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《dads抑制sw細(xì)胞系生長(zhǎng)增殖的相關(guān)蛋白質(zhì)分子鑒定》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在教育資源-天天文庫(kù)。
1、分類號(hào)UDC密級(jí)編號(hào)南華大學(xué)申請(qǐng)碩士學(xué)位論文DADS抑制SW480細(xì)胞系生長(zhǎng)增殖的相關(guān)蛋白質(zhì)分子鑒定研究生姓名：趙其輝指導(dǎo)教師姓名、職稱：賀修勝教授學(xué)科、專業(yè)名稱：病理學(xué)與病理生理學(xué)研究方向：腫瘤病因發(fā)病學(xué)與防治2007年-24月10原創(chuàng)性聲明本人聲明，所呈交的學(xué)位論文是本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果。盡我所知，除了論文中特別加以標(biāo)注和致謝的地方外，論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過(guò)的研究成果，也不包含為獲得南華大學(xué)或其他單位的學(xué)位或證書而使用過(guò)的材料。與我共同工作的同志對(duì)本研究所作的貢獻(xiàn)均已在論文中作了明確的說(shuō)明。作者簽名日期：年月日關(guān)于學(xué)位論文使
2、用授權(quán)說(shuō)明本人同意南華大學(xué)有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定，即：學(xué)校有權(quán)保留學(xué)位論文，允許學(xué)位論文被查閱和借閱；學(xué)?？梢怨紝W(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容，可以采用復(fù)印、縮印或其它手段保留學(xué)位論文；學(xué)?？筛鶕?jù)國(guó)家或湖南省有關(guān)部門規(guī)定送交學(xué)位論文。作者簽名：導(dǎo)師簽名：日期：年月日1目錄一、中文摘要……………………………………………4二、英文摘要……………………………………………6三、正文前言…………………………………………………8技術(shù)路線……………………………………………11材料與方法…………………………………………12結(jié)果…………………………………………………18討論……………………………
3、……………………24結(jié)論…………………………………………………26參考文獻(xiàn)……………………………………………27四、綜述…………………………………………………34五、附錄一………………………………………………41六、附錄二………………………………………………42七、附錄三………………………………………………45八、致謝………………………………………………463本研究基金資助項(xiàng)目湖南省教育廳課題基金項(xiàng)目（課題編號(hào)：No.01B016）湖南省衛(wèi)生廳課題基金項(xiàng)目（課題編號(hào)：No.Y02-069）自然科學(xué)基金課題基金項(xiàng)目（課題編號(hào)：No.03JJY3029）湖南省科技廳課題基金項(xiàng)目（課題編號(hào)：0
4、2SSY4004）2DADS抑制SW480細(xì)胞系生長(zhǎng)增殖的相關(guān)蛋白質(zhì)分子鑒定碩士研究生：趙其輝導(dǎo)摘師：賀修勝教授要目的：本室前期應(yīng)用比較蛋白質(zhì)組學(xué)，從DADS處理的SW480細(xì)胞系中，篩出了一些具有潛在應(yīng)用價(jià)值的差異蛋白質(zhì)分子。本實(shí)驗(yàn)就部分差異表達(dá)蛋白質(zhì)進(jìn)行進(jìn)一步分析與鑒定，因此，我們選擇泛肽、CK19和FKBP蛋白質(zhì)進(jìn)行驗(yàn)證，為下一步的實(shí)驗(yàn)研究奠定堅(jiān)實(shí)的基礎(chǔ)。方法：采用MTT實(shí)驗(yàn)、細(xì)胞計(jì)數(shù)法，觀察不同濃度和作用時(shí)間DADS對(duì)SW480細(xì)胞的生長(zhǎng)抑制作用；施用流式細(xì)胞儀，分析50μg/mlDADS對(duì)SW480細(xì)胞的周期分布及凋亡率的影響；運(yùn)用RT-PCR方法，檢測(cè)CK19mRNA表達(dá)水
5、平；用免疫印跡方法，分析50μg/mlDADS處理SW480細(xì)胞系后泛肽、CK19和FKBP的表達(dá)水平。結(jié)果：MTT比色法檢測(cè)顯示，DADS能明顯抑制SW480細(xì)胞系生長(zhǎng)增殖，呈濃度和時(shí)間依賴性，SW480細(xì)胞系經(jīng)25μg/ml，35μg/ml，50μg/ml和70μg/mlDADS處理48h，其細(xì)胞生長(zhǎng)增殖抑制率分別為18.67%、33.02%、49.12%和66.86%，細(xì)胞生長(zhǎng)增殖速度明顯較對(duì)照組慢，差異有顯著性意義(P<0.05)。細(xì)胞計(jì)數(shù)結(jié)果表明，SW480細(xì)胞群體倍增時(shí)間為30.81h，而當(dāng)DADS的濃度由25μg/ml增加到70μg/ml時(shí)，其細(xì)胞群體倍增時(shí)間由34.68h延
6、長(zhǎng)至96.33h，與對(duì)照組比較，差異有顯著性意義(P<0.05)。流式細(xì)胞儀分析結(jié)果顯示，50μg/mlDADS將SW480細(xì)胞阻滯在G2/M期，并使細(xì)胞凋亡率增加。應(yīng)用半定量RT-PCR檢測(cè)CK19的基因mRNA表達(dá)水平，結(jié)果證實(shí)，50μg/mlDADS處理SW480細(xì)胞后，CK19mRNA表達(dá)較對(duì)照組降低，差異有顯著性意義(P<0.05)；Westernblotting分析結(jié)果顯示，50μg/mlDADS4處理SW480細(xì)胞48h，泛肽表達(dá)較對(duì)照組增強(qiáng)，而CK19和FKBP的表達(dá)明顯降低，差異均為2倍以上。結(jié)論：1.DADS能抑制SW480細(xì)胞系的生長(zhǎng)增殖，且呈劑量依賴效應(yīng)。2.DAD
7、S抑制SW480細(xì)胞系生長(zhǎng)增殖，可能與泛肽表達(dá)上調(diào)，CK19和FKBP表達(dá)下調(diào)，將細(xì)胞阻滯在G2/M期及促進(jìn)細(xì)胞凋亡有關(guān)。關(guān)鍵詞：DADS；SW480細(xì)胞；泛肽；CK19；FKBP5IdentificationofproteinsassociatedwithproliferationinhibitioneffectsbyDADSinSW480celllineAbstractObjective:Somevalubledif
