dads對(duì)sw480細(xì)胞系生物學(xué)行為及蛋白質(zhì)表達(dá)譜的影響

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1、蘇堅(jiān)南華大學(xué)碩士學(xué)位論文主要英文縮略語索引DADSdiallyldisulfide二烯丙基二硫MALDI-TOMatrix-assisted基質(zhì)輔助激光解吸飛F-MSlaser-desorption/ionizationtime-of-flight行時(shí)間質(zhì)譜massspectrometryPMFpeptidemassfingerprint肽質(zhì)量指紋圖IRinhibitionratio抑制率PBSphosphatebuffersolution磷酸鹽緩沖液SDSsodiumdodecylsulfate十二烷基硫酸鈉DTT1,4-dithiothreitol1,4-二硫代蘇糖醇BS

2、Abovineserumalbumin牛血清白蛋白ACNAcetonitrile乙腈APSammoniumpersulfate過硫酸胺BisN,N′-Methylene-bis-(acrylamide)甲叉雙丙烯酰胺CCAα-cyano-4-hydoxycinnamicacidα-氰基-4-羥基肉桂酸CHAPS3-((3-cholamidopropyl)dimethylammonio)-3-[(膽酰胺丙基)-1-propanesulfonate)二乙胺]-丙磺酸ddH2Odoubledistilledwater雙蒸水2-DEtwo-dimensionalelectrophor

3、esis雙向電泳EDTAethylenediaminetetraaceticacid,editic乙二胺四乙酸acidIAAiodoacetamide碘乙酰胺IPGimmobilizedpHgradient固相pH梯度PAGEpolyacrylamidegelelectrophoresis聚丙烯酰胺凝膠電泳1原創(chuàng)性聲明本人聲明,所呈交的學(xué)位論文是本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果。盡我所知,除了論文中特別加以標(biāo)注和致謝的地方外,論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果,也不包含為獲得南華大學(xué)或其他單位的學(xué)位或證書而使用過的材料。與我共同工作的同志對(duì)本研究所作的

4、貢獻(xiàn)均已在論文中作了明確的說明。作者簽名:日期:年月日關(guān)于學(xué)位論文使用授權(quán)說明本人同意南華大學(xué)有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定,即:學(xué)校有權(quán)保留學(xué)位論文,允許學(xué)位論文被查閱和借閱;學(xué)??梢怨紝W(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容,可以采用復(fù)印、縮印或其它手段保留學(xué)位論文;學(xué)??筛鶕?jù)國家或湖南省有關(guān)部門規(guī)定送交學(xué)位論文。作者簽名:導(dǎo)師簽名:日期:年月日蘇堅(jiān)南華大學(xué)碩士學(xué)位論文中文摘要第一部分DADS對(duì)人結(jié)腸癌SW480細(xì)胞系生物學(xué)行為的影響研究生:蘇堅(jiān)導(dǎo)師:賀修勝教授目的:探討二烯丙基二硫(diallyldisulfide,DADS)對(duì)人結(jié)腸癌細(xì)胞系(SW480)生物學(xué)行為的影響及其機(jī)制。方法

5、:以SW480細(xì)胞系為實(shí)驗(yàn)研究對(duì)象,通過MTT法測(cè)定DADS對(duì)SW480細(xì)胞的生長(zhǎng)抑制效應(yīng),采用HE染色及流式細(xì)胞儀檢測(cè)藥物作用前后細(xì)胞形態(tài)學(xué)及細(xì)胞周期分布等方面的改變。結(jié)果:MTT法測(cè)定結(jié)果顯示,DADS對(duì)SW480細(xì)胞具有明顯的生長(zhǎng)抑制作用,DADS濃度由30μg/ml增加至70μg/ml時(shí),SW480細(xì)胞的生長(zhǎng)抑制率由23%提高到66%,呈劑量-效應(yīng)依賴關(guān)系(p<0.05);形態(tài)學(xué)觀察發(fā)現(xiàn)DADS誘導(dǎo)SW480細(xì)胞呈現(xiàn)出異型性降低,核質(zhì)比下降等細(xì)胞成熟分化的特征;表明SW480細(xì)胞在DADS作用后,使瘤細(xì)胞異型性下降,并使部分瘤細(xì)胞向成熟細(xì)胞方向分化。流式細(xì)胞儀檢測(cè)結(jié)果

6、顯示:隨著DADS處理濃度加大,瘤細(xì)胞群體中S期細(xì)胞數(shù)減少,細(xì)胞阻滯在G2/M期的細(xì)胞數(shù)目增多,亞二倍體峰逐漸增高。結(jié)論:⑴DADS對(duì)SW480細(xì)胞系具有明顯的增殖抑制作用,且呈現(xiàn)劑量-效應(yīng)依賴關(guān)系。⑵DADS使SW480細(xì)胞阻滯在G2/M期。關(guān)鍵詞:DADS;SW480;生長(zhǎng)抑制;細(xì)胞周期3蘇堅(jiān)南華大學(xué)碩士學(xué)位論文第二部分DADS對(duì)人結(jié)腸癌SW480細(xì)胞系蛋白質(zhì)表達(dá)譜的影響目的:近年來,蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)已廣泛應(yīng)用于腫瘤研究領(lǐng)域,但用于結(jié)腸癌的研究較少報(bào)導(dǎo)。本課題旨在研究DADS抑制SW480細(xì)胞系生長(zhǎng),探討DADS誘導(dǎo)人結(jié)腸癌SW480細(xì)胞蛋白質(zhì)組差異表達(dá)的相關(guān)分子機(jī)制。方法

7、:采用蛋白質(zhì)組學(xué)相關(guān)技術(shù),如二維電泳、圖像分析、質(zhì)譜技術(shù)等方法,觀察DADS對(duì)SW480細(xì)胞系的生長(zhǎng)抑制以及蛋白質(zhì)組的差異表達(dá)。用固相pH梯度雙向凝膠電泳,分離SW480細(xì)胞和DADS處理的SW480細(xì)胞總蛋白質(zhì);用銀染和考馬斯亮藍(lán)染色對(duì)凝膠上的蛋白質(zhì)進(jìn)行可視化檢測(cè);經(jīng)過染色后的凝膠用PDQuest軟件進(jìn)行分析,切取部分重復(fù)性好、邊界清晰的差異蛋白質(zhì)點(diǎn)經(jīng)膠內(nèi)原位酶解,用基質(zhì)輔助激光解吸電離飛行時(shí)間質(zhì)譜(MALDI-TOF-MS)測(cè)定肽質(zhì)量指紋圖(PMF),將所得的數(shù)據(jù)進(jìn)行生物信息學(xué)分析處理。結(jié)果:在相同

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