原核與真核生物的dna復制

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1、原核與真核生物的DNA復制DNAreplicationinproeukaryotesandeukaryotes參加DNA復制的重要酶類和蛋白質DNA雙鏈解鏈及保持單鏈穩(wěn)定促進DNA超螺旋結構松弛合成RNA引物合成DNA新鏈連接岡崎片段拓撲異構酶解鏈酶單鏈結合蛋白引物酶DNA聚合酶DNA連接酶原核細胞的DNA合成過程DNA復制的起始識別起始點解旋、解鏈形成引發(fā)復合體（primosome）DNA鏈的延伸DNA復制的終止1.DNA解開成單鏈，提供模板2.合成引物，提供3?-OH末端復制起點有結構特征名?稱功能DnaA蛋白辨認復

2、制起始點DnaB蛋白（解螺旋酶）解開DNA雙鏈DnaC蛋白協(xié)助解螺旋酶DnaG蛋白（引物酶）催化RNA引物生成SSB穩(wěn)定解開的單鏈DNA參與大腸桿菌DNA復制起始的主要蛋白分子名?稱功能DnaA蛋白辨認復制起始點DnaB蛋白（解螺旋酶）解開DNA雙鏈DnaC蛋白協(xié)助解螺旋酶DnaG蛋白（引物酶）催化RNA引物生成SSB穩(wěn)定解開的單鏈DNA參與大腸桿菌DNA復制起始的主要蛋白分子原核生物基因組DNA復制的起始復合體名?稱功能DnaA蛋白辨認復制起始點DnaB蛋白（解螺旋酶）解開DNA雙鏈DnaC蛋白協(xié)助解螺旋酶DnaG蛋白

3、（引物酶）催化RNA引物生成SSB穩(wěn)定解開的單鏈DNA參與大腸桿菌DNA復制起始的主要蛋白分子DnaADnaB、DnaCDNA拓撲異構酶引物酶SSB3?5?3?5?含有解螺旋酶、DnaC蛋白、引物酶和DNA復制起始區(qū)域的復合結構稱為引發(fā)體引發(fā)體和引物的形成DNA合成延伸過程DNA聚合酶III核心酶由?、?、?亞基組成?亞基?亞基?亞基合成DNA鏈酶的組裝具有3‘?5’外切酶活性，參加校正功能DNA夾子(slidingclamp)DNA聚合酶III的一對?亞基DNApolymeraseⅢ的作用同一個復制叉上領頭鏈和隨從鏈由

4、同一個DNA聚合酶Ⅲ催化延長可滑動的DNA夾子增強DNA聚合酶的進行性DNA聚合酶每結合引物-模板連接處一次能夠引入一定數(shù)目的核苷酸DNA聚合酶核心酶和可沿DNA滑動的DNA夾子(slidingclamp)蛋白質間相互作用可以增強DNA聚合酶的進行性原核生物DNA復制的終止Tus蛋白具有反解旋酶作用，參與復制終止RNA引物去除岡崎片段連接在特殊的終止結構區(qū)域停止DNAReplicationOverview●只有一個復制起點●從起點向兩個相反方向復制●復制的速度快，大約每秒延伸500-1000bp●RNA引物和岡崎片段均較

5、長●可以連續(xù)發(fā)動復制原核生物復制過程的主要特點真核細胞的DNA合成過程DNA復制的起始DNA鏈的延伸DNA復制的終止真核生物每個染色體有多個起始點，是多復制子復制。復制有時序性，即復制子以分組方式激活而不是同步起動DNA聚合酶α/δ轉換端粒的合成參與真核細胞DNA復制的主要蛋白分子名?稱功能復制許可因子辨認復制起始點解螺旋酶解開DNA雙鏈復制蛋白A(RPA)穩(wěn)定解開的單鏈DNADNA聚合酶α（引物酶）催化RNA-DNA引物合成參與真核細胞DNA復制起始的主要蛋白分子復制蛋白AReplicationproteinA,RPA

6、結合單鏈DNA促使雙螺旋DNA解旋激發(fā)Pol?引發(fā)酶活性為RFC和PCNA作用所必需組裝引發(fā)體復合物所必需復制因子CReplicationfactorC,RFC結合PCNA具有依賴DNA的ATPase活性增殖細胞核抗原proliferatingcellnuclearantigen,PCNA是真核細胞的可滑動DNA夾子使Pol?獲得進行性激活Pol?是協(xié)調(diào)DNA復制、修復調(diào)節(jié)的關鍵因子DNA聚合酶?p125亞基p50亞基催化亞基，具有DNA聚合酶活性和3??5?核酸外切酶活性，N端可與PCNA結合輔助PCNA激活p125亞

7、基負責前導鏈和后隨鏈合成真核生物的高速復制靠多點起始復制真核細胞DNA復制的延伸---DNA聚合酶α/δ轉換真核細胞DNA復制及終止的參與者真核細胞DNA復制相關蛋白作用小結染色體DNA呈線狀，復制在末端停止復制中岡崎片段的連接，復制子之間的連接染色體兩端DNA子鏈上最后復制的RNA引物，去除后留下空隙復制的終止真核生物DNA復制后的染色體末端形成真核生物染色體末端的特殊結構保證復制的完整性DNA熒光探針蛋白熒光分析MCB-端粒.MOV●多點起始●從起點向兩個相反方向復制●復制速度慢●RNA引物及岡崎片段的長度均小于原核

8、生物●組蛋白的合成在細胞周期的S期與DNA復制同步●復制完成以前不會發(fā)動新一輪復制●只有一個復制起點●從起點向兩個相反方向復制●復制的速度快，大約每秒延伸500bp●RNA引物和岡崎片段均較長●可以連續(xù)發(fā)動復制真核細胞的DNA合成特點原核生物DNA復制的調(diào)控及其機制生長條件好↓合成代謝活躍復制起始因子的濃度快速積累↓