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《細 胞 生 物 學 實驗課程教案講述》由會員上傳分享,免費在線閱讀,更多相關內容在教育資源-天天文庫。
1、細胞生物學實驗課程教案(1)實驗題目血涂片的制備及細胞大小的測量實驗學時3實驗目的1.掌握血涂片的制備方法2.認識紅細胞及各種白細胞的典型形態(tài)3.掌握顯微測微尺的使用方法實驗原理 將血液樣品制成單層細胞的涂片標本,經(jīng)瑞氏染液染色后,不同白細胞中的顆粒可以呈現(xiàn)不同的顏色。堿性粒細胞的顆粒呈藍紫色,酸性粒細胞的顆粒呈橘紅色,中性粒細胞的顆粒呈粉紅色。根據(jù)細胞中顆粒的顏色、大小及多少,再結合細胞的大小及細胞核的形態(tài),就可以將白細胞進行分類計數(shù)。實驗儀器顯微鏡、粗天平、載玻片、滴管、離心管、離心機、醫(yī)用一次性采血針、酒精棉球、鑷子、載玻片、目鏡測微尺和鏡臺測微尺等實驗材料
2、雞血細胞實驗內容與實施過程備注1.血涂片的制備與血細胞的觀察(50分鐘):采血前用70%酒精棉球消毒人的指腹→采血→推片:擠出第二滴血置于載玻片的右側→再取另一張邊緣光滑的雙凹片,斜置于血滴的前緣,先向后稍移動輕輕觸及血滴,使血液沿玻片端展開成線狀→兩玻片的角度以30~45°為宜,輕輕將雙凹片向前勻速推進,即涂成血液薄膜→染色:用天平稱取去皮的土豆塊莖2g+10mlPBS緩沖液,浸泡2h→粗提液中含有可溶性土豆凝集素。2.顯微測微尺的使用(35分鐘):以無菌方法抽取雞血注射器中抽取3.8%檸檬酸鈉1ml抽取雞靜脈血液2ml,用生理鹽水洗5次,每次2000r/min
3、,離心5min,最后按壓積紅細胞體積用生理鹽水配成2%紅細胞液。3.細胞的觀察與討論(50分鐘):淋巴細胞、白細胞、中性粒細胞、堿性粒細胞和酸性粒細胞4、實驗小結(15分鐘):總結實驗過程中學生的操作是否規(guī)范;實驗是否成功,如果不成功,問題出在哪里;哪些實驗作得比較好。提醒預習下節(jié)課實驗內容,提問。共150分鐘。實驗作業(yè)1.繪制各種不同類型的血細胞,并說明它們的主要作用?2.任選20個紅細胞,測量其直徑,并計算出平均值.。參考資料(含參考文獻、期刊、雜志等)實驗總結對于涂片的厚度一定要掌握,不然太厚不方便觀察細胞,對于各種白細胞的染色一定要把握好,適度的染色可容易
4、的區(qū)分開五種白細胞,并進行大小的測量和繪圖。細胞生物學實驗課程教案(2)實驗題目細胞化學實驗實驗學時3實驗目的熟悉細胞脂類的顯示技術,了解其在細胞中的分布;學習區(qū)別定位細胞DNA、RNA的顯示方法實驗原理?。?)蘇木精為堿性染料染細胞核,蘇丹紅為偶氮脂溶性染料,可顯示細胞中的脂類的分布及量;(2)甲基綠與DNA雙螺旋外側的磷酸根基團結合力強,結合后阻止派洛寧從堿基之間插入。甲基綠與DNA的結合產(chǎn)物為綠色。派洛寧與RNA的結合力強,RNA結構較松散,派洛寧可以插入,從而中和磷酸基團,阻止甲基綠染色,派洛寧與RNA的結合物呈紅色,根據(jù)顏色的部位可以判斷DNA和RNA的
5、定位并且判斷兩種核酸的相對含量。實驗儀器水浴鍋、冰凍切片機、載玻片等;實驗材料豬肝、花生子葉實驗內容與實施過程備注1.脂類顯示(65分鐘):用豬肝切片和花生的超薄切片,學習掌握使用冰凍切片機的操作技術,獲得理想的切片;2.細胞中DNA和RNA的顯示(70分鐘):材料選用豬肝印片,學習如何制備肝印片的片子,而后進行固定、浸洗、染色等即可顯示二者在細胞中的分布。3、實驗小結(15分鐘):總結實驗過程中學生的操作是否規(guī)范;實驗是否成功,如果不成功,問題出在哪里;哪些實驗作得比較好。提醒預習下節(jié)課實驗內容,提問。共150分鐘。凝集素是一類含糖、并能與糖專一結合的蛋白質,被
6、認為與糖的運輸、儲存物質的積累、細胞間的互作以及細胞分裂的調控有關。實驗作業(yè)細胞中脂類和核酸顯示的原理是什么?參考資料(含參考文獻、期刊、雜志等)實驗總結植物材料兩種化學成分的顯示結果都比較好,但是豬肝的效果較差,這可能與切片的厚度有很大的關系,豬肝組織柔軟不像花生子葉好切。細胞生物學實驗課程教案(3)實驗題目細胞凝集反應實驗學時3實驗目的1.學習制備土豆凝集素2.掌握細胞凝集反應的實驗方法及細胞凝聚的原理。3.觀察凝集的現(xiàn)象實驗原理?、偌毎|膜外表面的一層黏性多糖物質構成的細胞全委會被在細胞間的聯(lián)系和識別、細胞的生長分化、免疫反應及腫瘤發(fā)生等過程中發(fā)揮著重要作用
7、?!、趧游锛毎砻娴奶堑鞍?、糖脂中的糖鏈伸向膜表面,它們是細胞識別、細胞免疫及細胞接觸抑制現(xiàn)象的必要組分。 ?、勰厥且活惡堑?少數(shù)例外)并能與糖專一性結合的蛋白質,它具有凝集細胞和刺激細胞分裂的作用。凝集使細胞凝集是由于它與細胞表面的糖分子連接,在細胞間形成“橋”的結果。 ?、苣嘏c糖分子結合有一定的專一性和結合價,并與細胞膜上受體的分布有關。實驗儀器顯微鏡、粗天平、載玻片、滴管、離心管、離心機等實驗材料土豆塊莖、雞血細胞實驗內容與實施過程備注1.凝集素粗提液制備(50分鐘):用天平稱取去皮的土豆塊莖2g+10mlPBS緩沖液,浸泡2h→粗提液中含有可溶性
8、土豆凝集素