尿酸(ua) 酶比色法

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1、項目尿酸（UA）方法酶比色法目錄1.檢測原理2.標(biāo)本采集與處理2.1受檢者的準(zhǔn)備2.2靜脈采血2.3抗凝劑2.4標(biāo)本處理3.試劑3.1試劑3.2校準(zhǔn)血清3.3試劑與校準(zhǔn)血清的穩(wěn)定性4.儀器5.操作6.計算7.操作性能7.1精密度7.2準(zhǔn)確度7.3靈敏度7.4可報告范圍7.5特異性7.6干擾8.參考值9.臨床意義附錄A:參數(shù)1.檢測原理反應(yīng)生成的醌亞胺在505nm波長有最大吸收，所產(chǎn)生的顏色強(qiáng)度與血清中尿酸含量成正比，再通過與同樣處理的尿酸標(biāo)準(zhǔn)溶液比較，經(jīng)過計算可求出血清中尿酸的含量。試劑中的抗壞血酸氧化酶可排除抗壞血酸對結(jié)果的影響，測定尿酸所用的酶反應(yīng)如下:尿酸酶尿酸

2、＋O2＋2H2O------------尿囊素＋CO2＋2H2O2過氧化物酶H2O2＋4-氨基安替比林＋2、4、6-三碘-3-羥基苯甲酸---------------醌亞胺＋H2O2．標(biāo)本采集與處理2.1受檢者的準(zhǔn)備：病人空腹12h，不飲酒24h后采集血樣。體檢對象抽血前應(yīng)有兩周的的正常狀況記錄。注意有無應(yīng)用影響測試項目的藥物。此外，對于體檢者，采血的季節(jié)都應(yīng)做相關(guān)記錄，因為樣本中各項目的含量有季節(jié)性變動，為了前后比較應(yīng)在每年同一季節(jié)檢驗。應(yīng)囑體檢對象在抽血前24小時內(nèi)不做劇烈運動。2.2靜脈采血：除非是臥床的病人，一般在采血時取坐位。體位影響水分在血管內(nèi)外的分布，會

3、影響測試項目的濃度。在采血前至少應(yīng)靜坐5分鐘，一般從肘靜脈取血，使用止血帶的時間不超過1分鐘，穿刺成功后立即松開止血帶。2.3抗凝劑：血漿使用0.1mg/ml肝素作為抗凝劑。2.4標(biāo)本處理：血標(biāo)本室溫放置30min～45min后離心分離血清或血漿，在兩小時內(nèi)檢測完畢；如兩小時內(nèi)不能檢測完畢，將離心分離血清或血漿置潔凈試管加蓋2-8℃保存。3．試劑3.1試劑：本科使用湖南永和陽光科技有限責(zé)任公司UA試劑盒，為液體雙試劑，各組分如下：組成R1:R2=4:1（混合后溶液的濃度）R1：檢測試劑1Good”S緩沖液0.1mmol/L3，5-DHBS1.2mmol/LR2：檢測試

4、劑2URO≥500KU/LPOD≥5.0KU/L4-AAP1.10mmol/L尿酸標(biāo)準(zhǔn)液：590umol/L3.2尿酸校準(zhǔn)血清：使用湖南永和陽光科技有限責(zé)任公司提供的40項校準(zhǔn)血清。校準(zhǔn)頻次：空白定標(biāo)：每日需做試劑空白定標(biāo)。全點定標(biāo)：試劑換批號使用時或質(zhì)控結(jié)果超過規(guī)定的±2SD范圍，需要全點定標(biāo)。3.3試劑與校準(zhǔn)血清的穩(wěn)定性：原包裝試劑儲存在2-8℃至標(biāo)簽所示失效日期。試劑開瓶后，在儀器中至少可保存30天。試劑儲存在18-22℃穩(wěn)定28天，試劑應(yīng)避免污染。試劑R1,R2顏色為無色，當(dāng)試劑變色，按照試劑失效處理。多項校準(zhǔn)血清在2-8℃儲存至標(biāo)簽所示失效日期，復(fù)溶后-20

5、℃保存，可穩(wěn)定一個月，只可凍融一次，避免反復(fù)凍融。參見校準(zhǔn)血清說明書。試劑盒配備的水標(biāo)準(zhǔn)液在2-8℃儲存至標(biāo)簽所示失效日期，開瓶后2-8℃儲存避免污染，可穩(wěn)定2個月。4．儀器KONELAB30型號儀器。性能：波長505nm，儀器測定吸光度的靈敏度應(yīng)達(dá)到0.001ABS以上。5．操作樣品為血清或肝素抗凝血漿。本法為終點法。參數(shù)見后附，附錄A。試劑參數(shù)設(shè)置、定標(biāo)操作以及樣本檢測常規(guī)操作，見儀器操作規(guī)程。6．計算ΔA測定C=————×CoΔA標(biāo)準(zhǔn)式中：c——測定尿酸濃度，μmol/L；ΔA=A2-A1ΔA測定——標(biāo)本管吸光度；ΔA標(biāo)準(zhǔn)——標(biāo)準(zhǔn)管吸光度；CO——校準(zhǔn)血清尿酸濃

6、度，μmol/L；7．操作性能7.1精密度：批內(nèi)CV≤8.3%，批間CV≤10.0%。7.2準(zhǔn)確度：檢測結(jié)果的相對不準(zhǔn)確度≤±10%。7.3靈敏度：尿酸濃度為：330μmol/L時，顯色吸光度為0.123～0.134。7.4可報告范圍：樣本:R1:R2=1:40:10時，測定上限為1180μmol/L。7.5特異性：測量值在給定值的95%-105％范圍內(nèi)。7.6干擾：內(nèi)源性干擾物為Hb1000mg/ml、TG2000mg/ml、BIL30mg/ml、VitC300mg/ml對測試結(jié)果無明顯影響。8．參考值男：210～430μmol/L；女：150～360μmol/L。

7、9．臨床意義尿酸是核酸中嘌呤分解代謝的最終產(chǎn)物，由腎臟排泄，隨尿液排出體外。腎臟疾病如急慢性腎炎、腎結(jié)石、痛風(fēng)、以及體內(nèi)核酸分解代謝過盛的疾病，如慢性白血病、多發(fā)性骨髓瘤、真性紅細(xì)胞增多癥等可使尿酸量增高；而惡性貧血及應(yīng)用ACTH、皮質(zhì)素、阿斯匹林等藥物時，血中尿酸量下降。附錄A:參數(shù)