重組人3型腺病毒六鄰體蛋白單克隆抗體的制備及鑒定

重組人3型腺病毒六鄰體蛋白單克隆抗體的制備及鑒定

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1、重組人3型腺病毒六鄰體蛋白單克隆抗體的制備及鑒定?1008?南方醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)fJSouthMedUniv)2008;28(6)重組人3型腺病毒六鄰體蛋白單克隆抗體的制備及鑒定周榮~,盛慧英,田新貴,王長兵,龔四堂,陳俏連(中國科學(xué)院南海海洋研究所,廣東廣州510301;中國科學(xué)院研究生院,北京100049;廣州市兒童醫(yī)院,廣東廣州510120)摘要:目的制備抗人3型腺病毒六鄰體蛋白的單克隆抗體并對(duì)單抗進(jìn)行鑒定.方法用純化的重組六鄰體蛋白免疫BALB/cdx鼠,取其脾細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合.經(jīng)ELISA間接法篩選和克隆化培養(yǎng),獲得4株分泌抗腺病毒六鄰體蛋白單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞.純化其腹水

2、獲得單抗.使用ELISA,Westernblot和中和實(shí)驗(yàn)等方法鑒定單抗的敏感性,特異性以及中和活性.結(jié)果ELISA和免疫印跡結(jié)果表明這4株單抗與腺病毒六鄰體蛋白可以特異性結(jié)合.而且,4C6株單抗具有中和活性.結(jié)論獲得了4個(gè)單抗為腺病毒六鄰體蛋白的單克隆抗體,可用于3型腺病毒的早期診斷和藥物治療的研究.關(guān)鍵詞:3型腺病毒;六鄰體;單克隆抗體;中和抗體中圖分類號(hào):R392.116文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:A文章編號(hào):1673-4254(2008)06.1008—03Preparationandcharacterizationofspecificmonoclonalantibodiesagainsthe

3、xonofHAdV3ZHOURong,SHENGHui-ying~,TIANXin-gui,WANGChang-bing~,GONGSi—taIl,CHENQiao-lianSouthChinaInstituteofOceanology,Guangzhou510301,China;2Gr重組人3型腺病毒六鄰體蛋白單克隆抗體的制備及鑒定?1008?南方醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)fJSouthMedUniv)2008;28(6)重組人3型腺病毒六鄰體蛋白單克隆抗體的制備及鑒定周榮~,盛慧英,田新貴,王長兵,龔四堂,陳俏連(中國科學(xué)院南海海洋研究所,廣東廣州510301;中國科學(xué)院研究生院,北京10004

4、9;廣州市兒童醫(yī)院,廣東廣州510120)摘要:目的制備抗人3型腺病毒六鄰體蛋白的單克隆抗體并對(duì)單抗進(jìn)行鑒定.方法用純化的重組六鄰體蛋白免疫BALB/cdx鼠,取其脾細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合.經(jīng)ELISA間接法篩選和克隆化培養(yǎng),獲得4株分泌抗腺病毒六鄰體蛋白單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞.純化其腹水獲得單抗.使用ELISA,Westernblot和中和實(shí)驗(yàn)等方法鑒定單抗的敏感性,特異性以及中和活性.結(jié)果ELISA和免疫印跡結(jié)果表明這4株單抗與腺病毒六鄰體蛋白可以特異性結(jié)合.而且,4C6株單抗具有中和活性.結(jié)論獲得了4個(gè)單抗為腺病毒六鄰體蛋白的單克隆抗體,可用于3型腺病毒的早期診斷和藥物治療的研究.

5、關(guān)鍵詞:3型腺病毒;六鄰體;單克隆抗體;中和抗體中圖分類號(hào):R392.116文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:A文章編號(hào):1673-4254(2008)06.1008—03PreparationandcharacterizationofspecificmonoclonalantibodiesagainsthexonofHAdV3ZHOURong,SHENGHui-ying~,TIANXin-gui,WANGChang-bing~,GONGSi—taIl,CHENQiao-lianSouthChinaInstituteofOceanology,Guangzhou510301,China;2GraduateSc

6、hoolofChineseAcademyofSciences,Beijing100049,China;3GuangzhouChildren.SHo~ital,Guangzhou510120,ChinaAbstract:ObjectiveToobtainthemonocbnalantibodyagainsthexonproteinofhumanadenovims.MethodsBALB/cmicewereimmunizedwithpurifiedrecombinanthexonprotein,andthespleencellsofthemicewereisolatedandfusedwi

7、thmy~macells.FourhybridomacellstrainswerescreenedbyindirectELISAandcultured,andthesensitivity,specificityandvirusneutralizingactivitywereanalyzedwithELISA,Westernblottingandneutralizingtest.ResultsThemOUseascitesproducedbyth

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