細(xì) 胞 生 物 學(xué) 實(shí)驗(yàn)課程教案講述

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1、細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)課程教案（1）實(shí)驗(yàn)題目血涂片的制備及細(xì)胞大小的測(cè)量實(shí)驗(yàn)學(xué)時(shí)3實(shí)驗(yàn)?zāi)康?.掌握血涂片的制備方法2.認(rèn)識(shí)紅細(xì)胞及各種白細(xì)胞的典型形態(tài)3．掌握顯微測(cè)微尺的使用方法實(shí)驗(yàn)原理　將血液樣品制成單層細(xì)胞的涂片標(biāo)本，經(jīng)瑞氏染液染色后，不同白細(xì)胞中的顆粒可以呈現(xiàn)不同的顏色。堿性粒細(xì)胞的顆粒呈藍(lán)紫色，酸性粒細(xì)胞的顆粒呈橘紅色，中性粒細(xì)胞的顆粒呈粉紅色。根據(jù)細(xì)胞中顆粒的顏色、大小及多少，再結(jié)合細(xì)胞的大小及細(xì)胞核的形態(tài)，就可以將白細(xì)胞進(jìn)行分類計(jì)數(shù)。實(shí)驗(yàn)儀器顯微鏡、粗天平、載玻片、滴管、離心管、離心機(jī)、醫(yī)用一次性采血針、酒精棉球、鑷子、載玻片、目鏡測(cè)微尺和鏡臺(tái)測(cè)微尺等實(shí)驗(yàn)材料雞血細(xì)胞實(shí)驗(yàn)

2、內(nèi)容與實(shí)施過程備注1.血涂片的制備與血細(xì)胞的觀察（50分鐘）:采血前用70％酒精棉球消毒人的指腹→采血→推片：擠出第二滴血置于載玻片的右側(cè)→再取另一張邊緣光滑的雙凹片，斜置于血滴的前緣，先向后稍移動(dòng)輕輕觸及血滴，使血液沿玻片端展開成線狀→兩玻片的角度以30~45°為宜，輕輕將雙凹片向前勻速推進(jìn)，即涂成血液薄膜→染色：用天平稱取去皮的土豆塊莖2g+10mlPBS緩沖液，浸泡2h→粗提液中含有可溶性土豆凝集素。2.顯微測(cè)微尺的使用（35分鐘）：以無菌方法抽取雞血注射器中抽取3.8%檸檬酸鈉1ml抽取雞靜脈血液2ml，用生理鹽水洗5次，每次2000r/min，離心5min，最后按壓

3、積紅細(xì)胞體積用生理鹽水配成2%紅細(xì)胞液。3.細(xì)胞的觀察與討論（50分鐘）：淋巴細(xì)胞、白細(xì)胞、中性粒細(xì)胞、堿性粒細(xì)胞和酸性粒細(xì)胞4、實(shí)驗(yàn)小結(jié)（15分鐘）：總結(jié)實(shí)驗(yàn)過程中學(xué)生的操作是否規(guī)范；實(shí)驗(yàn)是否成功，如果不成功，問題出在哪里；哪些實(shí)驗(yàn)作得比較好。提醒預(yù)習(xí)下節(jié)課實(shí)驗(yàn)內(nèi)容，提問。共150分鐘。實(shí)驗(yàn)作業(yè)1.繪制各種不同類型的血細(xì)胞,并說明它們的主要作用？2.任選20個(gè)紅細(xì)胞，測(cè)量其直徑，并計(jì)算出平均值.。參考資料（含參考文獻(xiàn)、期刊、雜志等）實(shí)驗(yàn)總結(jié)對(duì)于涂片的厚度一定要掌握，不然太厚不方便觀察細(xì)胞，對(duì)于各種白細(xì)胞的染色一定要把握好，適度的染色可容易的區(qū)分開五種白細(xì)胞，并進(jìn)行大小的測(cè)量

