產(chǎn)超廣譜β內(nèi)酰胺酶大腸埃希菌與肺炎克雷伯菌耐藥性分析

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1、產(chǎn)超廣譜β內(nèi)酰胺酶大腸埃希菌與肺炎克雷伯菌耐藥性分析［摘要］目的：了解醫(yī)院大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌產(chǎn)超廣譜β內(nèi)酰胺酶(ESBLs)的發(fā)生率和耐藥情況。方法：據(jù)NCCLS文件，產(chǎn)ESBLs細菌的檢測用雙紙片確認法，抗生素敏感測定采用KB瓊脂擴散法。結(jié)果：在檢出的168株大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌中，ESBLs陽性的菌株有53例，檢出率為31.5%。檢出的產(chǎn)ESBLs細菌對所有青霉素類抗生素產(chǎn)生耐藥，產(chǎn)ESBLs對三代頭孢類抗生素頭孢曲松、頭孢噻肟的耐藥率>91%,對磺胺類、喹諾酮類也在７6％以上，產(chǎn)

2、ESBLs組細菌明顯高于不產(chǎn)ESBLs的細菌，對亞胺培南全部敏感。結(jié)論：醫(yī)院大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌產(chǎn)ESBLs發(fā)生率較高，且對多種抗生素呈交叉耐藥和多重耐藥，應(yīng)做好常規(guī)檢測和監(jiān)測，指導(dǎo)臨床合理使用抗生素?！　。坳P(guān)鍵詞］超廣譜β內(nèi)酰胺酶；大腸埃希菌；肺炎克雷伯菌；耐藥性　　超廣譜β7內(nèi)酰胺酶(ESBLs)大腸埃希菌與肺炎克雷伯菌能水解青霉素類、頭孢菌素類、單酰胺類抗生素，從而使之失效［1］，而且還對喹諾酮類、氨基糖苷類、磺胺類抗生素交叉耐藥，隨著廣譜抗生素的使用，ESBLs陽性細菌日趨增多，耐藥也日趨嚴

3、重。我們對我院168株大腸埃希菌與肺炎克雷伯菌進行ESBLs檢出率和14種抗生素耐藥率分析，以便指導(dǎo)臨床合理使用抗生素，現(xiàn)報道如下?！　?材料與方法　　1.1材料　　1.1.1菌株來源2002年3月至2004年3月從門診和住院患者如尿、痰、咽拭等標(biāo)本中分離出大腸埃希菌與肺炎克雷伯菌共168株，其中大腸埃希菌92株，肺炎克雷伯菌76株?！　?.1.2標(biāo)準(zhǔn)菌株大腸埃希菌ATCC25922，肺炎克雷伯菌ATCC700603。7　　1.1.3藥敏紙片阿莫西林/棒酸、亞胺培南均購自法國梅里埃公司，其余各紙片均購自北京

4、天壇生物技術(shù)開發(fā)公司?！　?.2方法　　1.2.1ESBLs雙紙片確證法按NCCLS文件要求當(dāng)頭孢他啶的抑菌圈≤22mm，氨曲南的抑菌圈　≤27mm，頭孢噻肟的抑菌圈≤27mm，頭孢曲松的抑菌圈≤25mm時，提示可能有ESBLs的產(chǎn)生。做雙紙片確證實驗，將頭孢他啶30μg、頭孢他啶/克拉維酸30/10μg和頭孢噻肟30μg、頭孢噻肟/克拉維酸　30/10μg貼于涂抹好菌液的MH平板上，孵育16h～18h，兩個藥物中有任何一個，再加克拉維酸后，抑菌圈直徑與不加克拉維酸的抑菌圈相比，增大值≥5mm時，判定為產(chǎn)

5、ESBLs。7　　1.2.2藥敏試驗采取紙片擴散法(KB法)，判斷標(biāo)準(zhǔn)按NCCLS2002版標(biāo)準(zhǔn)執(zhí)行?！　?結(jié)果　　2.1ESBLs檢出率細菌分離總數(shù)為168株，通過確證方法確證ESBLs陽性菌株53株，陽性率為31.5%，其中大腸埃希菌92株，確證陽性菌株27株，陽性率為29.3%，肺炎克雷伯菌76株，確證陽性菌株26株，陽性率為34.2%。　　2.2耐藥率產(chǎn)ESBLs大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌對氨芐西林、哌拉西林、頭孢唑林耐藥率達100%，對頭孢曲松、頭孢噻肟、頭孢哌酮、頭孢他啶、氨曲南的耐藥率也在72

6、.3%～100%，對阿米卡星、環(huán)丙沙星、復(fù)方新諾明耐藥率也在40%以上，對頭孢哌酮/舒巴坦敏感性較好，在15%以下，沒有耐亞胺培南的菌株，見表1。7　　表1ESBLs陽性與ESBLs陰性大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌對14種抗生素的耐藥率(略)　　3討論　　隨著三代抗生素的應(yīng)用，產(chǎn)ESBLs的細菌日趨增多。ESBLs主要由腸桿菌科細菌產(chǎn)生，大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌為其代表菌株。本組資料顯示，我院產(chǎn)ESBLs總檢出率為31.5%，大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌的檢出率分別為29.3%、34.2%，與文獻［2］報道一致，但

7、也高于國內(nèi)一些報道，這可能與本院三代頭孢類抗生素大量使用有關(guān)。藥敏結(jié)果顯示，產(chǎn)ESBLs組對氨芐西林、哌拉西林、頭孢啉林和三代頭孢類抗生素及氨曲南的耐藥率，明顯高于不產(chǎn)7ESBLs組。產(chǎn)ESBLs菌株往往帶有氨基糖苷類和氟喹諾酮類等的耐藥基因形成多重耐藥株［3］，其對丁胺卡那的耐藥率在29%以上，而對環(huán)丙沙星的耐藥率高達75.6%～86.7%，這可能與臨床醫(yī)生的經(jīng)驗用藥和氟喹諾酮類的廣泛使用有關(guān)。因此不主張這兩類藥物作為治療感染的經(jīng)驗用藥。一般認為可用于治療產(chǎn)ESBLs細菌感染的藥物有：碳青霉烯類抗生素、頭

8、霉素類抗生素及β內(nèi)酰胺類、β內(nèi)酰胺類復(fù)合劑［4］。本組資料顯示產(chǎn)ESBLs細菌對亞胺培南全部敏感，是治療產(chǎn)ESBLs細菌感染的首選藥。頭孢哌酮、舒巴坦對產(chǎn)ESBLs細菌也有較好的抗菌活性，耐藥率僅為3.5%～12.3%。頭孢西丁對產(chǎn)ESBLs細菌的耐藥率為32.1%，其耐藥機制可能與ESBLs對含有7a甲基側(cè)鏈的頭霉素相對穩(wěn)定有關(guān)。由于ESBLs的基因編碼位于質(zhì)粒上，它可以通過轉(zhuǎn)導(dǎo)、轉(zhuǎn)化、轉(zhuǎn)移和接合等方式在