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1、分子印跡技術(shù)在中藥提取分離中的應(yīng)用的論文【關(guān)鍵詞】分子印跡技術(shù)；中藥；提取分離；綜述分子印跡技術(shù)(molecularimprintingtechnology,mit)是20世紀(jì)末出現(xiàn)的一種高選擇性分離技術(shù),這種技術(shù)的基本思想是源于人們對(duì)抗體-抗原專一性的認(rèn)識(shí),利用具有分子識(shí)別能力的聚合物材料——分子印跡聚合物(moleculeimprintingpolymer,mip)來(lái)分離、篩選、純化化合物的一種仿生技術(shù)。因?yàn)橹苽涞牟牧嫌兄鴺O高的選擇性及卓越的分子識(shí)別性能,很快在固相萃取、人工酶學(xué)、手性拆分、生物傳感器、不對(duì)稱催化等方面得到了廣泛的應(yīng)用。筆者現(xiàn)主要對(duì)mit在中藥提取分
2、離中的應(yīng)用作一概述?！ ?分子印跡技術(shù)基本原理及聚合物的制備 1.1基本原理 mit是選用能與印跡分子產(chǎn)生特定相互作用的功能性單體,通過(guò)共價(jià)或非共價(jià)作用在溶劑中形成印跡分子-功能單體復(fù)合物,加入交聯(lián)劑,在引發(fā)劑的引發(fā)下與帶有特殊官能團(tuán)的功能單體進(jìn)行光或熱的聚合,形成三維交聯(lián)的聚合物網(wǎng)絡(luò),然后,用合適的溶劑除去印跡分子,在聚合物網(wǎng)絡(luò)中形成空間和化學(xué)功能與印跡分子相匹配的空穴。這種空穴與印跡分子結(jié)構(gòu)完全一樣,可對(duì)印跡分子或與之結(jié)構(gòu)相似的分子實(shí)現(xiàn)特異性的識(shí)別。 1.2分子印跡聚合物的制備 分子印跡聚合物的制備過(guò)程可分為3步：第一步是印跡,將印跡分子和功能單體按比例混合
3、,使其存在一定的分子間作用力；第二步是聚合,加交聯(lián)劑,使復(fù)合物通過(guò)聚合反應(yīng)形成聚合物；第三步是去除印跡分子,反復(fù)洗脫水解,使其形成具有一定空穴的分子印跡聚合物。WwW.11665.Com根據(jù)功能單體和印跡分子間作用力的差異,mip可分為以下3類。 1.2.1共價(jià)鍵法 也稱預(yù)先組織法。印跡分子與功能單體通過(guò)可逆的共價(jià)鍵結(jié)合,加入交聯(lián)劑共聚后,印跡分子通過(guò)化學(xué)方法從聚合物上斷開,再用極性溶劑將印跡分子洗脫下來(lái),使其形成具有高密度空腔的分子印跡聚合物。其主要的反應(yīng)類型有形成硼酸酯、西佛堿、縮醛(酮)、酯等。共價(jià)鍵法的優(yōu)點(diǎn)是空間位置固定,選擇性高,峰展寬和脫尾少,常用于諸如
4、糖類、氨基酸類、芳基酮類等多種化合物的特定性識(shí)別。由于共價(jià)鍵比較穩(wěn)定,因而會(huì)生成較多的鍵合位點(diǎn),印跡效率要高于非共價(jià)鍵印跡法。其缺點(diǎn)是功能單體選擇有限,使模板限制較大且難以除去。因此,在選擇模板時(shí)共價(jià)鍵鍵能必須適當(dāng)，否則會(huì)使在識(shí)別過(guò)程中結(jié)合與解離速度偏慢,難以達(dá)到熱力學(xué)平衡?！ ?.2.2非共價(jià)鍵法 也稱自組裝法。印跡分子與功能單體通過(guò)氫鍵、金屬配位鍵、偶極作用、離子化作用、疏水作用、靜電引力、范德華力等多種非共價(jià)鍵作用力生成分子自組裝體,在合適的引發(fā)條件下生成聚合物,將聚合物研磨為粉末并用合適的溶劑除去模板分子。這種過(guò)程是模擬生物中多重分子間作用而具有立體效應(yīng)。其優(yōu)
5、點(diǎn)是可使用多種功能單體,模板分子多樣且易于用適宜的溶劑洗脫。這種方法制得的mip因使用多種作用的結(jié)合,具有選擇性高、分離能力強(qiáng)、識(shí)別速度快等特點(diǎn)。缺點(diǎn)是在聚合前,模板分子與單體可形成多種分子絡(luò)合物,制備的mip結(jié)合位點(diǎn)不均勻,常導(dǎo)致非特異性結(jié)合。在洗脫過(guò)程中,由于很難將聚合物中的模板分子除去,就會(huì)造成“模板滲漏”。但由于該法靈活方便,制備過(guò)程簡(jiǎn)單,使得此法比共價(jià)鍵法更適用?！ ?.2.3半共價(jià)印跡法 也稱空間犧牲法。即聚合時(shí)功能單體和模板分子通過(guò)共價(jià)作用形成穩(wěn)定的配合物,而在對(duì)印跡分子的識(shí)別過(guò)程中,僅通過(guò)非共價(jià)作用力來(lái)進(jìn)行重新鍵合。這種方法由于模板分子和單體用共價(jià)鍵結(jié)
6、合,使生成的聚合物結(jié)構(gòu)完整,結(jié)合點(diǎn)均勻整齊。在洗脫過(guò)程中用強(qiáng)極性溶劑反復(fù)洗滌,從而解決了非共價(jià)健法的“模板滲漏”對(duì)待測(cè)物的影響?！ ?在中藥提取分離中的應(yīng)用 由于含量低、結(jié)構(gòu)復(fù)雜且類型多樣,使中藥活性成分分離困難。高效液相色譜法、硅膠柱色譜法等常規(guī)的分離方法溶劑消耗量大、效率低,且容易造成微量的有效成分丟失。mit與上述色譜分離技術(shù)相比,具有分子識(shí)別性強(qiáng)、固定相制備簡(jiǎn)便快速、操作簡(jiǎn)單、性質(zhì)比較穩(wěn)定(耐酸堿，耐高溫、高壓等)、溶劑消耗量小、模板和mips都可以回收再利用等優(yōu)點(diǎn),在中藥有效成分的提取分離中有很好的應(yīng)用前景?！ ?.1活性成分的分離純化 目前所報(bào)道的mit
7、多用于黃酮類、多元酚類、生物堿類、甾體類和香豆素類的分離純化。程氏等[1]以葛根素為模板分子、丙烯酰胺為單體、二甲基丙烯酸乙二醇酯(edma)為交聯(lián)劑,制備葛根素mip用于分離葛根提取液中的葛根素,并用靜態(tài)吸附實(shí)驗(yàn)研究了葛根素mip的吸附行為。結(jié)果表明,該mip對(duì)模板分子葛根素印跡效果較強(qiáng),得葛根素回收率為83%,遠(yuǎn)大于用大孔吸附樹脂的提取效果。謝氏等[2]用非共價(jià)鍵法,以丙烯酰胺作功能單體、以強(qiáng)極性化合物槲皮素為模板,將槲皮素mip用于銀杏葉提取物水解液的分離,得槲皮素的回收率為89%,并用固相萃取從服用銀杏葉提取物水解液的大鼠血漿中測(cè)
