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1、《飼料原料中赭曲霉毒素的快速篩查膠體金快速定量法》江西省地方標準編制說明一、標準制定意義（一）介紹赭曲霉毒素A是由多種生長在糧食（小麥、玉米、大麥、燕麥、黑麥、大米和黍類等）、花生、蔬菜（豆類）等農(nóng)作物上的曲霉和青霉產(chǎn)生的。動物攝入霉變飼料后，這種毒素也可能出現(xiàn)在豬和母雞等的肉中。赭曲霉毒素主要損害動物肝臟與腎臟，引起肝臟和腎臟損傷，大量毒素也可能引起動物腸黏膜炎癥和壞死。有報道指出，食物中的OTA與一種致命的地方性腎臟疾?。╞alkanendemicnephropathy）有關，且有致癌、致畸作用，近年來引起了人類營養(yǎng)學家的重視。正常條件下，小麥和玉米受OTA污染的機率較小，約1%～
2、5%，其含量為0.01～5mg/kg；大麥和燕麥被污染的機率較高，約為10%，其含量一般在0.1mg/kg以下，個別樣品高達27mg/kg。赭曲霉毒素包括3種類型，毒性強弱順序是：OTA>OTC>OTB。OTB是OTA的脫氯衍生物，OTC是OTA的乙基酯，OTB和OTC的含量一般較低，毒性較OTA小。因此，飼料檢測時可以主要分析OTA含量。目前，小麥、大麥、玉米等谷類作物中OTA的測定方法有薄層色譜法（TLC）、酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）、氣相色譜法（GC）、高效液相色譜法（HPLC）、高效液相色譜-質(zhì)譜法（HPLC-MS）。TLC法繁瑣費時，且靈敏度、特異性較差，提取過程中所需有機
3、溶劑品種多且量大，易污染環(huán)境，對人體有較大危害。ELISA法測定結果受試劑盒差異、實驗溫度、儀器靈敏度等條件影響較大。GC、GC-MS、HPLC和HPLC-MS8法普遍存在著樣品前處理過程復雜，靈敏度易受樣品的凈化、濃縮等步驟的影響，耗時，檢測設備昂貴，并要求有專業(yè)的技術人員及較長的分析周期。同時，這些檢測方法無一例外要求在檢測過程中使用毒素標準溶液，給環(huán)境和檢測人員的安全造成風險。本標準項目是通過化學合成法制備赭曲霉毒素A人工抗原，利用此抗原免疫實驗動物制備赭曲霉毒素A單克隆抗體，基于此原料基礎上開發(fā)赭曲霉毒素A快速檢測試紙條，再通過膠體金讀數(shù)儀進行大米、玉米、小麥等樣品中赭曲霉毒素
4、的定量分析。定量分析便于將檢測結果與國家限量對比，有助于監(jiān)管部門根據(jù)糧食的污染水平進行糧食分級管理，同時有助于企業(yè)內(nèi)部更好地進行質(zhì)量控制。本標準可提高糧食樣品檢測、監(jiān)測效率，降低成本，保護環(huán)境，保障從業(yè)人員健康安全。（二）背景據(jù)聯(lián)合國糧農(nóng)組織（FAO）統(tǒng)計，全世界每年谷物產(chǎn)量的25%受到真菌毒素不同程度的污染。隨著飼料工業(yè)的快速發(fā)展，近年來，中國的飼料也受到霉菌污染的嚴重挑戰(zhàn)。自2006年以來，玉米等飼料原料價格普遍上漲，致使很多飼料企業(yè)及養(yǎng)殖戶使用低質(zhì)飼料原料，加上近年來氣候的變化，華北、東北地區(qū)降雨量增加，進一步加重了飼料原料中真菌毒素的污染。而由于飼料原料和配合飼料中多種真菌毒素
5、同時存在，在食用油等產(chǎn)品及牛奶中真菌毒素污染也比較嚴重。在世界許多地方，目前真菌毒素已構成重要的食品安全問題。真菌毒素對人類和動物健康可產(chǎn)生嚴重的影響，這一認識導致了許多國家在近幾十年來制定了諸多有關食品和飼料中真菌毒素的法規(guī)，以保護人類的健康，并保障生產(chǎn)者和貿(mào)易商的經(jīng)濟利益。隨著全球經(jīng)濟一體化的進程，類似真菌毒素等涉及安全衛(wèi)生項目的限量標準，越來越多地被利用為貿(mào)易保護主義中非關稅壁壘的重要手段。因此，為了保證食品安全，保障消費者的健康，為了打破國外的技術壁壘，同時在合理有利的前提下，更多地樹立我國的技術性壁壘，開展飼料中真菌毒素的檢測并建立標準方法是有效的方法之一。目前國內(nèi)應用標準檢
6、測方法大多為儀器方法，所需儀器設備昂貴，不利于進行廣泛推廣，并且限制了很多檢測單位高效、廣泛地開展檢測工作。建立符合中國國情的快速檢測方法標準，具有檢測快速、簡便、靈敏、成本低等優(yōu)點，為打開市場并占領市場提供了先決條件。（三）限量標準、檢測方法及研究現(xiàn)狀1、限量標準世界各國均對食品中赭曲霉毒素A的含量做出了嚴格的規(guī)定。歐盟關于赭曲霉毒素A的限量標準分類最為詳細，未加5工谷物為μg/kg，由未加工的谷物制備的所有產(chǎn)品，包括加工的谷物制品及直接供人食用的食物為3.0μg/kg，供嬰幼兒食用的谷類加工食品和嬰兒食品為0.5μg/kg。我國對食品中赭曲霉毒素A的限量標準（GB2761-2011
7、）是：谷物及其制品≤5μg/kg；豆類及其制品≤5μg/kg。我國對飼料中赭曲霉毒素A的限量標準（GB13078.2-2006）是：配合飼料和玉米≤100μg/kg。表1我國飼料中的赭曲霉毒素A限量標準8產(chǎn)品名稱限量/(μg/kg)谷物及其加工產(chǎn)品≤100配合飼料≤1002、檢測方法及研究現(xiàn)狀真菌毒素的檢測方法主要有兩種，一是將色譜技術作為基礎的物理化學檢測方法，包括高效液相色譜法（HPLC）和氣相色譜法（GC）等，而薄層層析法（TLC）由于操
