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《六月青皂苷對四氯化碳誘導的大鼠肝纖維化的影響》由會員上傳分享,免費在線閱讀,更多相關(guān)內(nèi)容在學術(shù)論文-天天文庫。
1、六月青皂苷對四氯化碳誘導的大鼠肝纖維化的影響作者:陳兆霓,張士軍,唐愛存,李勇文,黃仁彬【摘要】目的研究六月青皂苷(LYQS)對四氯化碳(carbontetrachloride,CCl4)所致大鼠肝纖維化的治療作用,并探討其作用機制。方法Wistar大鼠隨機分成兩組,模型組大鼠采用50%CCl4花生油溶液灌胃造模,共7周,空白對照組用生理鹽水代替。將病理檢查確認肝纖維化形成的Wistar大鼠50只,隨機分成5組,分別給予相應(yīng)藥物進行干預,1次/d,連續(xù)4周。末次給藥24h后處死大鼠,采集血清及肝組
2、織,檢測大鼠血清中ALT、AST,肝組織中Hyp、SOD、MDA和GSH-Px的水平。結(jié)果各劑量的六月青皂苷及陽性藥能顯著降低大鼠血清中CCl4所致異常升高的ALT(P<0.01);高、中劑量六月青皂苷及陽性藥可降低大鼠血清中CCl4所致異常升高的AST(P<0.01);同時,各劑量的六月青皂苷能顯著提高肝組織中異常降低的SOD、GSH-Px水平(P<0.05或P<0.01),并顯著降低異常升高的Hyp、MDA含量(P<0.05或P<0.01)。隨著藥物濃度的增
3、加,其作用逐漸增強,呈現(xiàn)明顯的量效反應(yīng)關(guān)系。結(jié)論六月青皂苷對大鼠化學性肝損傷具有一定程度的治療作用,其機制可能與其清除自由基,抑制脂質(zhì)過氧化有一定的關(guān)系。【關(guān)鍵詞】六月青;皂苷;肝纖維化7 六月青是廣西民間草藥,系爵床科(Acanthaceae)植物肖雞籠(頂頭馬蘭)Taraphochlamysaffinis(Griff)Bremekhu[Strobilanthesaffinis(griff)Y.C.Tang]的干燥地上部分[1]?!侗静菔斑z》記載,該藥能活血,涼血,疏肝瀉濕,消腫止痛,主要用于急
4、慢性肝炎,黃疸等[2]。本課題組經(jīng)過多年研究發(fā)現(xiàn),以六月青為君藥的復方六月青對四氯化碳、對乙酰氨基酚、D-半乳糖胺等所致小鼠急性化學性肝損傷均有明顯的保護作用[3];在體外對血清中HBsAg和HBeAg均有明顯的抑制作用[4]。此外,研究者在對六月青的初步研究中發(fā)現(xiàn),六月青的石油醚部位和60%乙醇部位對小鼠的免疫功能有明顯的增強作用[5]。本實驗就該藥對CCl4造成大鼠的肝纖維化的影響進行初步研究。 1材料 1.1動物健康雄性Wistar大鼠90只,SPF級,體質(zhì)量150~200g,由廣西醫(yī)科
5、大學實驗動物中心提供。實驗動物生產(chǎn)許可證:SCXKG桂2003-0003,實驗動物使用許可證:SYKG桂2003-0005。常規(guī)鼠飼料喂養(yǎng),自由飲水?! ?.27藥物及試劑六月青皂苷(LYQS):由本實驗室自行提取完成;花生油:市售;四氯化碳(分析純):成都市科龍化工試劑廠,批號:20070910;秋水仙堿片:西雙版納藥業(yè)有限責任公司,批號:080706。AST、ALT、Hyp、SOD、MDA、GSH-Px試劑盒:南京建成生物工程研究所產(chǎn)品,批號均為:081230?! ?方法 2.1動物造模Wi
6、star大鼠隨機分成兩組:空白對照組及肝纖維化模型組。肝纖維化模型組75只,采用花生油配成體積分數(shù)為50%的CCl4溶液,按CCl41ml/kg體質(zhì)量每周灌胃2次,稱質(zhì)量1次/周,按實際體重調(diào)整給藥劑量[6]。正常對照組15只,采用生理鹽水灌胃,劑量同50%CC14花生油溶液,2次/周。分別于造模后第5周、第6周及第7周抽取肝纖維化模型組大鼠2只及正常對照組大鼠1只,進行病理學檢查,監(jiān)測肝纖維化形成的情況。 2.2動物分組及用藥將病理檢查確認形成肝纖維化的Wistar大鼠50只,隨機分為5組,加
7、上空白對照組10只,共計6組,分別為:空白對照組,給予生理鹽水10ml/kg;模型對照組,給予生理鹽水10ml/kg;陽性組,給予秋水仙堿0.2mg/kg;LYQS高、中、低劑量組,分別給予16.67,8.33,4.16g生藥/kg。各組動物在同樣條件下飼養(yǎng),均以1次/d,空腹灌胃,連續(xù)給藥4周。以上各組除空白對照組外,其余各組均繼續(xù)給予50%CCl4花生油溶液,2次/周。每周稱重,并相應(yīng)調(diào)整CCl4造模劑量及用藥劑量。7 2.3樣本制備末次給藥24h后,戊巴比妥鈉麻醉,打開腹腔,腹主動脈取血,
8、分離血清于-20℃保存,用于測定ALT、AST;取肝組織做相應(yīng)濃度勻漿后于-70℃冰箱保存,用于SOD、MDA、GSH-Px及考馬斯亮藍的測定;另取部分肝組織于-70℃冰箱保存,用于Hyp的測定。 2.4指標測定血清中ALT,AST和肝組織Hyp,GSH-Px,SOD,MDA的檢測,嚴格按照試劑盒說明書進行操作。 2.5統(tǒng)計學處理應(yīng)用SPSS13.0軟件進行統(tǒng)計分析。數(shù)據(jù)均以±s表示,各組間比較采用單因素方差分析,經(jīng)方差齊性檢驗,方差齊者組間兩兩比較采用LSD法,方差不齊者組間