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《冰凍切片彈性纖維(elastic)馬森(masson)染色試劑》由會(huì)員上傳分享,免費(fèi)在線閱讀,更多相關(guān)內(nèi)容在應(yīng)用文檔-天天文庫。
1、冰凍切片彈性纖維(ELASTIC)馬森(MASSON)染色試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)主要用途冰凍切片彈性纖維(ELASTIC)馬森(MASSON)染色試劑是一種旨在使用標(biāo)準(zhǔn)化的化學(xué)脫蠟方法和偉郝夫(Verhoeff)蘇木素以及三色染料(trichrome),分析和區(qū)分冰凍組織切片中的彈性纖維的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心改良傳統(tǒng)方法、成功實(shí)驗(yàn)證明的。廣泛用于結(jié)締組織、肌肉組織和纖維蛋白的研究等。產(chǎn)品嚴(yán)格無菌,即到即用,操作簡捷,性能穩(wěn)定,顯色清晰。技術(shù)背景彈性纖維(elasticfiber),又稱為黃色纖維(yellowfiber),是固有
2、結(jié)締組織(Connectivetissueproper)細(xì)胞外基質(zhì)的成分之一,由平滑肌細(xì)胞和成纖維細(xì)胞產(chǎn)生彈力蛋白質(zhì)(elastin)、原纖維蛋白(fibrillin;FBN)等構(gòu)成。彈性纖維具有可伸展性。存在于皮膚、肺、動(dòng)脈、靜脈、彈力軟骨、牙周韌帶(periodontalligament)、脂肪組織中。彈性纖維缺失導(dǎo)致皮膚松弛癥(cutislaxa)、威廉姆斯綜合征(WilliamsSyndrome)等疾病。基于摩羅利(mallory)首次應(yīng)用三色系統(tǒng)的方法,馬森(masson)進(jìn)行了改良,在三色復(fù)合染料體系中,使用苯胺籃(anilineblu
3、e)替代綠籃。同時(shí)使用偉郝夫(Verhoeff)蘇木素選擇性染色彈性纖維,三色復(fù)合染料幫助區(qū)別其它包括肌肉、膠原纖維、纖維蛋白(fibrin)等組織成分。馬森方法操作復(fù)雜,可以細(xì)致區(qū)分多種組織成分。產(chǎn)品內(nèi)容清理液(ReagentA)200毫升固著液(ReagentB)10毫升韋格液(ReagentC)100毫升祛色液(ReagentD)20毫升岑克液(ReagentE)100毫升范氏液(ReagentF)10毫升比氏液(ReagentG)10毫升酸性液(ReagentH)10毫升染色液(ReagentI)10毫升修正液(ReagentJ)10毫升脫
4、水液A(ReagentK)10毫升脫水液B(ReagentL)10毫升透明液(ReagentM)10毫升產(chǎn)品說明書1份保存方式保存在4℃冰箱里,避免光照;試劑具有腐蝕性,注意安全;有效保證6月用戶自備5小型玻璃染色缸:用于組織或切片處理的容器培養(yǎng)箱或烘箱:用于樣品反應(yīng)孵育微波爐:用于樣品反應(yīng)孵育處理中性樹脂:用于切片封片光學(xué)顯微鏡:用于切片染色后觀察分析實(shí)驗(yàn)步驟一、樣品固著處理1.準(zhǔn)備好5微米厚的冰凍切片2.小心加上200微升清理液(ReagentA)在切片上,鋪滿整個(gè)切片樣品表面3.室溫下孵育2分鐘4.小心移去切片上的清理液(ReagentA)5
5、.小心加上200微升固著液(ReagentB)在切片上,鋪滿整個(gè)切片樣品表面6.室溫下孵育5分鐘7.小心移去切片上的固著液(ReagentB)8.小心加上200微升清理液(ReagentA)在切片上,鋪滿整個(gè)切片樣品表面9.室溫下孵育2分鐘10.小心移去切片上的清理液(ReagentA)二、樣本染色處理操作一:標(biāo)準(zhǔn)染色1.小心加入1毫升韋格液(ReagentC)在切片上,鋪滿整個(gè)切片樣品表面2.放進(jìn)60℃恒溫培養(yǎng)箱孵育60分鐘3.小心移去韋格液(ReagentC)4.室溫下,小心將切片置入50毫升清理液(ReagentA)中孵育2分鐘5.小心移去切
6、片上的清理液(ReagentA)6.小心加入200微升祛色液(ReagentD)在切片上,鋪滿整個(gè)切片樣品表面7.室溫下孵育5分鐘8.小心移去祛色液(ReagentD)9.室溫下,小心將切片置入50毫升清理液(ReagentA)中孵育2分鐘10.小心移去切片上的清理液(ReagentA)11.小心加入1毫升岑克液(ReagentE)在切片上,鋪滿整個(gè)切片樣品表面12.放進(jìn)60℃恒溫培養(yǎng)箱孵育60分鐘13.小心移去岑克液(ReagentE)14.室溫下,小心將切片置入50毫升清理液(ReagentA)中孵育2分鐘15.小心移去切片上的清理液(Reag
7、entA)16.小心加入200微升范氏液(ReagentF)在切片上,鋪滿整個(gè)切片樣品表面17.室溫下孵育30分鐘18.小心移去范氏液(ReagentF)51.室溫下,小心將切片置入50毫升清理液(ReagentA)中孵育2分鐘2.小心移去切片上的清理液(ReagentA)3.小心加入200微升祛色液(ReagentD)在切片上,鋪滿整個(gè)切片樣品表面4.室溫下孵育5分鐘5.小心移去祛色液(ReagentD)6.室溫下,小心將切片置入50毫升清理液(ReagentA)中孵育2分鐘7.小心移去切片上的清理液(ReagentA)8.小心加入200微升比氏
8、液(ReagentG)在切片上,鋪滿整個(gè)切片樣品表面9.室溫下孵育5分鐘(注意:可以延長至15分鐘,增強(qiáng)染色效果)10.小