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《hiv-1 p24抗原elisa試劑盒說明書》由會員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在行業(yè)資料-天天文庫。
1、人類免疫缺陷病毒1型p24抗原酶聯(lián)免疫試劑盒說明書【產(chǎn)品名稱】通用名：人類免疫缺陷病毒1型p24抗原酶聯(lián)免疫試劑盒英文名：ENZYMEIMMUNOASSAYFORDETECTIONOFHUMANIMMUNODEFICIENCYVIRUSTYPEIP24ANTIGENINHUMANSERUM,PLASMAANDCELLCULTURESUPERNATANT【包裝規(guī)格】96人份/盒?！绢A(yù)期用途】本試劑盒用于人類免疫缺陷病毒1型p24抗原（HumanImmunodeficiencyVirusType1p24Antigen）的定量檢測，適用于人血
2、清（或血漿）及細(xì)胞培養(yǎng)上清液等標(biāo)本，僅供研究使用。【檢驗(yàn)原理】本產(chǎn)品采用固相酶聯(lián)免疫吸附分析法（Enzyme-linkedImmunosorbentAssay，ELISA）檢測人血清（或血漿）中的游離HIV-1p24抗原和細(xì)胞培養(yǎng)上清液等標(biāo)本中的HIV-1p24抗原。本分析方法是基于雙抗體夾心的非競爭性免疫分析。校準(zhǔn)品和樣品中HIV-1p24抗原與固相抗-p24單克隆抗體和生物素標(biāo)記的抗-p24多克隆抗體通過免疫反應(yīng)，形成固相抗-p24單克隆抗體—p24抗原—抗-p24多克隆抗體-生物素復(fù)合物；溫育后洗滌，洗去非特異或多余的抗原和多余的
3、生物素標(biāo)記的抗-p24多克隆抗體；然后加入HRP（HorseradishPeroxidase，辣根過氧化物酶）標(biāo)記的鏈親和素，形成固相抗-p24單克隆抗體—p24抗原—抗-p24多克隆抗體-生物素—鏈親和素-HRP復(fù)合物；溫育后洗滌，洗去多余的HRP標(biāo)記的鏈親和素。加入TMB-H2O2底物溶液，HRP催化H2O2氧化TMB生成藍(lán)色的產(chǎn)物（最大吸收峰655nm），加入終止液終止酶催化反應(yīng)，生成黃色產(chǎn)物（最大吸收峰450nm）。其吸光度與校準(zhǔn)品和樣品中的HIV-1p24抗原濃度成正相關(guān)。通過劑量－反應(yīng)曲線可得出樣品中HIV-1p24抗原濃度
4、。試驗(yàn)類型溫育時間試驗(yàn)所需時間試驗(yàn)溫度試驗(yàn)所需樣本體積免疫度量分析120分鐘大約150分鐘37°C和室溫（18~30℃）75μL反應(yīng)原理圖：MicrowellBiotinylatedrabbitanti-HIV-1p24antibodiesMouseanti-HIV-1p24antibodiesSampleHIV-1p24AntigenHRPConjugatedStreptavidinAbsorbanceSignalReagent【主要組成成份】1.抗體包被板（AntibodyCoatedMicroplate）1塊包被有鼠抗-HIV-1
5、p24單克隆抗體的聚苯乙烯微孔板，約200ng/孔。8孔×12條。鋁箔袋密封包裝，含干燥劑。標(biāo)簽編號為R1。2.HIV-1p24抗原校準(zhǔn)品（HIV-1p24AntigenCalibrator）1mL×1支重組HIV-1p24抗原溶液，200IU/mL（約相當(dāng)于4,000pg/mL），稀釋液為校準(zhǔn)品稀釋液。用英國國家生物標(biāo)準(zhǔn)與檢定所(NationalInstituteforBiologicalStandardsandControl,NIBSC)提供的WHO標(biāo)準(zhǔn)品（HIV-1p24Antigen90/636）校準(zhǔn)。綠色PP蓋子和無色PP塑料
6、管。標(biāo)簽編號為R2。3.校準(zhǔn)品稀釋液（CalibratorDiluent）20mL×1瓶磷酸鹽緩沖液，含動物血清和鈣化的正常人血漿（經(jīng)ELISA檢測，HBsAg、抗-HCV和抗-HIV1+2均為陰性），pH約7.3。防腐劑為NaN3（不超過0.1%）和EDTA。綠色PP蓋子和無色HPDE塑料瓶。標(biāo)簽編號為R3。4.生物素標(biāo)記抗體（BiotinylatedAntibody）5mL×1瓶生物素標(biāo)記的兔抗-HIV-1p24多克隆抗體，約4μg/mL。緩沖液為Tris-HCl，含動物血清、穩(wěn)定劑、表面活性劑和綠色染料，pH約7.4。防腐劑為Na
7、N3（不超過0.1%）。藍(lán)色PP蓋子和無色HPDE塑料瓶。標(biāo)簽編號為R4。5.HRP標(biāo)記鏈親和素（HRPConjugatedStreptavidin）20mL×1瓶HRP標(biāo)記鏈親和素，約0.1μg/mL（25mU/mLHRP）。緩沖液為Tris-HCl，含動物血清、穩(wěn)定劑、表面活性劑和紅色染料，pH約7.4。防腐劑為ProClin?300（不超過1%）。紅色PP蓋子和棕色HPDE塑料瓶。標(biāo)簽編號為R5。6.濃縮洗滌液（ConcentratedWashBuffer）50mL×1瓶含表面活性劑的磷酸鹽緩沖液，20倍濃縮。防腐劑為ProCli
8、n?300（不超過1%）。無色PP蓋子和無色HPDE塑料瓶。標(biāo)簽編號為R6。1.底物緩沖液（SubstrateBuffer）10mL×1瓶含H2O2的乙酸鹽緩沖液，pH約5.0。無色PP蓋子和無色HPDE塑