4、和繪圖。細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)課程教案（2）實(shí)驗(yàn)題目細(xì)胞化學(xué)實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)學(xué)時(shí)3實(shí)驗(yàn)?zāi)康氖煜ぜ?xì)胞脂類的顯示技術(shù)，了解其在細(xì)胞中的分布；學(xué)習(xí)區(qū)別定位細(xì)胞DNA、RNA的顯示方法實(shí)驗(yàn)原理?。?）蘇木精為堿性染料染細(xì)胞核，蘇丹紅為偶氮脂溶性染料，可顯示細(xì)胞中的脂類的分布及量；（2）甲基綠與DNA雙螺旋外側(cè)的磷酸根基團(tuán)結(jié)合力強(qiáng)，結(jié)合后阻止派洛寧從堿基之間插入。甲基綠與DNA的結(jié)合產(chǎn)物為綠色。派洛寧與RNA的結(jié)合力強(qiáng)，RNA結(jié)構(gòu)較松散，派洛寧可以插入，從而中和磷酸基團(tuán)，阻止甲基綠染色，派洛寧與RNA的結(jié)合物呈紅色，根據(jù)顏色的部位可以判斷DNA和RNA的定位并且判斷兩種核酸的相對(duì)含量。實(shí)驗(yàn)儀器水浴鍋、

5、冰凍切片機(jī)、載玻片等；實(shí)驗(yàn)材料豬肝、花生子葉實(shí)驗(yàn)內(nèi)容與實(shí)施過程備注1.脂類顯示（65分鐘）：用豬肝切片和花生的超薄切片，學(xué)習(xí)掌握使用冰凍切片機(jī)的操作技術(shù)，獲得理想的切片；2.細(xì)胞中DNA和RNA的顯示（70分鐘）：材料選用豬肝印片，學(xué)習(xí)如何制備肝印片的片子，而后進(jìn)行固定、浸洗、染色等即可顯示二者在細(xì)胞中的分布。3、實(shí)驗(yàn)小結(jié)（15分鐘）：總結(jié)實(shí)驗(yàn)過程中學(xué)生的操作是否規(guī)范；實(shí)驗(yàn)是否成功，如果不成功，問題出在哪里；哪些實(shí)驗(yàn)作得比較好。提醒預(yù)習(xí)下節(jié)課實(shí)驗(yàn)內(nèi)容，提問。共150分鐘。凝集素是一類含糖、并能與糖專一結(jié)合的蛋白質(zhì),被認(rèn)為與糖的運(yùn)輸、儲(chǔ)存物質(zhì)的積累、細(xì)胞間的互作以及細(xì)胞分裂的調(diào)

6、控有關(guān)。實(shí)驗(yàn)作業(yè)細(xì)胞中脂類和核酸顯示的原理是什么？參考資料（含參考文獻(xiàn)、期刊、雜志等）實(shí)驗(yàn)總結(jié)植物材料兩種化學(xué)成分的顯示結(jié)果都比較好，但是豬肝的效果較差，這可能與切片的厚度有很大的關(guān)系，豬肝組織柔軟不像花生子葉好切。細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)課程教案（3）實(shí)驗(yàn)題目細(xì)胞凝集反應(yīng)實(shí)驗(yàn)學(xué)時(shí)3實(shí)驗(yàn)?zāi)康?.學(xué)習(xí)制備土豆凝集素2.掌握細(xì)胞凝集反應(yīng)的實(shí)驗(yàn)方法及細(xì)胞凝聚的原理。3.觀察凝集的現(xiàn)象實(shí)驗(yàn)原理?、偌?xì)胞質(zhì)膜外表面的一層黏性多糖物質(zhì)構(gòu)成的細(xì)胞全委會(huì)被在細(xì)胞間的聯(lián)系和識(shí)別、細(xì)胞的生長分化、免疫反應(yīng)及腫瘤發(fā)生等過程中發(fā)揮著重要作用?！、趧?dòng)物細(xì)胞表面的糖蛋白、糖脂中的糖鏈伸向膜表面，它們是細(xì)胞識(shí)別、細(xì)胞

7、免疫及細(xì)胞接觸抑制現(xiàn)象的必要組分?！　、勰厥且活惡堑?少數(shù)例外)并能與糖專一性結(jié)合的蛋白質(zhì)，它具有凝集細(xì)胞和刺激細(xì)胞分裂的作用。凝集使細(xì)胞凝集是由于它與細(xì)胞表面的糖分子連接，在細(xì)胞間形成“橋”的結(jié)果。　?、苣嘏c糖分子結(jié)合有一定的專一性和結(jié)合價(jià)，并與細(xì)胞膜上受體的分布有關(guān)。實(shí)驗(yàn)儀器顯微鏡、粗天平、載玻片、滴管、離心管、離心機(jī)等實(shí)驗(yàn)材料土豆塊莖、雞血細(xì)胞實(shí)驗(yàn)內(nèi)容與實(shí)施過程備注1.凝集素粗提液制備（50分鐘）：用天平稱取去皮的土豆塊莖2g+10mlPBS緩沖液，浸泡2h→粗提液中含有可溶性土豆凝集素