gd-bopta標記對人臍血內皮祖細胞生物學特性的影響與mr成像研究

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時間:2018-07-25

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資源描述:

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1、Gd-BOPTA標記對人臍血內皮祖細胞生物學特性的影響與MR成像研究王博1基金項目:教育部回國留學啟動基金(教外司留[2010]1561號),第三軍醫(yī)大學回國人員啟動基金(2009XHG14)作者簡介:王博(1983-),女,河南省禹州市人,漢族,碩士生,醫(yī)師,主要從事神經放射學方面的研究。電話:13526777661,E-mail:jingqin0405@163.com通訊作者:張偉國,電話:023-68757621,方靖琴2,王舒楠2,陳金華2,李雪2,張偉國2(1.鄭州大學第一附屬醫(yī)院放射

2、科,鄭州450052;2.第三軍醫(yī)大學大坪醫(yī)院野戰(zhàn)外科研究所放射科,重慶400042)摘要:目的探討Gd-BOPTA標記人臍血內皮祖細胞的方法和對標記內皮祖細胞(Endothelialprogenitorcells,EPCs)生物活性的影響,及標記細胞的體外磁共振成像特點,以期為磁性標記EPCs在體內的示蹤研究提供理論和實驗依據。方法應用密度梯度離心法結合貼壁貼壁篩選法分離培養(yǎng)EPCs。采用jetPEITM-FluoF介導Gd-BOPTA標記EPCs,比較不同標記濃度和標記時間對細胞生物活性的影

3、響,收集未標記細胞和標記24h的細胞進行體外MR成像,比較不同濃度標記的細胞在不同掃描序列中的信號強度變化。結果熒光顯微鏡下觀察,標記的EPCs胞質內可見綠色熒光顆粒,透射電鏡可見胞質內散在分布許多Gd顆粒,顆粒主要位于胞質的胞器如高爾基體周圍以及附著在細胞膜內層上。Gd-BOPTA標記規(guī)律呈“拋物線”樣,即隨著標記濃度增高和標記時間的延長,細胞內聚集的Gd顆粒增多,細胞的標記率也增高,但在濃度為25μg/ml標記24h標記率達峰值后,標記率逐漸降低,Gd-BOPTA在濃度為12.5μg/ml、

4、25μg/ml、37.5μg/ml的12h、24h標記率分別(55.7±0.79%)、(80.8±0.51%)、(71.6±0.64%)和(67.4±1.67%)、(88.2±1.56%)、(73.2±2.17%)。在標記濃度低于25μg/ml標記24h時,對細胞的粘附能力、遷移能力及增殖能力均無影響(P>0.05)。在T1WI序列最大相對信號強度出現(xiàn)在濃度為25μg/ml時(161%),而后信號降低,與對照管相比差異顯著(P<0.05),在T2WI和T2*WI序列上相對信號強度變化無顯著性差異

5、(P>0.05)。結論jetPEITM-FluoF可介導Gd-BOPTA有效地標記EPCs,對MR信號的影響主要為T1WI正性效應,最適標記濃度和最佳標記時間分別為25μg/ml、24h。關鍵詞:內皮祖細胞;細胞標記;生物活性;磁共振成像TheeffectofGd-BOPTAonGd-BOPTA-labeledHUCB-derivedendothelialprogenitorcellsandMagneticresonanceimaginginvitroWANGBo1,FANGJing-qin2,

6、WANGShu-nan2,CHENJin-hua2,LIXue2,ZHANGWei-Guo2(1:DepartmentofRadiology,TheFirstAffiliatedHospitalofZhengzhouUniversity,Zhengzhou450052;2:DepartmentofRadiology,DapingHospital,TheThirdMilitaryMedicalUniversity,Chongqing400042,China)AbstractObjectiveToi

7、nvestigatethelabelingmethodofGd-BOPTAandtheeffectofGd-BOPTAoncytobiologicalcharacteristicsofGd-BOPTAlabeled-EPCs,andexploreimagingcharacterizationoflabeledcellsbythetechniqueofmagneticresonanceimaging(MRI)invitroforprovidingexperimentalevidencesforEP

8、Cstransplantationintheclinicalapplication.MethodsSeparatedandculturedEPCsfromhumanumbilicalcordbloodviadensitygradientcentrifugationandadherencescreening.EPCswerelabeledwithGd-BOPTAthroughjetPEITM-FluoFactionastransfectionagent,andexaminetheinfluence

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