉林省科技發(fā)展項目(2009030)作者簡介:李明堂,男,博士,講師,研究方向:細胞生物學(xué).收稿日期:2010.08.25網(wǎng)絡(luò)出版時間:2011-030709:23白.AQP1是由Agre等從人的紅細胞膜分離,純化Rh血型多肽時偶然發(fā)現(xiàn)的,在紅細胞[引,?腎,眼[,肺[11-i3],脈絡(luò)叢以及微管和血管內(nèi)皮等表達.李明堂等:豬水通道蛋白AQP1多克隆抗體制備及其在豬體內(nèi)的免疫定位2
8、192006年,Jin等ll克隆了豬AQP1的cDNA,并應(yīng)用兔抗大鼠AQP1抗體分析檢測了AQP1在豬消化系統(tǒng)內(nèi)表達情況.但應(yīng)用豬AQP1抗體分析AQP1在豬體內(nèi)的表達定位尚未見報道.本試驗應(yīng)用抗體技術(shù)制備了豬AQP1多克隆抗體,并應(yīng)用蛋白質(zhì)檢測的相關(guān)技術(shù)對AQP1在豬體內(nèi)的表達進行了定
