陳皮多糖提取方案

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1、陳皮中多糖的提取和含量測定實(shí)驗(yàn)方案一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?、掌握熱水侵提法提取陳皮多糖的原理和操作流程；2、了解多糖物質(zhì)的純化法和原理；3、熟悉多糖含量測定的常用方法和原理；4、掌握硫酸—蒽酮法測定多糖含量的原理及操作流程、注意事項(xiàng)；二、實(shí)驗(yàn)原理本實(shí)驗(yàn)利用熱水侵提法提取陳皮中的多糖，原料用乙醇脫脂，在恒溫水浴中熱水侵提過濾濃縮得粗糖，再用石油醚去多糖中的色素，用Sevag試劑（氯仿：正丁醇=4:1）除去蛋白，再用無水乙醇侵提抽濾的精制陳皮多糖?？刹捎昧蛩帷焱y定多糖的含量。三、實(shí)驗(yàn)材料與試劑材料：新鮮桔子皮（自備）。將桔子皮烘干,在粉碎機(jī)中粉碎，過60目篩,將樣品粉末置于棕色磨口瓶中保存?zhèn)溆谩?試

2、劑：石油醚；無水乙醇；濃硫酸；苯酚；標(biāo)準(zhǔn)葡萄糖；活性炭標(biāo)準(zhǔn)葡萄糖溶液（0.04mg/mL）：精確稱取105℃干燥恒重的葡萄糖0.02g，加入適量蒸餾水溶解，定量轉(zhuǎn)移到500mL的容量瓶中，定容到刻度，搖勻，即得到葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液。?儀器：電熱恒溫水浴箱；101-2AB型電熱鼓風(fēng)干燥箱；高速中藥粉碎機(jī)；FA2104(N)系列電子天平；200分光光度計(jì)；RE52-05旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器；SHB-Ⅲ循環(huán)水式多用真空泵；索氏提取器；減壓過濾器；燒杯；量筒；分液漏斗；移液管；四、實(shí)驗(yàn)步驟?1.稱取50.00g樣品粉末，置于500mL圓底燒瓶中，加入500mL80%的乙醇，回流30min，脫去表面脂肪、抽濾、風(fēng)干

3、，重復(fù)1次。2.脫脂后的樣品，用索氏提取器提取1小時(shí)，重復(fù)一次。3.將兩次浸提液減壓過濾,去除濾渣,合并兩次濾液。4.將合并濾液在真空旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器中濃縮至小體積，得粗多糖。5.往粗多糖里加入1：1的石油醚，去色素。6.揮干溶劑后，加sevag去蛋白（正丁醇：氯仿=4：1，sevag:濾液=1：5，分液漏斗中反復(fù)進(jìn)行，直到分界面處無白色混懸）7.然后加入4倍體積的無水乙醇，置冰箱24?h,抽濾，收集沉淀。真空干燥至恒重，即得精制桔子皮多糖。?五、硫酸-蒽酮法測定陳皮多糖含量2.繪制葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線:準(zhǔn)確量取100μg/ml葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液0，0.10，0.20，0.40，0.60，0.80，1.00

4、ml，注入糖管中，補(bǔ)充純水至1.00ml（下表）。并分別加入5ml硫酸和1ml苯酚試劑，蓋塞后立即搖勻，迅速浸入冷水浴中，各管加完后一起置于沸水浴中10min，，封口防蒸發(fā)，取出流水冷卻，室溫放置10分鐘，于620nm處比色，測定吸光度值。以測得的吸光度為縱坐標(biāo)，標(biāo)準(zhǔn)葡萄糖含量為橫坐標(biāo)，作出標(biāo)準(zhǔn)曲線。3．陳皮多糖含量測定:將陳皮粗多糖以適量水溶解（約為10-80ug/ml），并準(zhǔn)確量取1.00ml待測溶液，加入5ml硫酸和1ml苯酚試劑，同標(biāo)準(zhǔn)曲線之操作，比色測定。根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算糖含量實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)序號1234567葡萄糖含量(μg/ml)01020406080100吸光度A六、實(shí)驗(yàn)裝置圖索氏提

5、取裝置回流裝置