人骨形成蛋白7基因修飾的兔骨髓基質(zhì)干細(xì)胞異位成骨實(shí)驗(yàn)

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1、人骨形成蛋白7基因修飾的兔骨髓基質(zhì)干細(xì)胞異位成骨實(shí)驗(yàn)作者：閆露，羅二平，魚(yú)兵，栗艷，沈敏，范清宇【摘要】?［目的］螋通過(guò)人骨形成蛋白7(hu挪manbonemorph肥ogeneticprot蟈Ein7，BMP7)基因賓修飾的兔骨髓基質(zhì)干細(xì)胞(程mesenchymals戰(zhàn)temcells,MSC苧s)與聚乳酸-羥基乙酸(polycleclide惻coplycocli氐de,PLGA)支架復(fù)合粽，進(jìn)行自體皮下異位成骨實(shí)赦驗(yàn)，探索BMP-7基因治滁療與組織工程技術(shù)相結(jié)合的摹可行性。［方法］PLGA倒與腺病毒Ad-BMP-7竦感染后的兔MSCs共培養(yǎng)瀟，電鏡觀察了解細(xì)胞在PL倥GA

2、上黏附、生長(zhǎng)和合成分泌骨基質(zhì)成分的情況；將轉(zhuǎn)＊染基因的細(xì)胞和未轉(zhuǎn)染基因鳴的細(xì)胞分別與PLGA支架貢復(fù)合，構(gòu)建組織工程化骨并茬植入體內(nèi)，通過(guò)組織觀察新櫚骨形成情況。［結(jié)果］制備鶚得到的PLGA為疏松多孔的網(wǎng)格樣結(jié)構(gòu)，具有一定的ひ韌性和強(qiáng)度。將腺病毒感染裝的骨髓基質(zhì)干細(xì)胞接種于修卅剪成一定形狀的PLGA上，經(jīng)電鏡觀察可見(jiàn)細(xì)胞貼附枚于材料表面和孔隙內(nèi)并增殖。異位成骨實(shí)驗(yàn)證實(shí)空白對(duì)嫠照PLGA孔隙內(nèi)無(wú)新骨形彩成，對(duì)照細(xì)胞組內(nèi)有部分新生骨形成，而AdBMP7實(shí)驗(yàn)組形成的新生骨組瀑織面積更大(P【關(guān)鍵詞】覘?基因治療；骨形成蛋白；組織工程Abstrac淳t：［Objectiv

3、e囔］hBMP7genet溽herapycombin疚11/11edwithtissue斫engineering焰techniqueswa亨sexploredtoimproveosteog情enesisinanec婊topicbonefor僻mationmodeli甓nrabbits.［Me岙thod］PLGA(wi遜thdiameterof螫150～300μmand糗porosityof90%)wasprepare蹦dandautologo嚙usbonemarrow薄stromalcells憩(bMSCs)infecぞtedbyadenovi娥ruscarringhB勝M(fèi)

4、P7gene(Ad噱BMP7)werese僂ededontoelec襝tronicmicros薄copingwereusedtoobservecellmatrixin陷teraction.Th￠ecellsinfectedandnoninf共ectedwerecom鯨binedwithPLG撈Aataconcentr民ationof5×106擘cells/mltoco哭nstructtissu扦eengineeredboneswerefur靂therimplante糠dinto8rabbit⑨ssubcutaneou菱slyusingPLGA悠asblankco

5、ntr軟ol(8implants弦pergroup).Si縋xweeksaftersurgery,theimplantswereev鬼aluatedwithhistologicalstainingandco繾mputerizedan食alysisofnewbǒoneformation鉗.［Result］PLG褫Apreparedwas梏agridlikepo羞rousstructure,withdefiniもteductilitya鍰ndstrength,a諂ndcouldbetrimmedintodiff釵erentmodels.俑Adenovirusi瞰nfec

6、tedMSCss醢eededontoPLG蒔Ashowedhighl拐evelofprolif蟛eration,andm諤asssynthesis蛭ofcellmatrix洄wasobservedw裳ithelectroni抬ctheectopicb二oneformation姐model,PLGAal絞onecouldnoti穢nducenewbone敉formation.Th螭enewbonearea耔formedinthen系oninfectedM鐵SCsgroupwas±騍%,whileAdBM緋P7groupwas±δ%,whichwashi覺(jué)gherthanthat

7、鯢11/11oftheformers衡ignificantly惲(P由支架材料、種子細(xì)胞篝和生長(zhǎng)因子復(fù)合構(gòu)建的組織工程骨為臨床治療頑固性的骨折不愈合和大型骨缺損帶醴來(lái)了希望。然而，如何實(shí)現(xiàn)璇生長(zhǎng)因子在特定的解剖部位玟持續(xù)穩(wěn)定的釋放，這個(gè)問(wèn)題硎一直未得到有效解決。骨髓似基質(zhì)干細(xì)胞(mesencㄒhymalstemcel裝ls,MSCs)具有明確潦的成骨潛能，是骨愈合過(guò)程ù中骨化的重要細(xì)胞。它具有忙來(lái)源豐富，采集方便，容易螭在體外培養(yǎng)、誘導(dǎo)、擴(kuò)增的礻特點(diǎn)，是組織工程化