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1、姜黃素體內(nèi)外給藥及含藥血清對小鼠淋巴細(xì)胞增殖的影響論文馮文茹，趙秀梅，劉利萍，胡人杰【摘要】目的探討姜黃素3種不同給藥途徑對小鼠脾淋巴細(xì)胞增殖的影響。方法通過噻唑藍(lán)（MTT）比色法比較姜黃素3種給藥途徑對小鼠脾淋巴細(xì)胞增殖的影響。結(jié)果姜黃素體內(nèi)給藥和含藥血清能夠促進(jìn)小鼠脾淋巴細(xì)胞的增殖，體外實(shí)驗(yàn)證實(shí)姜黃素能夠抑制小鼠脾淋巴細(xì)胞的增殖，并呈量效關(guān)系。結(jié)論姜黃素與其代謝產(chǎn)物對淋巴細(xì)胞增殖作用的影響是相反的?！娟P(guān)鍵詞】姜黃素；淋巴細(xì)胞；含藥血清Abstract：ObjectiveToprobeintothehyperplasyeff
2、ectofdifferentcurcumineadministeredapproachesforthespleniclymphocyteofmice.MethodsTheeffectofcurcumineontheproliferationofspleenlymphocytesthroughthreedifferentadministrationroutesinedineadministratedinvivoanditsdrugserumupregulatedtheproliferationofspleenlymphocyte
3、s.Out-of-bodyexperiencecertifiedcurcuminecouldsuppressthehyperplasyofthemicespleniclymphocyte.Itpresenteddose-effectrelationship.ConclusionItiscontrarythattheeffectofcurcumineanditsmetaboliteontheproliferationofspleenlymphocytes.Keyin;Lymphocyte;Drugserum姜黃素是中藥姜黃的主要
4、成分，有很重要的經(jīng)濟(jì)價(jià)值和廣泛的藥理作用。如抗氧化、抗炎、降血脂、抗腫瘤等［1］。近些年來有關(guān)姜黃素生物活性的研究越來越多。體外實(shí)驗(yàn)證實(shí)姜黃素具有免疫調(diào)節(jié)的作用［2］，但其對體內(nèi)給藥的免疫調(diào)節(jié)的作用未見報(bào)道。本文通過體內(nèi)外及血清藥理學(xué)的對比實(shí)驗(yàn)著重對此進(jìn)行了研究觀察.freela公司提供；四甲基偶氮唑藍(lán)（MTT），北京欣經(jīng)科生物技術(shù)有限公司產(chǎn)品，批號(hào)：T15051/15181；姜黃素，由本所植化室提供；小牛血清，杭州四季青生物工程材料有限公司產(chǎn)品，批號(hào)：061201。CO2孵箱，REVCO；電子天平，METTLER，AE240
5、；96孔板，由greinerbio-one提供；酶標(biāo)儀，sDragom。2方法2.1姜黃素體內(nèi)對小鼠脾淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化的影響ICR小鼠60只，分為5組，即正常對照組和姜黃素4個(gè)劑量組，對照組每日灌胃生理鹽水，姜黃素給藥組分別每日灌胃給藥50，100，200和400mg/kg的姜黃素。連續(xù)給藥7d，于末次給藥后，取各種小鼠脾臟無菌制備單個(gè)脾細(xì)胞懸液，調(diào)整細(xì)胞濃度為4×106/ml，置于96孔板中，并增設(shè)ConA對照組（濃度為5μg/ml），該組細(xì)胞懸液取自正常對照組。取每只小鼠的脾細(xì)胞懸液75μl加入96孔板中，并設(shè)4個(gè)復(fù)孔。除正常
6、對照組，其余各組均加入25μlConA；隨后，正常對照組加入125μlRPMI1640培養(yǎng)液，其余各組各孔均加入RPMI1640培養(yǎng)液100μl，使反應(yīng)總體積為200μl/孔。置5%CO2孵箱37℃培養(yǎng)72h，培養(yǎng)結(jié)束前4h，每孔加入10μlMTT(5mg/ml)，繼續(xù)培養(yǎng)4h，培養(yǎng)結(jié)束后，1000r/min離心10min，棄上清液，每孔加入150μlDMSO，充分振蕩后室溫靜置10min。進(jìn)行酶標(biāo)儀檢測，讀取A570nm值。2.2姜黃素體外對小鼠脾淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化的影響在無菌條件下，常規(guī)制備脾細(xì)胞懸液，調(diào)整細(xì)胞濃度為4×106/
7、ml，然后按實(shí)驗(yàn)分組：細(xì)胞對照組、ConA對照組、ConA＋姜黃素組。將新分離的小鼠脾細(xì)胞懸液加入96孔板中，各組均加入細(xì)胞懸液75μl/孔，ConA對照組和ConA＋姜黃素組加ConA25μl/孔。然后ConA＋姜黃素組加入含有不同濃度姜黃素（0.88，1.76，3.52，7.03，14.06，28.13，56.25，112.5，225μg/ml）的RPMI1640培養(yǎng)液100μl/孔。設(shè)4個(gè)復(fù)孔。姜黃素藥物對照組加入含上述不同濃度姜黃素的RPMI1640培養(yǎng)液100μl，再加入RPMI1640培養(yǎng)液100μl。細(xì)胞對照組和
8、ConA對照組分別加入RPMI1640培養(yǎng)液，使反應(yīng)總體積為200μl/孔。加樣完畢置5%CO2孵箱37℃培養(yǎng)72h，培養(yǎng)結(jié)束前4h，每孔加入10μlMTT(5mg/ml)，繼續(xù)培養(yǎng)4h，培養(yǎng)結(jié)束后，1000r/min離心10min，棄上清液，每孔加入150μlDMSO，充分
