原核生物與真核生物復(fù)制的區(qū)別.doc

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1、(二)DNA的復(fù)制的必要條件1、摸板:母鏈DNA解鏈成單鏈后的兩條鏈均可作為摸板。2、原料:4種脫氧核苷三磷酸。3、需要一小段RNA作為引物,提供3'-OH末段。4、需要ATP和無機離子。5、需要多種酶和蛋白因子:如引物酶、DNA聚合酶、拓撲酶、SSB蛋白等。以上必要條件中,原核生物和真核生物在DNA的復(fù)制所需要引物、酶和蛋白因子等存在差別。其中DNA聚合酶種類存在較大的差別。DNA聚合酶是指以DNA為摸板,在RNA引物3'-OH末段沿5'→3'方向按照堿基互補的原理催化合成DNA鏈的酶,也稱為依賴DNA的D

2、NA聚合酶。原核生物和真核生物DNA聚合酶的區(qū)別主要見下表1原核生物DNA聚合酶真核生物DNA聚合酶DNA-polⅠ復(fù)制過程中的校讀,填補缺口,修復(fù)。DNA-polⅡDNA損傷的應(yīng)急修復(fù)。DNA-polⅢ延長新鏈核苷酸的聚合。DNA-polα起始引發(fā),引物酶活性。DNA-polβ低保真復(fù)制。DNA-polγ催化線粒體DNA的復(fù)制。DNA-polδ延長子鏈的主要酶,解螺旋酶活性。DNA-polε填補引物空隙,切除修復(fù),重組。表1原核生物和真核生物DNA聚合酶的區(qū)別原核生物三種DNA聚合酶都有5'→3'聚合活性和

3、3'→5'外切酶活性,不同的是DNA-polⅠ還有5'→3'外切酶活性,即外切酶活性有雙方向。真核生物五種DNA聚合酶都有5'→3'外切酶活性,DNA-polα,DNA-polβ無3'→5'外切酶活性,DNA-polβ無5'→3'聚合活性。(三)DNA復(fù)制的過程原核生物和真核生物DNA的過程大致可分為:起始+延長+終止三個階段。1、起始階段表2(1)解鏈/旋,解鏈/旋酶催化。(2)起始點識別。(3)原核生物形成復(fù)制叉。(真核生物形成多個復(fù)制單位)(4)引物酶催化引物合成。引發(fā)體與引物酶結(jié)合到DNA鏈上,在引物

4、酶的作用下合成一小段引物。表2原核生物和真核生物DNA復(fù)制的起始階段的特點比較原核生物真核生物復(fù)制起始點起始點識別引物起始點長度復(fù)制單位參與的酶和蛋白因子一個OriCDnaA長、多長一個雙向復(fù)制DnaA識別復(fù)制起始點DnaB解螺旋酶活性DnaC運載和協(xié)助DnaBDnaG引物酶活性多個可能有“蛋白質(zhì)-DNA復(fù)合物參與”短、少短多個雙向復(fù)制DNA-polα起始引發(fā),引物酶活性DNA-polδ解螺旋酶活性SSB穩(wěn)定解開的單鏈DNA拓撲酶理順DNA雙鏈增殖細胞核抗原復(fù)制因子拓撲酶理順DNA雙鏈2、復(fù)制的延長單個核苷酸

5、以3',5'-磷酸二酯鍵相連與新鏈上,復(fù)制方向從5'→3,合成領(lǐng)頭鏈和隨從鏈。原核生物復(fù)制的延長參與的酶主要是DNA-polⅢ催化,NAD+供能;真核生物DNA-polδ在增殖細胞核抗原的協(xié)同下取代DNA-polα的作用合成DNA子鏈,ATP供能。真核生物以復(fù)制子各自進行復(fù)制,引物和岡崎片斷較原核生物短,且引物除RNA外還有DNA,所以真核生物切除引物需要核內(nèi)RNA酶,還需要核酸外切酶。3、復(fù)制的終止原核生物基因為環(huán)狀的DNA,復(fù)制的終止點ter,催化填補空隙為DNA-polⅠ,DNA連接酶連接岡崎片段成DN

6、A鏈。真核生物基因為線狀的DNA,其復(fù)制與核小體的裝配同步進行,復(fù)制后形成染色體,DNA-polε填補空隙,存在端粒及端粒酶防止DNA的縮短(RNA引物留下的空白無法填補時出現(xiàn)DNA的縮短),其中端粒酶為RNA-蛋白質(zhì)的復(fù)合體,具逆轉(zhuǎn)錄酶活性。

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